苯酚-尿素-甲醛共缩聚树脂结构形成比较

用13C NMR 定量分析跟踪研究了两种不同合成路线中苯酚-尿素-甲醛共缩聚树脂(PUF)结构形成过程,比较了3种PUF树脂的结构构成.研究发现树脂制备过程中的酸性环境导致脲醛树脂初聚物含量增加以及尿素与苯酚之间的共缩聚增加;合成反应初期的介质环境对羟甲基酚的形成有着决定性的影响;合成过程中酸性环境所处阶段不同,最终树脂结构出现差异.     

水貂PRLR基因的克隆及生物信息学分析

本研究旨在从水貂卵巢组织中克隆催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因编码区全长序列,并进行生物学信息分析,为研究其结构和功能奠定基础。根据GenBank中登录的犬PRLR基因的mRNA预测序列(登录号:XM_025436332.1)设计1对引物,采集性成熟的健康水貂卵巢组织样本,提取RNA并反转录合成cDNA,以cDNA为模板PCR扩增PRLR基因,将其插入pEASY-Blunt Simple Vector中,筛选阳性克隆测序后进行生物信息学分析。结果显示,水貂PRLR基因编码区序列全长为1 878bp,编码了625个氨基酸,水貂PRLR基因核苷酸序列与海獭同源性最高,为97.7%。系统进化树分析也显示其和海獭亲缘关系最近。对水貂卵巢PRLR基因编码蛋白进行生物信息学分析表明,PRLR蛋白含有1个信号肽,1个细胞外区域,1个跨膜区和1个膜内区;水貂PRLR蛋白为单次跨膜蛋白,其N端的D1部分含有2对保守的二硫键(Cys36—Cys46和Cys75—Cys86),D2部分含有保守的WS-基序(WS-E-WS)。水貂PRLR蛋白具有和其他PRLR蛋白相似的膜外和膜内结构。本试验结果为进一步研究和揭示水貂PRLR蛋白的结构及功能奠定了基础。     

鹿鞭精的生物效应研究

动物实验研究表明,鹿鞭精能使小白鼠体重和胸腺重量显著增加,明显延长小白鼠游泳时间。表明：鹿鞭精具有促生长,抗疲劳和提高机体免役功能等作用。     

梅花鹿激活素A重组蛋白真核表达、纯化 及其生物活性的测定

【目的】体外真核表达梅花鹿（Cervus nippon）激活素 A重组蛋白并测定其生物活性,为进一步明确激活素 A在梅花鹿卵母细胞体外成熟过程中的生理学功能提供基础。【方法】利用RT-PCR技术克隆梅花鹿激活素βA (Activin βA, ACTBA)亚基基因的cDNA 全长序列,同时利用生物信息学对梅花鹿激活素βA的基因特征进行分析。在NCBI 数据库下载其他物种激活素βA同源序列,利用Clustalx和MEGA 4 软件进行同源比对并构建进化树。构建pcDNA4/ACTBA重组质粒并转染至CHO细胞内,进行目的蛋白的体外表达。采用免疫荧光及Western blot 技术对目的蛋白表达情况进行检测,并通过Ni-NTA 亲和层析柱对蛋白产物进行纯化。采用Western blot检测了梅花鹿激活素 A重组蛋白处理后的猪颗粒细胞中的SMAD2和SMAD3的磷酸化水平。最后采用荧光定量PCR及Western blot检测了梅花鹿激活素 A重组蛋白处理后的猪颗粒细胞中类固醇激素合成相关酶的表达量。【结果】克隆得到的梅花鹿ACTBA亚基基因含有1 278 bp 的碱基,编码426个氨基酸。同源性比较发现梅花鹿ACTBA基因与牛的ACTBA基因同源性最高达98.4%同源。进化分析表明该基因与同为偶蹄目动物的反刍兽牛和山羊亲缘关系最为接近。经酶切、PCR和测序方法鉴定,成功构建真核表达质粒pcDNA4/ACTBA。免疫荧光显示该质粒在CHO细胞中主要定位在细胞质。Western blot 结果显示激活素 A的前体蛋白分子量约为58 kD左右。镍亲和层析纯化后的激活素 A重组蛋白显著增加SMAD2和SMAD3的磷酸化,表明激活素 A可以激活SMAD信号通路。同时成熟的激活素 A重组蛋白可以诱导猪颗粒细胞芳香化酶(Aromatase)蛋白表达量上调,类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)表达量下调,FSH受体基因表达量升高,LH受体基因表达量降低,但胆固醇侧链裂解酶(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, CYP11A1 or P450scc)及3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-Hydroxysteroid dehydrogenase, 3β-HSD)基因表达量不变。结果表明梅花鹿激活素 A重组蛋白可以增强FSH对颗粒细胞的生物学作用,也可以减弱LH对颗粒细胞的生物学作用。【结论】成功构建了激活素 A蛋白的真核表达载体,并获得了较高纯度的、具有生物学活性的梅花鹿激活素 A重组蛋白,为下一步激活素 A蛋白的生物学功能和生理学机制研究奠定了基础。     

合理利用品种资源优质高效发展养鹿业

对我国鹿类的品种资源进行了初步分析,提出了优质高效发展养鹿业的措施。     

水貂PRLR基因的克隆及生物信息学分析

本研究旨在从水貂卵巢组织中克隆催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因编码区全长序列,并进行生物学信息分析,为研究其结构和功能奠定基础。根据GenBank中登录的犬PRLR基因的mRNA预测序列(登录号:XM_025436332.1)设计1对引物,采集性成熟的健康水貂卵巢组织样本,提取RNA并反转录合成cDNA,以cDNA为模板PCR扩增PRLR基因,将其插入pEASY-Blunt Simple Vector中,筛选阳性克隆测序后进行生物信息学分析。结果显示,水貂PRLR基因编码区序列全长为1 878bp,编码了625个氨基酸,水貂PRLR基因核苷酸序列与海獭同源性最高,为97.7%。系统进化树分析也显示其和海獭亲缘关系最近。对水貂卵巢PRLR基因编码蛋白进行生物信息学分析表明,PRLR蛋白含有1个信号肽,1个细胞外区域,1个跨膜区和1个膜内区;水貂PRLR蛋白为单次跨膜蛋白,其N端的D1部分含有2对保守的二硫键(Cys36—Cys46和Cys75—Cys86),D2部分含有保守的WS-基序(WS-E-WS)。水貂PRLR蛋白具有和其他PRLR蛋白相似的膜外和膜内结构。本试验结果为进一步研究和揭示水貂PRLR蛋白的结构及功能奠定了基础。     

蓝狐生殖器官化学成分的研究

蓝狐(Alopes lagepus)是主要生产裘皮的毛皮动物,其生殖器官常被当作废弃物扔掉,造成资源的浪费及环境的污染.生殖器官在繁殖中发挥重要的生理作用,离体后是否具有与鹿鞭相似的医疗保健作用未见报道,仅见有蓝狐睾丸化学成分方面的报道[1].文章通过对蓝狐生殖器官中某些化学成分的测定、分析为其进一步开发、利用提供理论依据.     

提高梅花鹿骨钙溶率研究

梅花鹿骨通过高压蒸煮、磨浆和酶水解蛋白质,使可溶性肽和氨基酸含量增加,促进梅花鹿骨钙的溶解,增加梅花鹿骨钙溶率。酶解后的梅花鹿骨经微粒化后,有利于被消化液作用,可促进人体对其吸收利用。     

生长抑素耗竭剂CS57对生茸后期梅花鹿血清IGF-1浓度和再生茸生长的影响

9只雄性梅花鹿随机分为3组，每组3只。第1组在生茸后期用抗雄性激素CAZ处理后，每周口服1次生长抑素耗竭剂GS57，共处理4次；第2组在生茸后期只接受CAZ处理，未进行Cs57处理；第3组未进行任何处理，为对照组。结果：生茸后期（7月下旬-8月下旬），第1、2组血清睾酮水平均显著低于第3组；第1组血清IGF-1水平显著高于其处理前水平和第2、3组（P〈0．05）；第1、2组的再生茸长度和重量均显著大于第3组（P〈0．01），但第1、2组间差异不显著（P〉0．05）。表明在生茸后期，通过增加血清睾酮水平已经受到抑制的雄性梅花鹿血液IGF-1水平未能进一步起到促进再生茸生长的作用。     

梅花鹿茸胶囊缓解体力疲劳功能研究

目的证明梅花鹿茸胶囊具有缓解体力疲劳功能。方法1.实验动物体重测定法,2.负重游泳法,3.血清尿素测定法,4.肝糖原测定法,5.血乳酸测定法。结果经灌胃给予小白鼠0.15g/kgBW/d、0.30g/kgBW/d和0.60g/kgBW/d梅花鹿茸胶囊内容物（相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、20倍）时,对实验小白鼠的体重未见明显影响。在0.60g/kgBW/d的剂量时,具有延长小白鼠负重游泳时间的作用。梅花鹿茸胶囊内容物在0.30g/kgBW/d和0.60g/kgBW/d的剂量时,可减少运动后小白鼠血清尿素的产生。梅花鹿茸胶囊内容物在0.30g/kgBW/d和0.60g/kgBW/d的剂量时,具有增加小白鼠糖原储备或减少糖原消耗的作用。梅花鹿茸胶囊内容物在0.15g/kgBW/d、0.30g/kgBW/d和0.60g/kgBW/d的剂量时,对运动后小白鼠血乳酸的产生未见明显影响。结论梅花鹿茸胶囊具有缓解体力疲劳功能的作用。