水稻Os4CL5的Val337缺失突变激活其芥子酸催化活性

4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate:coenzyme A ligase,4CL)催化各种羟基肉桂酸生成相应的硫酯,从而调控木质素和黄酮类物质的生成.4CL的芥子酸催化活性一直是备受关注的一个问题,目前只有拟南芥(Arabidopsis thaliana)的At4CL4和大豆(Glycine max)的Gm4CL1具有芥子酸转化能力.本研究用水稻(Oryza sativa subsp.japonica)苗期的叶片为材料,提取总RNA并以此为模板,用反转录PCR扩增水稻的Os4CL5基因,并将其连接到原核表达载体pET22-b(+)上,构建了原核表达载体pET-4CL5(+Val).通过定点突变的方法删除了水稻Os4CL5的Val337,构建了原核表达载体pET-4CL5(-Val).重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(ED3)并经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测表明,融合蛋白的分子量为57.0 kD,与预测值一致.His-SpinTrap蛋白纯化系统纯化回收重组蛋白,然后对重组蛋白的酶学性质进行表征.结果表明,野生型Os4CL5对不同底物表现出了不同的催化效率,香豆酸是最适底物,其次是阿魏酸,再次是咖啡酸,对芥子酸没有活性.与野生型Os4CL5相比,突变型Os4CL5对香豆酸、咖啡酸和阿魏酸的催化效率有所提高,并且其底物特异性发生了明显改变,获得了对芥子酸的催化活性.本研究为利用基因工程手段调控木质素的生物合成提供了理论依据.     

中西医结合诊治绵羊链球菌病的报告

贵德县河西镇江仓麻村某养殖户饲养的386头羊，于2012年4月13日，突然发生了以咽喉肿胀、呼吸异常困难等为特征的一种急性、热性、败血性传染病，并造成部分病羊死亡。据统计先后有259头发病，发病率在67％以上；发病期间共死亡182头，占发病羊的70％左右，给羊群造成较大的危害。我们通过疫病调查、临床检验、实验室诊断等手段，确诊为山羊链球菌感染，并立即采取中西结合的防治措施，取得了较满意效果。现将诊治情况报道如下。     

一例绵羊肝片吸虫病的诊治

肝片吸虫病是肝片吸虫、大片吸虫寄生于牛、羊等反刍动物的肝脏、胆管内，引起慢性或急性肝炎、胆管炎，同时伴发全身中毒现象及营养障碍等病症的寄生虫病，危害相当严重，尤其可引起幼畜和绵羊的大批死亡。流行于河流、山川小溪和低洼、潮湿沼泽地带，特别是在多雨季节。我省环湖地区以6～9月感染最严重，常呈地方性流行，在低洼和沼泽地带放牧的羊群发病较严重。     

犬子宫蓄脓病原菌分离鉴定及药敏试验

子宫蓄脓是子宫内蓄积大量脓液而引起的一种犬常见生殖系统疾病,根据子宫颈开放与否分为开放型和闭锁型。本试验对病犬子宫脓液进行细菌分离鉴定和药敏试验,分离到霍米奇肠杆菌(Enterobacter hormaechchei),该病原菌对庆大霉素和丁胺卡那霉素等敏感。试验结果为犬子宫蓄脓的临床治疗提供参考。     

青海湖流域沙地植物群落多样性研究

土地沙漠化是青海湖流域重要的生态问题之一,明晰区域内不同沙化阶段植物群落的演化特征,有助于为该区沙漠化防治工作有效开展提供科学依据。本研究通过野外样方调查并应用方差分析、主成分分析和相关性分析,厘清该区潜在、轻度、中度、重度和极重度沙化阶段植物组成特征与变化规律。结果表明,随沙化程度加剧,植物优势种从矮生嵩草、草地早熟禾和垂穗披碱草演替为青海固沙草、驼绒藜和沙蒿,生活型从中生向旱生演替;植物盖度、高度、地上生物量和多度依次降低;物种丰富度、Shannon-Wiener指数、Simpson指数与Pielou指数均为先升后降,轻度沙化阶段最高,符合“中度干扰假说”。沙化过程对多样性指数影响为Shannon-Wiener指数>物种丰富度>Simpson指数>Pielou指数,除Pielou指数外,其余多样性指数与植被特征相关性显著。研究结果可为青海湖流域沙化防治及群落多样性研究提供参考。     

唐山地区蜱传斑点热群立克次体分子流行病学

根据已发表的长角血蜱16SrRNA序列及斑点热群立克次体外膜蛋白A（OmpA）基因序列设计2对特异性引物,对唐山地区采集的长角血蜱进行PCR检测,并对阳性样本进行测序和序列分析,抽检样本建立分子系统进化树。结果表明,在315份蜱DNA样本中检测出25份阳性样本,阳性率为7.94%;序列分析结果显示唐山地区长角血蜱携带立克次体同处于一个分支,与日本株立克次体同源性最高（93.30%）,其次是福建株立克次体（92.11%）,黑龙江立克次体绥芬株（90.45%）、虎林株（90.42%）。结论得出唐山地区蜱传斑点热感染较严重,分子进化分析结果显示唐山地区蜱传斑点热群立克次体可能为一新种。     

虫草真菌发酵中草药对母猪繁殖性能的影响

试验1随机选择正常发情母猪120头分为4组,试验2随机选择乏情母猪90头分为3组,研究虫草真菌发酵中草药对母猪繁殖性能的影响。结果表明,正常发情母猪饲粮中添加虫草真菌发酵中草药800、1 000和1 200克/吨,于断奶前后各喂7天,与对照组相比,断奶至发情间隔分别提前1.2、1.3和1.3天（P〈0.05）,乏情率分别降低71.41%（P〈0.05）、85.73%和85.73%（P〈0.01）,产仔数分别提高8.33%、10.71%和10.12%（P〈0.05）,产活仔数分别提高9.24%、9.64%和8.83%（P〈0.05）。乏情母猪注射孕马血清和饲粮中添加虫草真菌发酵中草药1 000克/吨,连续饲喂20天,与对照组相比,断奶至发情间隔分别提前10和8天（P〈0.05）,发情率分别提高999.40%（P〈0.05）和1 299.25%（P〈0.01）,产仔数分别提高9.39%和12.27%（P〈0.05）,产活仔数分别提高13.89%和16.05%（P〈0.05）。结果提示：虫草真菌发酵中草药（商品名＂赚二头＂）能够显著缩短母猪断奶至发情间隔,降低乏情率,提高产仔数和产活仔数。     

商品代蛋鸡免疫保健优化方案探讨

由于禽流感疫情在世界各地的不断发生,打破了许多常规的免疫程序和人们的惯性思维,甚至连传染性法氏囊病、鸡痘等常规免疫也频繁调动程序。2004年以来,禽病疫情又发生了一些新的变化,物价上涨引起饲料价格的不断上扬和一系列养鸡成本的增加,兽药市场的不规范导致用药的极大混乱。2007年至今,淋巴白血病等以往只见于报道的疫病不断发生,引起一定范围的慌乱,病毒性关节     

新生仔猪低血糖症的诊治与体会

2011年3月15日,楚州区朱桥镇一养猪户饲养的一头母猪产下14头仔猪,仔猪在出生后第二天开始发病,表现精神不振,不吃奶,四肢无力,肌肉颤抖,步态失调,随后卧地不起,四肢呈游泳状划动,尖叫,口吐白沫,最后昏迷死亡。畜主在用抗生素和磺胺类药物治疗无效后于第三天前来我处就诊,经临床观察和病理检查及实验室检验,诊断为新生仔猪低血糖症。现将该病例的诊治情况报告如下。