河南省部分地区饲料和鸡蛋中恩诺沙星检测分析

恩诺沙星属于第三代喹诺酮类药物。因其抗菌谱广，临床效果卓越而广受养殖场的青睐。我国农业农村部规定饲料和鸡蛋中不得检测出恩诺沙星，但近些年饲料和鸡蛋检测出恩诺沙星的事件时有发生。农业农村部第194号公告公布自2020年7月1日起全面禁止促生长药物饲料添加剂。本文在氟喹诺酮残留检测国家标准的基础上对色谱条件和样品前处理进行优化，建立了高效液相色谱仪检测鸡蛋恩诺沙星的方法。该方法流动相为磷酸三乙胺（82%）和乙腈（18%），外标法定量，乙腈为去蛋白试剂，正己烷为除脂肪溶液，磷酸缓冲液作为提取液。线性范围5～500μg/L，R2=0.999650，定量下限为5μg/L。方法建立后对来自郑州市、信阳市和驻马店市三地的饲料和两个超市与农贸市场的150批次鸡蛋进行了检测，合格率为100%，为194号公告发布后的兽药残留监测情况提供参考。 [关键词]恩诺沙星|高效液相色谱仪|饲料|鸡蛋|兽药残留     

恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在欧洲鳗鲡体内的代谢动力学

采用高效液相色谱法,研究药饵口灌给药途径下,恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)体内的药代动力学。欧洲鳗鲡口灌给药恩诺沙星10 mg/kg后,其血浆、肌肉和肝脏中药物时量曲线关系符合一级吸收的二室开放动力学模型。恩诺沙星在欧洲鳗鲡不同组织中分布较广,血浆、肌肉和肝脏的Vd分别为6.362 L/kg、8.081 L/kg和15.870 L/kg;恩诺沙星在鳗鲡体内消除较慢,在血浆、肌肉和肝脏中的消除半衰期(tβ1/2)分别为161.10 h、333.21 h和611.26 h,总体清除率(CLs)分别为27.4 mL/(kg.h)、16.8 g/(kg.h)和18.0 g/(kg.h)。代谢物环丙沙星在鳗鲡血浆、肌肉和肝脏中药物水平的变化趋势与恩诺沙星基本相似,呈现出多峰现象,但3种组织中环丙沙星出现第一个药峰时间分别为给药后第24小时、24小时和12小时,3种组织中环丙沙星峰值水平肝脏中最高、肌肉中次之、血浆中最低,环丙沙星在肌肉和肝脏中的消除速率比较缓慢。鉴于恩诺沙星和其代谢物环丙沙星在欧洲鳗鲡体内消除较慢,建议养成阶段使用其他药物。     

抗菌素对草鱼肠道免疫和菌群的影响

为探究抗菌素对草鱼免疫和肠道菌群的影响，本实验以草鱼为研究对象，设置基础饲料(对照组)、基础饲料添加恩诺沙星或氟苯尼考3组饲料，投喂草鱼2周后，通过肠道酶活检测、荧光定量PCR (qRT-PCR)和高通量测序技术分析饲料中添加抗菌素对草鱼肠道免疫及肠道菌群多样性影响。分析结果显示，(1)饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考降低了草鱼肠道谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量，提高丙二醛(MDA)的含量，导致草鱼肠道氧化应激。(2)氟苯尼考组中的TNF-α、IL-1β、IL-12、NF-κB-P65、MHCⅡ、s IgM等免疫因子和ZO-1、ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3等黏膜相关蛋白的mRNA表达量显著下降，恩诺沙星组的免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-12、TLR4、MHCⅡ和黏膜相关基因ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3的mRNA表达量显著下降。(3)通过16S rRNA高通量测序来揭示拌食投喂抗菌素对草鱼肠道微生物群落结构的影响，分析结果显示，饲料中添加恩诺沙星或氟苯尼考对草鱼肠道α多样性无显著差异，但对...     

恩诺沙星在马口鱼体内的代谢动力学

为了解恩诺沙星在马口鱼体内的代谢消除规律,本研究采用高效液相色谱串联质谱技术测定了连续5 d口服10 mg·kg^-1的恩诺沙星后,马口鱼体内各组织中恩诺沙星的含量变化趋势,并通过3p97药动学软件进行数据处理。研究表明,在(22±2)℃水温下,马口鱼连续5 d口服10 mg·kg^-1的恩诺沙星,血液、肝脏和肌肉中的达峰时间分别为4、8和12 h,吸收半衰期分别为2.230 1、4.587 0和6.551 0 h,消除半衰期分别为15.726、52.399和42.081 h,药时曲线下总面积分别为151.027、328.660和307.200 μg·mL^-1·h。恩诺沙星在马口鱼体内的建议休药期至少为330 ℃·d。为马口鱼养殖中的合理用药提供数据支撑。     

恩诺沙星新盐的制备、表征及溶解性研究

【目的】制备恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)新盐并考察其溶解性,旨在提高ENR的溶解度,丰富其晶体形式。【方法】采用混悬法制备ENR新盐,并通过溶剂挥发法培养其单晶。利用粉末X射线衍射(PXRD)、单晶X射线衍射(SXRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)、差示扫描量热分析(DSC)、热失重分析(TGA)和扫描电子显微镜(SEM)对新盐进行一系列表征分析。通过粉末溶解速率试验考察ENR和新盐在37 ℃、pH 6.8磷酸盐缓冲液中的溶解速率。【结果】制备的ENR新盐为ENR-2,6-二羟基苯甲酸半水合物(ENR-2,6-DHBA·1/2H₂O)。经单晶结构分析可知,ENR-2,6-DHBA·1/2H₂O属于三斜晶系,P-1空间群,晶胞参数为:a=13.2495(7)Å;b=13.8266(11)Å;c=16.0672(8)Å;α=114.301°(6);β=90.322°(4);γ=114.438°(7)。不对称单元中包含2个ENR阳离子、2个2,6-DHBA阴离子和1个水分子。2,6-DHBA羧酸基团的质子转移到ENR哌嗪环的N原子上,形成N⁺-H…O^-,证实形成的是盐,ENR与H₂O通过O-H…O氢键连接。FTIR结果证实,2,6-DHBA上的C=O吸收峰由于质子的转移由1 680 cm^-1移动到1 725 cm^-1。新盐的熔点不同于ENR和2,6-DHBA,为253 ℃。新盐的外貌形态为光滑的棒状。粉末溶解速率曲线显示,ENR-2,6-DHBA·1/2H₂O平衡时的表观溶解度为0.65 mg/mL,是ENR的1.86倍。【结论】试验成功制备了ENR-2,6二羟基苯甲酸半水合物盐,该盐提高了ENR的溶解度,为提高ENR的生物利用度、增强抗菌效应提供了参考依据。     

恩诺沙星纳米乳的制备及抑菌活性研究

为了制备恩诺沙星纳米乳并确定其抑菌效果，试验采用低能乳化法中的相转变法制备恩诺沙星纳米乳，对制备的恩诺沙星纳米乳进行了乳液类型的判定、形态观察、粒径分布测定，研究存放时间、存放温度对制备的恩诺沙星纳米乳外观状态及粒径的影响，以及测定恩诺沙星纳米乳的抑菌活性。结果表明：以肉豆蔻酸异丙酯(IPM)为油相、聚氧乙烯蓖麻油-40 (EL-40)为表面活性剂、乙酸为助表面活性剂，纯化水为水相制备的水包油(O/W)型恩诺沙星纳米乳外观澄清、透明，电镜下观察恩诺沙星纳米乳粒子呈圆球形，分布均匀，不粘连；粒径范围为10～100 nm,粒径大小在纳米乳标准范围内，乳液多分散系数(PDI)为0.192;8 000 r/min离心15 min不分层，乳液性质稳定；10%恩诺沙星纳米乳对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为3.72,2.71,3.82 cm, 10%恩诺沙星可溶性粉为2.73,1.30,2.84 cm, 10%恩诺沙星溶液为3.55,2.56,3.64 cm; 10%恩诺沙星纳米乳对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌抑菌效果较好，最小抑菌浓度(MIC)均为0.062 5μg/mL,对大肠...     

模拟养殖系统药饵给药后恩诺沙星在异育银鲫体内、水体和底泥中代谢与分布

为探究水产养殖中恩诺沙星用药后在水环境中的归趋，本实验在模拟池塘水产养殖系统中，恩诺沙星以18 mg/kg剂量药饵投喂异育银鲫，每天2次、给药周期6 d，研究恩诺沙星在异育银鲫体内吸收、分布、代谢和消除规律，以及在水体和底泥中的分布规律。结果显示，异育银鲫组织中恩诺沙星峰浓度(C_max)依次为肠道>肾脏>肌肉>鳃>肝脏>血浆，分别为14.15、13.31、14.15、7.48、7.94 mg/kg和2.94 mg/L；各组织中均可检测到代谢产物环丙沙星，其峰浓度与恩诺沙星峰浓度的百分比分别为5.10%、1.70%、6.28%、2.97%、2.90%和6.53%；组织中恩诺沙星清除率(CL_z)顺序为血浆>肝脏>肠道>鳃>肌肉>肾脏。随着给药次数增多，水体中恩诺沙星残留浓度快速升高，在最后一次给药后6 h时达到峰值(5.23μg/L)，随后开始下降，但水体中一直未检测到代谢产物环丙沙星；底泥中恩诺沙星首先呈现上升趋势，在240 h达到峰值(796μg/kg)，之后略有下降，480 h时降...     

恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡体内残留消除规律研究

为研究恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡体内的残留消除规律，以确定休药期，试验采用推荐剂量（75 mg/L）和2倍推荐剂量（150 mg/L）恩诺沙星自由饮水方式连续对北京油鸡给药5 d，在最后一次给药后0（停药后4 h）、1、3、5、7、9、12和15 d，采集北京油鸡肝脏、肾脏、肌肉和脂肪，采用高效液相色谱串联质谱法测定各组织中的恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留量，并用WT1.4软件计算休药期。结果显示，推荐剂量5%恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡各组织的休药期分别为肝脏7.1 d、肌肉3.8 d、肾脏5.2 d、脂肪4.4 d,2倍推荐剂量的休药期分别为肝脏9.6 d、肌肉4.2 d、肾脏6.4 d和脂肪8.4 d。结果表明，恩诺沙星在北京油鸡的休药期可设置为8 d。     

温度、流速对恩诺沙星在虹鳟体内吸收、分布的影响

环境因素会对药物在动物机体内的代谢产生不同的影响,为研究温度和水流速度对药物在虹鳟体内药物代谢的影响,以虹鳟为实验对象,设置3个温度(5、10、15°C)和流速(8、16、24 cm/s),水温由自动循环水族缸的控温系统调控,流速由鱼类生态测量仪调控,高效液相色谱法(HPLC)检测组织中恩诺沙星含量。结果发现,在5、10、15°C时,血浆T_(max)分别是8.67、4.78、2.39 h;T_(1/2α)分别是0.86、0.80、0.77 h;T_(1/2β)分别是49.18、45.81、38.35 h;AUC分别是140.49、130.40、112.78μg/(L·h)。实验温度下,表现为温度升高会加快药物的吸收和分布,即吸收分布速率增大,达峰时间缩短。在8、16、24 m/s 3个实验流速下,血浆T_(max)分别是8.57、6.03、4.04 h;T_(1/2α)分别是5.47、2.16、0.27 h;T_(1/2β)分别是26.54、6.93、2.13 h;T_(1/2ka)分别是7.68、5.00、2.01 h。实验流速下,表现为流速增大会加快药物的吸收和分布,即吸收分布速率增大,达峰时间缩短。研究表明,在一定范围内温度的升高及水流速度的增加会加速恩诺沙星在虹鳟体内的吸收与分布。     

HPLC-PDA联合UPLC-Triple TOF MS法确证恩诺沙星注射液中的非法添加物

对恩诺沙星注射液中非法添加加替沙星的确证。通过HPLC-PDA法初筛发现1批恩诺沙星注射液中含有非法添加物,利用高分辨质谱对未知物进行筛查,推测出非法添加物为加替沙星,并用进行确证。结果显示,该批样品中的非法添加物为加替沙星。本研究为兽药中非法添加物筛查及定性确证提供了一个有效的思路与方法。