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洋桔梗ISSR最佳反应体系的建立与品种遗传多样性检测 总被引:1,自引:1,他引:0
利用正交设计,对影响洋桔梗ISSR反应的主要因素进行了优化,建立了洋桔梗ISSR的最佳反应体系。在25μL的PCR反应体系中,含2.5μL 10×PCR buffer、1.5 mmol/L Mg2+、0.3 mmol/L dNTPs、0.2μmol/L引物、30 ng/μL洋桔梗基因组DNA模板及2.0 U的TaqDNA聚合酶。试验结果表明,该反应体系具有良好的稳定性和通用性。8个不同基因型洋桔梗材料遗传多样性检测结果表明,该ISSR分子标记可有效地检测出其中4个不同品种之间、同一品种F1代及F2代之间的遗传多样性,但未能检测出同1个品种F1代2个株系之间或2个转基因株系之间的遗传多样性。 相似文献
663.
牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
通过IPTG诱导的大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用GlutathioneSepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定。获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000。 相似文献
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家蚕胚胎发育相关基因的分析(英文) 总被引:1,自引:1,他引:0
在家蚕基因组中检索分析了与果蝇86个胚胎发育相关基因同源的基因。分析结果表明,在果蝇的这86个基因中,有62(72%)个基因在家蚕基因组中存在直向同源关系,其中58(67%)个基因并且在家蚕、果蝇、冈比亚按蚊3种昆虫的基因组间呈现1∶1∶1直向同源关系。通过比较分析发现,体节极性决定基因在3种昆虫基因组间最为保守。同果蝇和冈比亚按蚊相比,家蚕中决定背-腹部形成的基因分化最大。进一步利用芯片数据对其中的12个母性基因在家蚕5龄第3天幼虫生殖腺中的表达情况进行分析:有2个基因(orb和nanos)在卵巢中特异表达;4个基因(spire、Ras85D、gd和arrest)在精巢中特异表达;另外的6个基因(exuperantia、vasa、pumilio、mago nashi、nudel和dorsal)在精巢和卵巢中均有表达,但是其中的2个基因(pumilio和nudel)在雌、雄间的表达量存在显著差异。研究结果为家蚕发育调控机制的进一步研究提供了重要线索和数据信息。 相似文献
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温室养殖在暗纹东方鱼屯的养殖中占重要地位,但是却浪费水资源,而且带来了养殖生态环境恶化,以致影响暗纹东方鱼屯的健康养殖.实验表明,在养殖过程中使用水处理系统对养殖水进行处理,养殖水的水质可极大地得到改善,暗纹东方鱼屯生长速度加快,病害发生率低,而且各项卫生质量指标均低于国家标准,达到无公害食品的要求.文中还对水处理在我国的应用前景进行了讨论. 相似文献
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将编码牛白细胞介素-2(BoIL2)成熟肽的cDNA克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZB中,构建出含BoIL2基因的重组质粒BoIL2-pPICZB。将经Sac Ⅰ酶切后线性化的BoIL2-pPICZB电转化到巴斯德毕赤酵母X-33中,转化子经高浓度Zeoein抗性筛选鉴定后,用1%甲醇诱导目的蛋白表达。经SDS-PAGE及Western blotting检测,表明BoIL2在酵母中获得了胞内表达;通过金属螯合亲和层析(MCAC)获得纯化的重组蛋白;培养小鼠CTLL2细胞进行活性检测,证实所表达的重组BoIL2具有生物活性。 相似文献
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秸秆还田方式对根际固氮菌群落及花生产量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1