高糖培养对乳鼠海马神经元存活及c-fos蛋白表达影响

目的探讨高糖培养对乳鼠海马神经元存活及c-fos蛋白表达影响。方法无血清体外培养方法获得新生SD乳鼠海马神经元,分为正常组和高糖6、12、18、24h共5组。分别用PI/Hoechest33342染色法、免疫荧光细胞化学法检测检测海马神经元存活率及c-fos蛋白表达。结果高糖24h组海马神经元存活率明显低于正常组及高糖6、12、18h组(P<0.01)。高糖处理后,c-fos蛋白表达在6h开始出现,12h达高峰,此后逐渐下降(P<0.01)。结论高糖培养导致的乳鼠海马神经元存活率下降与c-fos蛋白表达有关。     

猪与小鼠海马成体神经发生以及海马结构特征的对比分析

以小鼠为参照对象,探索猪海马的成体神经发生、形态结构以及细胞构筑的特点。本试验以成年猪和小鼠的海马为研究对象,以双皮质素作为研究成体神经发生的特异标记物,结合其他几种标记物进行免疫组织化学和免疫荧光染色。经对比分析发现,双皮质素可以作为一种研究成体神经发生的特异标志物;成年猪与小鼠海马中持续地进行着神经发生,但两者具有不同特点,其中成年猪海马新生神经元的平均胞体面积比小鼠小,但其平均相对树突长度比小鼠的长,以及单位齿状回长度新生神经元的数量也比小鼠多;另外,猪与小鼠海马的细胞组成、分层和基本结构大致相同,但猪海马齿状回呈现不规则的C形。猪海马构成与小鼠的大致相同,但其成体神经发生要更加活跃。     

BDNF在急性应激所致小鼠空间学习记忆功能改变中的作用

目的研究急性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内BDNF表达的影响。方法采用足底电击急性应激动物模型,通过Morris水迷宫实验检测试小鼠空间学习记忆能力;以免疫组织化学方法检测脑源性神经营养因子(BDNF)在海马和前脑皮层的表达。结果与正常对照组小鼠比较,急性应激组小鼠在水迷宫实验中的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),而在目标象限的停留时间显著延长(P<0.05);急性应激组小鼠海马CA1、CA3区,齿状回和前脑皮层BDNF的表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论急性应激导致小鼠空间学习记忆功能增强,这可能与海马和前脑皮层BDNF表达的上调有关。     

生命早期铅暴露对小鼠海马内IGF1表达的影响

雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(0.1%、0.5%、1%浓度溶解在去离子水中,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d断乳为止。在出生后的第21天,分别采用石墨炉原子吸收光谱法测定血铅和海马组织中铅的水平,免疫组织化学和免疫印迹法检测海马组织中胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)的表达。结果显示:与对照组相比,铅暴露组血铅水平和海马组织中铅的水平显著增高(P0.05);铅暴露组IGF1的表达比对照组明显下降(P0.05)。结果表明:母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,使仔鼠海马组织中IGF1蛋白的表达下调,从而造成海马神经元损伤,引起神经毒性。     

海洋药物——海马酶解液活性的研究

采用中性蛋白酶对海马粉进行酶解获得酶解液,并对酶解液的抗氧化活性、抑菌活性和抗疲劳活性进行了测定。实验结果表明,海马酶解液对DPPH的清除率为:雄海马45.2%,雌海马36%;清除羟自由基率为:雄海马81.7%,雌海马80.0%;超氧阴离子清除率为:雄海马46.0%,雌海马34.4%。海马酶解液同时具有抑菌活性,通过滤纸片法可以看出海马酶解液对大肠杆菌、产气杆菌和变形杆菌的抑制性比较强,而对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的抑制性较弱。海马酶解液还具有抗疲劳活性,通过小鼠负重游泳实验检测海马中性蛋白酶酶解液的抗疲劳活性,实验组游泳时间平均为143min,而对照组的游泳时间为91min,相比之下实验组比对照组高出52min。进一步的研究结果还表明,海马酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。     

电针“委中”对多裂肌损伤模型大鼠钙调蛋白信号通路的影响

目的 探讨多裂肌损伤后,电针"委中"干预对多裂肌损伤过程中钙调蛋白信号通路的影响。方法 SD大鼠随机分为空白组、模型1 d组、模型3 d组、电针1 d组、电针3 d组,每组8只。电针组双侧"委中"电针,于治疗的第1、3天各组同步取材,采用酶联免疫吸附法检测多裂肌、脊髓、海马组织中CaM、CaMKⅡ、iNOS的含量。结果 模型1 d和3 d组,多裂肌、脊髓、海马CaM、CaMKⅡ含量显著高于空白组（P<0.01）;多裂肌、脊髓、海马iNOS含量高于空白组（P<0.05或P<0.01）。电针1 d后,多裂肌、脊髓、海马CaM、CaMKⅡ、iNOS含量显著低于模型1 d组（P<0.05或P<0.01）。电针3 d后,多裂肌、脊髓、海马CaM、CaMKⅡ、iNOS含量低于模型3 d组（P<0.05或P<0.01）。电针3 d后,脊髓、海马CaM、CaMKⅡ及多裂肌CaMKⅡ含量显著低于电针1 d组（P<0.01）,多裂肌CaM、iNOS和脊髓、海马iNOS含量与电针1 d组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 多裂肌损伤早期,电针"委中"干预可通过抑制CaM、CaMKⅡ的过度激活,减少组织中iNOS的过多产生,减轻组织炎症损伤。     

SAMP8小鼠衰老海马complexin含量呈环路特异性下降

利用免疫组化技术检测年龄对SAMP8小鼠海马突触前蛋白complexin1/2表达的影响。结果显示,与4.5月龄相比,13月龄组齿状回多形细胞层和外分子层及CA1区放射层的complexin1/2相对含量均显著下降,8月龄组后两者也下降。此外13月龄组CA3透明层complexin1/2低于表达较8月龄组。这些结果提示在SAMP8鼠海马complexin1/2含量随年龄增加而呈现环路特异性下降。     

纳米银对原代培养海马神经细胞凋亡的研究

[目的]探讨纳米银对原代培养海马神经细胞的影响。[方法]用吖啶橙染色观察细胞形态及染色质的变化,用Fluo3荧光染料检测细胞内游离Ca2+浓度变化,并利用ELLSA试剂盒检测Caspase-3凋亡酶活性。[结果]与正常对照组相比,经50μg/ml纳米银处理36h后,海马神经细胞的凋亡率达到最高((48.3±0.33)%),凋亡酶活性增强,并且细胞内游离的Ca2+荧光强度达到41.70±18.78。结论50μg/ml纳米银作用36 h可导致海马神经元凋亡。     

针刺大椎、百会、人中穴对大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点海马脑红蛋白表达的影响

目的 观察针刺大椎、百会、人中穴对大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点海马脑红蛋白（neuroglobin,Ngb）表达的影响,探讨其脑保护作用的部分作用机制。方法 采用线栓法制备MCAO模型,将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、对照点组、穴位组4大组,每组再根据再灌注后时间分为24 h、72 h组,每组5只。完成治疗后,先行神经功能缺损评分再处死大鼠,再采用Western Blot法检测大鼠缺血侧海马Ngb的表达水平。结果 神经功能缺损评分：与假手术组比较,模型组、对照点组及穴位组神经功能缺损评分均升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;模型组、对照点组、穴位组三组神经功能缺损评分差异无统计学意义（P>0.05）。与24 h组比较,72 h模型组神经功能缺损评分差异无统计学意义（P>0.05）;72 h对照点组及穴位组神经功能缺损评分均下降,差异有统计学意义（P<0.05）。Ngb：与假手术组比较,模型组Ngb的表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,对照点组及穴位组Ngb的表达水平均明显升高（P<0.01）;与对照点组比较,穴位组Ngb的表达水平有升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。与24 h组比较,72 h假手术组、模型组及对照点组Ngb的表达水平均有下降,但差异无统计学意义（P>0.05）;72 h穴位组Ngb的表达水平下降明显,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 针刺能降低脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分,并可上调海马Ngb的表达水平,从而实现脑保护作用。     

海马等8种海洋中药体外抗氧化活性的比较

[目的]比较研究海马等8种海洋中药体外抗氧化活性.[方法]测定高锰酸钾还原所需的氧化时间;采用光照核黄素产生超氧阴离子,并测定清除率;采用普鲁士蓝法测定总还原力.[结果]氧化时间从短到长顺序:海马＜海龙＜海藻＜龟甲胶＜海螵蛸＜龟甲＜牡蛎＜瓦楞子,其中海马氧化时间21.2 s,与Vc相比无显著差异(P＞0.05).超氧阴离子清除率大小顺序:海螵蛸＞龟甲胶＞海龙＞海马＞海藻＞龟甲＞牡蛎＞瓦楞子,其中海螵蛸清除率42.21％,与Vc相比无显著差异(P＞0.05).总还原力强弱顺序:龟甲胶＞海龙＞海马＞海藻＞牡蛎＞海螵蛸＞龟甲＞瓦楞子.[结论]海马、海龙、海螵蛸、海藻、龟甲和龟甲胶的抗氧化活性较高,但效果均不及Vc,瓦楞子、牡蛎抗氧化活性较低,龟甲胶抗氧化活性高于龟甲.