制备皱纹盘鲍染色体标本方法的比较研究

以皱纹盘鲍Haliolis discus Hannai的鳃、外套膜、上足触手为材料,采用植物血球凝集素（PHA）和秋水仙素体内注射法,通过滴片制备染色体标本,统计细胞分裂数。结果表明,鳃、外套膜、上足触手3种组织注射PHA后,细胞分裂指数比没有注射PHA的对照组均有显著提高,其中以PHA2次注射为最高。在3种组织中,鳃组织的细胞分裂指数最高,其次是外套膜、上足触手。用3种组织制备的染色体标本,均获得大量形态清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相。     

海洋贝类体液防御机制的研究进展

近几年，随着人们将海洋贝类作为食物的兴趣日益浓厚，科学家们对贝类及其防御机制的研究也越来越深入，对它们在生态、社会、经济、营养等方面的作用以及它们的致病微生物的特性进行了大量研究。双壳贝类由于其滤食习性，使它们体内蓄积了大量细菌，成为人类致病菌的积极携带者。因此，研究贝类与微生物之间的相互作用对维护人类健康有重要意义。     

虾壳的微生物转化和菌种的筛选

从水产品加工场长期堆放虾壳的土壤中,分离出一株能分解虾壳有较高活力的菌株。对该菌株(ST90-5)进行了形态、培养特征、生理生化特性等鉴定,此菌为放线菌(Streptomyces sp.)。这一菌株是用甲壳质为唯一碳源的筛选培养基中筛选出来,培养基成份为Na_2HPO_4、KH_2PO_4、NH_4NO_(?)、MgSO_4·7H_2O、FeSO_4·7H_2O、CaCl_2、甲壳质、微量金属盐。该菌株产酶最适条件为pH7、温度30℃、120r/min旋转摇床培养4—7天。经过发酵的培养液测定β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶的活性。     

团头鲂血清抗病毒半乳糖凝集素样蛋白的分离与鉴定

将草鱼出血病病毒(GCHV)的结构蛋白与Sepherose-4B偶联制备亲和柱，经亲和层析从团头鲂血清中分离到一种蛋白，能凝集兔红细胞，其血凝性依赖于β巯基乙醇的存在。红细胞凝集抑制实验证实该蛋白与D半乳糖有最高的亲和力，其次为甘露糖。梯度PAGE测得其分子量约为240000，SDS梯度PAGE证实该蛋白由分子量为15000的单个亚基组成，亚基之间没有共价连接。以上特性与半乳糖凝集素相符，故称其为团头鲂抗病毒半乳糖凝集素样蛋白。抗体阻断试验证实，此种凝集素样蛋白是团头鲂血清抗病毒及红细胞凝集活性的主要成分。N末段的氨基酸序列为Lys-Val-Asn-Leu-Asp-Glu-Lys-Cys-Pro-Phe，检索GenBank，未发现与这一段序列同源的蛋白质。     

刺参凝集素的分离纯化及其性质

为探寻刺参药用价值,探索其抑制肿瘤细胞增殖,促进淋巴细胞转化等生物功能。将刺参(Apotichopusjaponicus)经磷酸盐缓冲溶液抽提,20%~75%硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-200分子筛层析,得到刺参凝集素(AJL)。用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为85 652Da。AJL的含糖量为20.9%。该凝集素可以凝集人的A、B、AB、O型红细胞,且对A型红细胞凝集作用最强,在对兔、鼠、鲤鱼、鸡和人的A、B、AB、O红细胞的凝集作用中,对鸡的凝集作用最强。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-果糖、D-甘露糖、γ-球蛋白、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖所抑制,而被牛甲状腺球蛋白所抑制,其最小抑制浓度为1.55mg.mL-1。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被二价金属离子Ca2 、Mg2 及EDTA所抑制。该凝集素在pH4.0~10.14系列缓冲液中均有活性,其中在pH4.4~7.5范围内血凝活性最高。该凝集活性在90℃加热30min后仍然对红细胞有凝集活性,显示出较高的热稳定性。     

鲤、团头鲂精子生理生态特性的研究──Ⅲ．单糖和渗透压对精子活力的影响

作者观察了鲤、团头鲂精子在０（去离子水）－３００毫渗渗透压的Ｄ－半乳糖，Ｄ－葡萄糖和Ｄ－果糖溶液中的活动情况。结果表明，在这三种单糖溶液里，鲤、团头鲂精子活动的变化规律是一致的。精子快速运动和寿命的时间是以在Ｄ－半乳糖溶液中为最长。这两种鱼精子对这三种单糖的吸收、利用存在差别。     

尼罗罗非鱼鼠李糖凝集素 (RBL-1)在非特异性细胞防御病原菌感染中的功能

为了探究鼠李糖凝集素（Rhamnose-binding lectin, RBL）在硬骨鱼非特异性细胞防御病原菌感染中的作用,本研究以尼罗罗非鱼为研究模型,首先通过分离头肾单核/巨噬细胞进行体外菌应激实验,发现在罗非鱼两种重要的致病菌-无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）应激后,尼罗罗非鱼L-鼠李糖凝集素1（OnRBL-1）的表达量显著上调。然后,通过荧光定量PCR（qRT-PCR）检测发现OnRBL-1重组蛋白能够调节病原菌诱导细胞炎症因子的表达,包括显著抑制菌诱导的IL-6、IL-8和TNF-α的表达,和促进IL-10和TGF-β的表达。此外,通过流式细胞术检测证实OnRBL-1具有促进单核/巨噬细胞的吞噬作用,同时增强呼吸爆发水平和上调活性氧的释放。以上研究结果表明,OnRBL-1在罗非鱼单核/巨噬细胞非特异性细胞防御中发挥重要的调节作用。本研究为探讨RBL-1在硬骨鱼宿主防御病原菌感染中的功能提供了参考,并有助于完善和丰富硬骨鱼类RBL的功能和在抗菌免疫应答中的基础理论体系,具有重要的科学意义。     

凝集素的作用与应用

凝集素是一类具有糖专一性、可使细胞凝集的糖蛋白。它能与糖专一性、非共价可逆结合,广泛存在于植物、动物等生物细胞膜上、细胞质内和细胞外基质中。由于凝集素的存在比较广泛,且具有专一性的识别能力,具有促使细胞凝集、细胞有丝分裂、防御昆虫危害、消除入侵的微生物等外源     

三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测

以皱纹盘鲍的血细胞为材料，采用植物血球凝集素(PHA)体外浸泡法，运用正交实验设计，探讨PHA处理时间、PHA浓度、抽血时间对细胞分裂频度的影响。根据正交实验直观分析结果，得出用血细胞直接制备染色体标本进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测的最优组合：PHA处理时间18h、PHA浓度0．04％，抽血时间22：00-24：00，3因素的主次顺序：PHA处理时间→PHA浓度→抽血时间。并可获得大量图象清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相，是皱纹盘鲍活体倍性检测的最佳方法。同时，通过流式细胞仪测定皱纹盘鲍血细胞DNA相对含量进行三倍体皱纹盘鲍活体倍性检测，该方法制样简单，测试速度快。     

New Extracellular Bacillus subtilis Lectins with Sialic Acid-Specificity

The purpose of this work is to perform a detailed study of carbohydrate specificity of the new extracellular bacilli lectins which is considered to determine mechanisms of the lectins action. Sources of lectins were bacterial strains from Ukrainian collection of microorganisms. The optimized protocol of bacilli lectins isolation and purification included precipitation with ammonium sulfate with subsequent gel filtration chromatography on Sepharose CL-6B. Hemagglutinating activity of bacilli lectins and their fine carbohydrate specificity to sialic acids and their derivatives as well as sialic asid-containing and asialic glycoconjugates were studied. The ability of extracellular bacilli lectins to discriminate a- and 13-conformation of carbohydrate molecule and the type of connection between the monomers was determined. Studied lectins showed the most affinity to glycoconjugates containing both types of sialic acids （N-acetylneuraminic acid （Neu5Ac） and N-glycolylneuraminic acid （NeuGc）） and it is supposed to be a basis of their diagnostic and analytical potential.