基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立

依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其中BarthaK61疫苗株基因组检测最小浓度为136pg/μL。建立了针对野毒株和两种疫苗株的鉴别诊断方法。     

禽呼肠病毒套式RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的禽呼肠病毒(ARV)基因组序列,设计合成了2对引物,外部引物的扩增片段大小为478 bp,内部引物的扩增片段大小为247 bp,建立了适合ARV快速检测的套式RT-PCR方法(RT-nested-PCR).采用该方法对REV毒株进行了检测,均能扩增到247 bp的条带,而禽流感病毒(H9亚型)...     

平台扫描仪结合ImageJ软件测定番茄叶面积

利用扫描仪获取标准图形,对ImageJ软件测定番茄叶面积的准确性进行了验证。发现不同的扫描分辨率（100、200和300DPI）对图形面积没有显著影响,200DPI的分辨率为较好的扫描参数。以番茄叶片为试材,对剪纸法与图像处理法进行比较,发现二者差异不显著。在此基础上,建立了一种扫描仪结合ImageJ软件测定番茄叶面积的方法。     

3株猪2型圆环病毒全基因变异分析及ORF2基因表达研究

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)全基因序列设计引物,从疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪组织病料中分别扩增出PCV2的全基因,将全基因克隆并测序。根据PCV2 ORF2序列设计引物,扩增HN01株ORF2基因序列,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。通过脂质体介导法转染细胞,观察表达产物的荧光情况。结果表明,成功从疑似PMWS病料中扩增出PCV2全基因序列,三者间同源性很高,与GenBank中登录的中国分离株核苷酸序列同源性较高,而与国外分离株的同源性较低。所构建的真核质粒pEGFP-N1-ORF2结构正确,能够在PK-15细胞中表达。     

双重PCR检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒和禽白血病病毒

为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV),根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列和ALV P27基因序列,设计合成2对特异性引物。在建立各病毒单项PCR检测技术的基础上,优化反应条件,建立2种病毒的双重PCR检测方法。结果:可同时扩增REV的467 bp和ALV的675 bp的特异性片段,而对其他5种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该双重PCR技术能检出10 pg的ALV和10 pg的REV模板。用双重PCR技术与REV的间接免疫荧光法及ALV ELISA对245份疫苗株检测,进行同步比较,结果总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,对这2种外源病毒的同时检测,显示出了较好的可行性。     

苏椒17号的选育及高产高效栽培技术

辣椒设施栽培是江苏省现代高效农业的重要组成部分。苏椒17号高产高效栽培,集成了穴盘育苗、膜下滴灌、植株调整、病虫害综合防治等技术,表现出早熟、大果、薄皮、高产高效、优质等特点,深受种植户和消费市场欢迎。     

地塞米松促进伪狂犬病毒SA738株诱导牛肾细胞凋亡

为研究地塞米松能否促进PRVSA738株诱导牛肾细胞的凋亡,本试验以牛肾细胞为模型,PRVSA738做为诱导剂,并添加地塞米松,病毒增殖后,采用荧光染色、DNA梯谱的方法,观察细胞发生凋亡时的形态学和生化特征,以此确定地塞米松能否促进伪狂犬病毒SA738株诱导牛肾细胞的凋亡。结果显示,PRVSA738能诱导牛肾细胞发生凋亡,同时100μmol/L的地塞米松能促进PRVSA738株诱导牛肾细胞的凋亡。为研究PRV潜伏感染的机理提供参考。     

伪狂犬病毒Sa株gI^-／gE^-／YFP^＋基因缺失载体构建及突变株筛选

根据伪狂犬病病毒sA株的gI和gE基因序列,设计两对引物,缺失掉gE基因5’端738bp,在克隆测序的基础上,采用酶切方法构建了含部分gE基因的转移载体pBgIE,同时将pBLYFP载体上含CMV启动子、多克隆位点、黄色荧光蛋白（YFP）基因和polyA尾巴的表达盒双酶切后插入到缺失位置,构建转移载体,命名为pBgIE—YFP,为下一步开发以伪狂犬病病毒为载体的基因工程疫苗提供了基础。