卵母细胞体外成熟时间对绵羊核移植效率的影响(英文)

[Objective] The study aimed to provide references for the time of oocyte maturation in vitro and enucleation in the course of sheep nuclear transfer(NT).[Method] Compared the effects of different maturation time of oocytes on enucleation efficiency and reconstructed embryo development by means of blind enucleation and fluorescence microscopy.[Result] Treatment of IVM(in vitro maturation)19-21 h was significantly higher than IVM 16-18 h treatment in oocyte maturation rate(P<0.05)and was significantly higher than IVM 22-24 h treatment in enucleation rate(P<0.05).Three treatments had no significant difference in cleavage rate and blastocyst rate(P>0.05),but IVM 19-21 h treatment was significantly higher than the other 2 treatments in average cell number of blastocysts(P<0.05).[Conclusion] The appropriate in vitro maturation time of oocytes was 19-21 h for sheep nuclear transfer,which could significantly improve the quality of blastocysts according to the cell number per blastocyst(P<0.05).     

猪卵母细胞的电激活

以湖北白猪体内或体外成熟卵母细胞为对象,研究不同直流脉冲条件、激活液Ｃａ＾２＋浓度及卵龄对猪卵母细胞电激活的影响,并比较了体内与体外成熟卵的激活率与发育率。结果表明,脉冲强度、脉冲次数、脉冲时间、Ｃａ＾２＋浓度及卵龄均可影响激活效果。１次脉冲就足以激活猪卵母细胞,脉冲时间以４０￣６０μｓ为优,强度以１２５０Ｖ／ｃｍ（体外成熟卵）或１５００Ｖ／ｃｍ（体内成熟卵）为优,激活液Ｃａ＾２＋浓度０．０５ｍｍ     

卵母细胞成熟的形态学特征及其调控

综述卵母细胞成熟的形态结构特点,卵泡内环境对卵母细胞生长、发育的影响,以及卵母细胞成熟的分子调节机制。     

黄海高眼鲽卵巢发育特征及卵径分布

本研究通过组织学观察,描述了黄海高眼鲽(Cleisthenes herzensteini)卵母细胞发育特征及其退化过程。高眼鲽卵母细胞发育分为5个时相:第1时相为卵原细胞,细胞体积小,细胞质少,细胞核明显;第2时相卵母细胞细胞核附近出现卵黄核;第3时相由胞质外缘向内层逐渐产生液泡并生成卵黄颗粒,出现双层滤泡膜;第4时相卵母细胞内充满卵黄,细胞核向动物极移动,放射膜增厚;第5时相细胞核溶解,卵母细胞从滤泡膜中释放出来并发生水合作用;产卵期过后,卵巢发生退化,卵黄颗粒逐渐被吞噬,放射膜溶解断裂。通过比较卵巢中各时相卵母细胞组成比例,表明卵母细胞发育具有非同步性。Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ-Ⅳ'期卵巢内卵径(长径)呈单峰分布,优势粒径组分别为0.45~0.55 mm、0.60~0.65 mm和0.40~0.50 mm;Ⅴ'期卵巢,卵径分布呈双峰型,峰值分别为0.50~0.55 mm和0.90~0.95 mm,水合卵母细胞与卵径较小的小生长期卵母细胞比例增大,呈现出明显的双峰分批产卵型特征。     

孕酮受体膜组分1基因在性成熟雌性半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的组织学定位定量分析

运用Western blotting、免疫组化和原位杂交方法检测性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)孕酮受体膜组分1(Progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)蛋白和mRNA在不同组织的分布和表达特征.原位杂交结果发现,PGRMC1 mRNA主要分布在成熟的卵母细胞膜上,在脑组织神经元和分散的垂体细胞中也有表达.利用制备的半滑舌鳎PGRMC1多克隆抗体,对不同组织中的PGRMC1蛋白表达量进行Western blotting检测,发现在半滑舌鳎卵巢、脑、肝脏中PGRMC1蛋白表达量相对较高,在垂体、头肾、肾也有表达,但表达量相对较少.免疫组化结果表明,半滑舌鳎PGRMC1蛋白在成熟的卵母细胞膜上显著表达,进一步证明PGRMC1为卵膜上的受体基因,推测其主要在卵膜上行使相关的生理功能.研究结果为探究PGRMC1在半滑舌鳎卵母细胞成熟过程中的生理功能提供了重要参考.     

体外成熟对牛卵母细胞孤雌激活后发育潜力的影响

本试验在卵母细胞体外成熟的研究基础上,研究了培养用水、卵泡液和成熟时间对卵母细胞体外成熟及孤雌激活后发育潜力的影响.结果表明(1)将卵母细胞分别于蒸馏水和Milli-Q超纯水配制的成熟培养液中培养22～24 h, 孤雌激活后, 卵裂率无显著差异(P>0.05); 但孤雌卵在超纯水配制的胚胎培养液中培养,囊胚发育率为22.3%, 明显高于在蒸馏水配制的培养液中的囊胚发育率14.1%(P<0.05).(2)在成熟培养液中添加10%、20%卵泡液,成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(32.3%, 30.9%)明显高于添加5%和0%卵泡液组的囊胚发育率(21.8%, 22.7%,P<0.05).卵母细胞在添加20%卵泡液的培养液中成熟培养,孤雌激活后囊胚孵化率明显低于添加0、5%、10%卵泡液组的囊胚孵化率(P<0.05).(3)成熟28 h或30 h的卵母细胞孤雌激活后,其囊胚发育率(30.5%或29.4%)明显高于成熟24 h或26 h组的囊胚发育率(20.5%或22.1%,P<0.05).     

牛活体采集卵母细胞技术研究进展

活体采卵是良种胚胎产业化生产的关键技术,具有生产胚胎成本低、效率高,对供体母畜生产和繁殖性能无不良影响等特点,本文综述了牛活体采卵方法、影响采卵效果因素及存在问题等方面的研究进展,对当前肉牛、奶牛发展具有重要指导意义。     

Towards a universal scale to assess sexual maturation and related life history traits in oviparous teleost fishes

The literature presents a confusing number of macroscopic maturation scales for fish gonads, varying from over-simplified scales comprising three to four stages to highly specific and relatively complicated nine-stage scales. The estimation of some important life history traits are dependent on a correct assessment and use of the gonadal maturation scales, and frequent mistakes have been made in many studies. The goal of this report is to provide a synthetic, relatively simple, yet precise maturation scale that works for most oviparous teleost fishes. The synthetic scale proposed here is based on the correspondence between key physiological and cytological processes of gamete development and corresponding modifications observed at the macroscopic level. It is based on previous and ongoing studies of several fish species pertaining to some of the most important African and Neotropical taxa, including Characiformes, Siluriformes, Osteoglossiformes and Perciformes. This scale should allow for standardized protocols of field studies and improve intra- and inter-specific comparisons of life history traits. Guidelines on the correct use of this scale to estimate these life history traits are provided.     

水牛卵母细胞体外受精与早期胚胎发育的研究

本实验通过 3种水牛卵母细胞体外成熟培养系统的比较 ,与早期胚胎发育研究结果表明 ,3组是最好的培养系统 ,卵母细胞成熟率为 5 1.9% (2 8 5 4 ) ;卵裂率为 5 2 .76 %± 9.0 8% (193 35 9) ;囊胚率 (占授精卵数 )为 2 7.2 2 %± 9.17% (10 1 35 9)、(占分裂卵数 )为 5 2 .13%± 16 .32 % (10 1 193) ;孵化囊胚率为 83.34%± 11.5 6 % (85 10 1)。该系统为含 10 %FBS的TCM - 199液中添加促性腺激素FSH、LH ,类固醇激素E2 ,表皮生长因子 (EGF)和硫醇类化合物β—巯基乙醇 (β—ME)的较完善系统。据 39批次早期胚胎体外发育至囊胚 (343枚 )所需时间 (以授精当日为 0d计算 )分析 ,5d囊胚 2枚 (0 .6 % ) ;6d囊胚 89枚 (2 5 .9% ) ;7d囊胚14 9枚 (43.4 % ) ;8d囊胚 73枚 (2 1.3% ) ;9d囊胚 2 5枚 (7.3% ) ;10d囊胚 5枚 (1.5 % )。2头经超数排卵处理的母水牛 ,授精后第5d非手术回收 3枚囊胚 ,说明受精卵在体外发育速度比在体内发育慢 ,推测试管水牛胚胎移植的适宜时间 ,应是受体母牛站立发情后第 4～ 6d     

山羊超数排卵处理后排卵时间的研究

本试验以江苏地方山羊为材料,经FSH超数排卵后,在发情后不同时间屠宰母山羊,并冲洗输卵管获取卵子。试验中发现山羊的排卵时间为发情开始后18～20小时,排卵时部分卵子尚未完成第1次成熟分裂。