猫传染性腹膜炎病毒AH1905株N基因的生物信息学分析及原核表达

为了解猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus, FIPV)在中国的流行与遗传变异情况,对新分离的FIPV AH1905株的N基因进行了克隆和序列比对分析,并利用生物信息学软件对N基因编码蛋白的二级结构进行了预测。最后,将N基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,在原核细胞中进行表达,并制备鼠源多克隆抗体。测序结果表明,FIPV AH1905株的N基因全长1 134 bp,编码377个氨基酸。序列比对分析结果显示,FIPV AH1905株与报道的FIPV参考毒株的核苷酸同源性为90.2%~92.4%,氨基酸同源性为91.8%~93.9%,与国内其他分离株位于同一进化分支,同属于FIPV基因Ⅰ型。对N蛋白二级结构预测结果显示,该蛋白具有高度亲水性,其二级结构主要由α螺旋(h)(14.06%)、延伸链(e)(15.12%)、β转角(t)(3.71%)和无规则卷曲(c)(67.11%)组成,无信号肽区域和跨膜结构域,存在48个潜在的磷酸化位点,含有6个潜在的B细胞抗原表位、2个CTL表位和2个Th表位。Western blot检测结果证明,N蛋白在大肠埃希菌细胞中主要以包涵体形式大量表达,相对分子质量约为68 ku,具有良好的反应原性。以上结果可为进一步开展FIPV的流行病学和分子生物学研究奠定基础。     

鸭产蛋下降-死亡综合征的临床诊断与病原的初步鉴定

2010年3～11月间,安徽省部分规模养鸭场流行以产蛋下降和死亡为特征的急性、热性鸭传染病,主要感染成年种鸭或蛋鸭,病理变化则以心肌出血、卵巢肿大、出血和坏死为特征.通过鸡胚接种、传代培养和RT-PCR鉴定,从发病鸭体内分离1株黄病毒.对其NS1基因扩增并测序,发现其与坦布苏病毒亲缘关系非常近,核苷酸同源性达94.2％...     

鸭源呼肠孤病毒Sigma A蛋白的原核表达及免疫活性检测

为制备新型鸭源呼肠孤病毒(DRV) THIl株Sigma A蛋白的多克隆抗体,本研究采用RT-PCR方法扩增DRV TH11株Sigma A的编码基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行诱导表达.采用SDS-PAGE和western blot对表达产物进行鉴定.结果表明,Sigma A基因不仅可以在大肠杆菌中高水平表达,表达产物的分子量约66 ku,而且表达产物能够被特异性DRV多克隆抗体识别,证明表达的Sigma A蛋白具有良好的免疫活性.以纯化的Sigma A蛋白免疫实验兔制备抗Sigma A蛋白的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示其效价达1:20000以上.间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能够特异性识别DRV的Sigma A蛋白,表明Sigma A蛋白具有良好的免疫原性.本研究为进一步研究Sigma A蛋白的功能,以及建立DRV检测方法奠定了基础.     

新疆红枣收获机械现状及发展建议

新疆是国家重要的红枣生产基地.针对新疆现有红枣收获方式单一、机械化水平不高的现实问题,为提高新疆红枣业效益和竞争力,实现由传统林果业向现代林果业的转变,需因地制宜,大力发展红枣业收获机械化.为此,分析了新疆红枣业收获机械化的现状及新疆红枣业收获机械化的优势,并提出了今后的研究发展方向及应采取的主要措施.     

新型太阳能恒温沼气反应罐的设计

沼气反应罐内温度对发酵起重要的作用.为了消除气候对发酵的影响,建立有机废物高效气化的发酵环境,提高沼气的产量,介绍了一种新型太阳能加热恒温沼气反应罐的结构组成及参数选择;并通过组成原理分析具体的工作过程和工作特点,说明该罐能够保持恒定的发酵温度,消除气候对发酵的影响,创造良好的发酵环境,有效地提高产气率.此反应罐的设计方便实用,有利于促进农村沼气能源技术的推广,提高农村可再生能源的利用率.     

透明度在机械制图多媒体教学中的应用研究

本文针对目前机械制图多媒体教学存在的现有问题,阐述了透明度对制图教学研究影响。利用透明度制作课件素材,通过调整图片间颜色的层次,得到效果立体图;利用透明度调整背景色,使其与文字颜色出现较大反差,得到丰富多彩的文字效果,活跃了学生学习主动性,真正发挥多媒体的教学优势,提高教学效果。     

农用汽车火花塞不跳火故障分析与诊断

1蓄电池传统点火系的组成和工作原理(1)组成。蓄电池传统点火系的组成如图1所示,主要包括:电源(蓄电池、发电机)、点火开关、点火线圈、分电器(断电器、配电器、电容器)、火花塞、高压导线等。图1蓄电池传统点火系的组成1.蓄电池2.点火线圈3.点火开关4.附加电阻5.高压导线6.配电器7.火花塞8.电容器9.断电器凸轮10.断电器触点(2)工作原理。点火系统的工作可分为触点闭合,初级电流增长;触点断开,次级绕组产生高压;火花塞电极间火花放电三个阶段。其实质就是一个变压器原理,由点火线圈和断电器共同将12V或24V的低压电转变为10000V以上的高压…     

红枣热风干燥试验过程的热质衡算及经济效益分析

通过对红枣热风干燥过程中的物料衡算和热量衡算进行分析,分析了在不同风温(45、55、65℃)和不同风速(0.5、1.0、2.0m/s)条件下红枣干燥特性、干燥速率和耗能量情况等。结果得出:当干燥温度为55℃、风速为1.0m/s时,干燥室的传热传质过程增快,干燥效率升高,获得最佳的节能效果。最后,提出了红枣干燥过程中相应的节能技术措施。该研究为红枣干燥的优质节能高效提供了理论基础,对于推进红枣产业技术进步、增加果农的经济收入,具有十分重要的理论和实践意义。     

犬瘟热病毒H基因的序列分析

【目的】探索犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因的遗传变异情况,为CDV的防控提供理论依据。【方法】收集2014-2015年流行于上海和安徽两地的CDV野毒株,用RT-PCR方法克隆其血球凝集素蛋白基因(H),从分子水平上讨论CDV H基因的流行规律、遗传进化特性和变异情况。【结果】分离的5株CDV之间H基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%~99.9%和97.5%~99.2%,其与CDV疫苗株CDV3和Onderstepoort H基因核苷酸的同源性为90.9%~99.9%,氨基酸的同源性为90.4%~99.6%。进化树分析结果表明,分离到的5株CDV野毒株均属于亚洲Ⅰ型,与大部分的亚洲Ⅰ型处于同一分支。CDV H基因有9处潜在的天冬氨酸糖基化位点;H基因整体的同义突变概率与非同义突变概率的比例,即ds/dn=5.887 0。【结论】选择压力并未作用于分离到的CDV毒株,而是在中性选择作用下进化的。     

机采棉密植棉秆对行铲拔铺条机的设计与有限元分析

基于对行铲、拔协作原理,结合目前广泛推行的机采棉种植工艺,利用SolidWorks软件设计了一种机采棉密植棉秆对行铲拔铺条机,可实现整株棉秆对行铲、拨、铺条等多项作业,且具有分离泥土和整理棉秆的功能。运用ANSYS Workbench18.2对该机具机架进行了有限元模态分析,得到机架的前6阶固有频率范围为17. 221～60. 003 Hz,分析得机架外激频率不在固有频率范围内,即作业时不会出现共振现象。该研究可为机采棉密植棉秆对行铲拔铺条机的优化设计提供理论参考。