紫花苜蓿MsWRKY42的分离、鉴定及其对非生物胁迫的响应

【目的】WRKY是转录因子大家族,在植物生长发育及逆境胁迫应答中发挥着核心调控作用。通过分析转录因子MsWRKY42在紫花苜蓿抗逆境过程中的作用,为进一步研究WRKY转录因子在紫花苜蓿抗逆分子调控中的作用奠定基础。【方法】通过同源比对方法从紫花苜蓿转录组基础数据库中获得MsWRKY42序列。使用MEGA-X对MsWRKY42蛋白序列及拟南芥序列进行多序列比对,构建系统发育树。通过PlantCARE预测分析MsWRKY42启动子的顺式作用元件。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析MsWRKY42在紫花苜蓿不同组织中的表达量及其在NaCl（0.3 mol·L^-1）、PEG（15%）、4℃、40℃、低磷以及ABA（0.1×10^-3mol·L^-1）处理后的表达量变化。构建pCAMBIA1300-WRKY-GFP融合表达载体,通过农杆菌转化本氏烟草（Nicotiana benthamiana）,确定MsWRKY42蛋白的亚细胞定位。利用酵母单杂交系统检测MsWRKY42和启动子区域顺式作用元件W-box的体外结合活性。【结果】该基因包含1个1 692 bp的开放阅读框,编码563个氨基酸。多序列比对及系统进化树分析表明,该蛋白属于Ⅱb类WRKY家族成员,含有1个WRKY保守结构域和1个C₂H₂锌指基序,与拟南芥WRKY家族中的AtWRKY42相似度最高,故将其命名为MsWRKY42。在紫花苜蓿MsWRKY42启动子区域鉴定到多个顺式作用元件,主要包括胁迫响应、激素响应、生长发育等不同生命活动相关的调控作用元件。实时荧光定量PCR结果表明,MsWRKY42在紫花苜蓿各组织中均有不同程度的表达,其中根、叶中的表达量最高,茎、花、荚果中次之,芽中最低。经NaCl、PEG、低温、高温、低磷和ABA处理后的MsWRKY42表达量均有不同程度的上调。亚细胞定位结果显示,MsWRKY42蛋白定位在细胞核上。酵母单杂交系统检测结果显示,MsWRKY42能够与W-box顺式作用元件特异性结合。【结论】MsWRKY42为典型的WRKY转录因子,蛋白质定位在细胞核,能够与W-box顺式作用元件特异性结合;该基因在紫花苜蓿不同组织部位中均有表达,在根和叶中的表达量最高,且表达受NaCl、PEG、低温、高温胁迫和ABA激素的正向诱导。在紫花苜蓿中,该基因可能参与多种非生物胁迫反应。     

广西生猪屠宰行业的发展思路

目前广西全区注册屠宰企业有903家(其中生猪901家、禽类2家,县城规模以上168家、乡镇小型场点735家),这901家生猪屠宰场存在很多问题。本文针对广西屠宰行业存在的问题,提出解决办法,从而保证屠宰工作的有序进行。     

兽医实验室信息管理系统运用体会

实验室信息管理系统(Laboratory Information Manage ment System,LIMS)是由计算机硬件和软件组成、以实验室为基础、实现现代实验室综合管理的一种技术和方法。它能完成实验室数据和信息的采集、收集、分析和报告,可以涵盖人员管理、样品管理、事务管理、资源管理、数据管理、报表管理等诸多模块[1],是分析检测技术、仪器设备管理技术、网络通信技术和实验室管理技术等的集成[2]。目前,LIMS已经运用在检验、检疫、医疗、化工、制药等行业的分析测试实验室[3]。广西壮族自治区动物疫病预防控制中心兽医实验室于2014年正式启动LIMS的建设,2015年11月23日正式运用LIMS进行实验室的管理,笔者现将谈谈3年来LIMS建设和使用的心得。     

鲁中肉羊BMP4基因g.63454744 T>G位点多态性与产羔数的关联分析

为了探索骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)基因g.63454744T>G位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,对前期重测序中筛选得到的BMP4基因编码区错义突变单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphism site, SNP)g.63454744T>G在384只鲁中肉羊中利用Sequenom MassARRAY~? SNP技术进行分型,再将分型结果与鲁中肉羊产羔数进行关联分析。结果表明:BMP4基因g.63454744T>G位点在鲁中肉羊中存在TT、GT和GG三种基因型;该位点在鲁中肉羊中表现为中度多态(0.250.05)。说明BMP4基因g.63454744T>G位点不适合用于鲁中肉羊产羔数选育。     

供水工程管理信息系统开发

为了更好地对城镇供水系统进行监督管理,为各级领导对水资源进行科学管理与决策快速提供准确可靠的科学依据,开发了某省县城供水工程信息管理系统。本系统在覆盖某省多个市(县)的广域计算机网络环境下运行,具有:供水工程信息收集、处理、存储、管理功能;基于地理信息系统的供水信息查询功能;供水工程信息分析统计、年报、月报等各种统计报表输出功能;系统数据库维护功能。     

无公害蔬菜种植技术

近年来，随着农药、化肥、激素等在农作物上的大量使用，特别是各地食用带毒蔬菜引起人畜中毒事故的发生，使得人们对农产品的食用安全性越来越感到担忧。人们呼唤“无害化”农产品，尤其垂青与人们生活密切相关的“无公害”蔬菜。应该说，无公害蔬菜市场大有发展潜力。     

关于现代环境对给排水系统影响的研究

从古至今,建设给排水系统都要客观对周围环境因素进行充分研究和分析,而现在的给排水系统随着现代环境的快速变化受到的影响也随之增大,而想要改善现代环境对给排水系统带来的影响,就必须准确分析现代环境给排水系统带来哪些影响,并针对这些影响给出相应解决方案。     

猪萎缩性鼻炎病原的分离鉴定及其毒素检测

猪萎缩性鼻炎在我区猪场时有发生,给养猪业造成较大的危害,为了解我区猪萎鼻的流行情况,从我区的5个规模化猪场采集了266份断奶仔猪的鼻拭子,用常规的细菌分离方法与生化鉴定得到80株多杀性巴性氏杆菌.药敏试验结果表明这些菌株对大多数抗生素中度敏感.用豚鼠皮肤坏死试检、小鼠致死试验及PCR检测确定80株中有9株为产毒素多杀性巴氏杆菌,亦即为猪萎缩性鼻炎的病原菌.     

用紫外和荧光检测器同时分析水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的高效液相色谱法

建立了用紫外和荧光检测器同时分析水产品中有色孔雀石绿和无色孔雀石绿的高效液相色谱法。有色孔雀石绿检测采用紫外检测器,波长588 nm;无色孔雀石绿采用荧光检测器,其激发波长265 nm,发射波长360 nm,流动相0.1 mol/L(pH4.5)的乙酸铵溶液∶乙腈(20∶80),流速1.5 ml/min。采用ZOBAX C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱。加标量为10μg/kg和250μg/kg(有色孔雀石绿),回收率分别为60.2%和56.6%,相对标准偏差分别为10.1%和5.6%;加标量为2μg/kg和50μg/kg(无色孔雀石绿)时,回收率分别为95.2%和92.3%,相对标准偏差分别为10.8%和11.3%。该方法的最低检测限1.1μg/kg(孔雀石绿和无色孔雀石绿总量),可满足欧盟对水产品中孔雀石绿的检测要求。检测方法稳定,简便,灵敏度高,无需柱后氧化柱,适合同时进行水产品中有色孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的检测。