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本文旨在建立实时荧光RT-PCR方法检测鸡病毒性关节炎病原,针对特异性的禽呼肠孤病毒S1基因设计了1对引物及探针,经优化反应体系,确定引物和探针的最优浓度配比,建立了鸡病毒性关节炎实时荧光RT-PCR检测方法。结果显示:该方法灵敏度高、特异性强、检测时间短,可应用于鸡病毒性关节炎的普查监测和检验检疫。 相似文献
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将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。 相似文献
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利用单克隆抗体技术制备抗口蹄疫病毒的单克隆抗体,特异性试验表明其只与O、A、Asia 1型3种血清型FMDV抗原结合。进而采用胶体金标记技术,以胶体金标记的抗口蹄疫病毒单克隆抗体、多克隆血清抗体和葡萄球菌A蛋白为主要材料,研制口蹄疫快速检测试纸条。该试纸条检测O、A、Asia 1型3种血清型灭活口蹄疫病毒均为阳性,检测水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、蓝舌病病毒、猪蓝耳病病毒4种灭活抗原及小反刍兽疫病毒疫苗株均为阴性,试验结果与口蹄疫实时荧光定量RT-PCR方法的完全一致,表明其具有良好的特异性。敏感性试验结果是,试纸条的检测极限为1∶160稀释的样品,其敏感性相当于实时荧光定量RT-PCR方法的1/64。由于试纸条具有操作方便、检测快速等优点,因此该试纸条可以用于大量临床样品的快速检测和现场检测。 相似文献
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分子生物学是一门实验的学科,其实验教学面临了极大挑战。就精选实用内容、设计教学过程、合理进行考核进行探索,为今后开设完善、合格的分子生物学实验课奠定基础。 相似文献
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我国民间有清明节和"七月半"节(农历七月十五,民间又称"鬼节")给已故亲人上坟烧纸的习俗.烧纸的时候,有时会突然刮起一股旋风,把树叶、纸灰等一起卷走,升空数十米甚至数百米才逐渐消失. 相似文献
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烤烟生长发育过程中叶片转化酶活性变化初探 总被引:10,自引:0,他引:10
研究表明,烤烟叶片中转化酶活性与叶片生长发育密切相关,叶片从发生到发育20d酶活性最强。其作用最适温度为45℃,最适pH值5.6。同一烟株由下向上不同叶位酶活性呈增大趋势,同一叶片不同叶脉间以主脉两侧第5-8条支脉间酶活性较强,且靠近主脉部位酶活性高于近叶缘部位。 相似文献
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