防治监控黄瓜绿斑驳花叶病毒,确保瓜类安全生产

目前在我国西瓜、甜瓜上发现一种由黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaicvirus，CGMMV）引起的新病害。农民视为“瘟疫”，在一些瓜产区造成重大损失。本文将概述该病毒的发生特点与防治方法。     

瓜类褪绿黄化病毒p22 基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

 以被瓜类褪绿黄化病毒（Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）侵染的甜瓜叶片为供试材 料,采用RT-PCR 方法克隆其P22 蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3 上,PCR 验证及克隆 测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22 转化大肠杆菌BL21 菌株,诱导表达,SDS-PAGE 分 析表明,经IPTG 诱导,p22 基因在大肠杆菌BL21 中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家 兔,制备了CCYV P22 的特异性抗血清。ACP-ELISA 检测结果表明,血清效价高达1.28 × 10⁵。Western blot 检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV 侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22 蛋白。     

8种杀菌剂对西瓜疫霉菌的毒力测定和田间药效试验

采用室内毒力测定和田间试验相结合的方法研究了8种药剂对西瓜疫病的毒力和药效。室内毒力测定结果表明,50%烯酰吗啉、68%精甲霜.锰锌、60%唑醚.代森联、72%霜脲.锰锌、64%噁霜.锰锌、70%丙森锌、40%三乙膦酸铝、722 g/L霜霉威盐酸盐的EC50值分别为0.34308、3.29265、21.16846、23.02197、31.62775、35.03833、37.89167、880.75659μg/mL,其中50%烯酰吗啉对西瓜疫霉菌的毒力最强。田间试验结果表明,72%霜脲.锰锌、50%烯酰吗啉和68%精甲霜.锰锌3种处理的防效较好。     

抗小西葫芦黄花叶病毒的西瓜自交系抗性遗传特征研究

小西葫芦黄花叶病毒(zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)严重危害西瓜等葫芦科作物.西瓜938-16-B是对ZYMV产生过敏性坏死反应(HR)的抗性自交系.为研究其对ZYMV的抗性遗传特征,以其为父本与感病亲本H1杂交,构建了包含310个单株的F2群体及BC1 群体,通过对亲本、F1、BC...     

MNSV p42与寄主因子3-HIBADH互作

 甜瓜坏死斑点病毒(melon necrotic spot virus,MNSV)是侵染甜瓜的重要病毒之一,为害严重。为了明确MNSV的致病机制,本研究以pGBK-p42为诱饵载体,利用Mating的方法从感染MNSV的甜瓜cDNA文库中筛选出6个与p42互作的寄主因子,进一步利用酵母双杂交系统、双分子荧光互补技术(Bimolecular fluorescence complementation,BiFC)等验证p42与寄主因子3-羟基异丁酸脱氢酶(3-Hydroxyisobutyrate dehydrogenase-like 1, 3-HIBADH)的互作,并明确了p42 蛋白的s-domain是与3-HIBADH互作的关键区域。此外,利用激光共聚焦显微镜观察发现p42 s-domain与3-HIBADH作用改变了3-HIBADH蛋白在烟草表皮的亚细胞定位,进一步证实p42可与3-HIBADH发生相互作用。该结果为阐明甜瓜响应MNSV侵染的互作机制奠定了基础。     

十大技术之七(二) 西瓜甜瓜病毒病综合防控

<正>1西瓜甜瓜病毒病种类、症状西瓜花叶蕨叶;甜瓜花叶;西瓜幼苗绿斑驳花叶;西瓜成株绿斑驳花叶;西瓜果实倒瓤;甜瓜黄化;甜瓜褪绿黄化;西瓜褪绿黄化;甜瓜叶片坏死斑点;甜瓜整株坏死斑点;甜瓜叶片黄化斑点;甜瓜整株黄化斑点;甜瓜皱缩卷叶。2防控措施2.1种子处理种子于70℃热处理144 h,能有效去除甜瓜种子携带的MNSV,且不影响种子萌发;用10%磷酸三钠处理种子3 h,或用0.1 mol·L-1HCl处理种子30 min。黄瓜绿斑驳花叶病毒的防控:做好种子健康繁育、病毒检测,种子干热处理72     

22种杀菌剂对甜瓜靶斑病菌的室内毒力测试

为筛选多主棒孢甜瓜分离物的高效杀菌剂,在室内采用菌丝生长速率法测定了22种杀菌剂对甜瓜多主棒孢SY和GX分离株菌丝生长的抑制能力。结果表明,50%咪鲜胺锰盐WP对多主棒孢甜瓜分离物SY和GX菌株的EC_(50)都最小,病菌对它的敏感性最高,抑菌效果最好;30%苯醚甲环唑SC、40%氟硅唑EC和80%福美双WG对多主棒孢甜瓜分离物GX分离株的EC_(50)均小于5μg·mL~(-1),抑菌效果较好,但在SY菌株上抑菌效果减弱。在试验浓度下,2个多主棒孢供试菌株对25%嘧菌酯SC、75%百菌清WP和90%多菌灵WG都非常不敏感,说明这3种杀菌剂对甜瓜靶斑病的防控不能起到有效作用。     

西瓜抗病毒RNAi植物表达载体的构建

为了研究转化同一种病毒的不同基因在转基因西瓜中引发RNA沉默的效果以及利用RNA沉默培育抗多种病毒的策略,以pFGC5941为骨架质粒,分别构建了ZYMV cp、nib和Hc-Pro基因的反向重复植物表达载体pFIRZYMVCP、pFIRZYMVNIb和pFIRZYMVHc-Pro;利用重叠延伸PCR的方法,首先构建了含有CMV cp、WMV cp和ZYMV cp部分基因片段的CWZ cp三价基因,采用该三价基因构建了CWZ cp基因的反向重复植物表达载体pFIRCWZ CP。研究首次在国际上构建了西瓜转基因抗病毒RNAi植物表达载体,为探讨RNA沉默在转基因抗病毒西瓜中的应用奠定了基础。     

西瓜病毒病的发生与防治

引起山东西瓜病毒病的毒原主要有西瓜花叶病毒２号、黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒等。西瓜品种、播期、栽培管理方式及田间有翅蚜量可影响病毒病的发生。试验中未发现免疫和高抗品种。品种相同而播期不同，发病率也不一样。适期早播则西瓜发病较轻，晚播则发病较重。与感病的其它葫芦科作物邻作，管理不良，植株矮小，田间杂草丛生，则病毒病发生重。前期加强管理，及时清除田间杂草，则病毒病发生轻。西瓜病毒病的发生与蚜虫发生关系密切。在日平均气温１９～２７℃时，发病高峰出现在有翅蚜虫迁飞高峰后１５天左右。通过种植屏障作物，结合治好防病，可有效控制病毒病的发生。