降糖益肾方干预胰岛素信号通路改善转基因 2型糖尿病1VIKR鼠肾损伤的研究

目的观察降糖益肾方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR鼠血糖、血胰岛素及肾皮质中胰岛素受体、磷脂酞肌醇-3一激酶蛋白表达的影响、方法选取MKR鼠40只经鉴定后,随机分为MKR鼠组、MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组〔MKR鼠组用基础饲料喂养,MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组用高脂饲料喂养,连续喂养8周后,降糖益肾方组给予降糖益肾方,糖适贝那组给予糖适平加贝那普利,同时MKR鼠组和MKR鼠高脂组分别给予蒸馏水灌胃4周〔4周后处死小鼠收集标本,免疫组织化学SABC法检测肾小球中胰岛素受体1(IRS-1),磷脂酞肌醇-3一激}(PI-3K)的蛋白表达〔结果降糖益肾方明显降低高脂饮食MKR鼠肾小球中IRS-1和PI-3 K的蛋白表达水平,与MKR鼠高脂组比较,差异有统计学意义(P<0.01)、结论降糖益肾方改善糖尿病肾病系膜细胞增殖的机制可能与千预胰岛素信号通路有关、     

饥饿和再投喂期间尼罗罗非鱼生长、血清生化指标和肝胰脏生长激素、类胰岛素生长因子-Ⅰ和胰岛素mRNA表达丰度的变化

在室内可控条件下,对尼罗罗非鱼[初始体质量(62.50±3.44)g]进行饥饿28d和随后再投喂21d的处理,于饥饿第0、7、14、21、28天和再投喂第14、21天进行采样分析,研究饥饿和再投喂期间尼罗罗非鱼生长、血清生化指标和肝胰脏生长激素(GH)、类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和胰岛素(IN)mRNA表达丰度的变化。结果显示,与饥饿第0天相比,饥饿超过7d鱼体体质量显著降低(P<0.05),再投喂21d显著增加(P<0.05);肝体比随饥饿时间延长显著降低(P<0.05),恢复投喂后较饥饿时升高,但显著低于饥饿前水平(P<0.05)。在血清指标上,甘油三酯、血糖、碱性磷酸酶、谷草转氨酶和谷丙转氨酶均随饥饿时间延长而逐渐降低,恢复投喂后均有不同程度提高,但转氨酶活性显著低于饥饿前水平(P<0.05);饥饿和再投喂对血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇无显著影响(P>0.05)。在激素方面,与饥饿第0天相比,饥饿使血清GH含量及其肝胰脏mRNA表达丰度显著升高,血清IGF-Ⅰ及其肝胰脏mRNA表达丰度降低,恢复投喂后两者均显著升高(P<0.05);INmRNA表达丰度在饥饿7~21d显著升高(P<0.05),饥饿第28天时无显著差异(P>0.05),再投喂后显著降低(P<0.05)。     

Mechanisms Involved in the Growth Promotion of Weaned Piglets by High-level Zinc Oxide1

Dietary supplementation with high lev- els of zinc oxide （ZnO） is an effective method to prevent diarrhea and promote growth in weaned pig- lets. However, the mechanisms behind these beneficial effects are not well understood. Recent advances in this field indicated that the effects of ZnO on piglet growth are achieved through multiple regulatory path- ways rather than a single pathway. This review focu- ses on recent advances in the effects of high level ZnO on： 1 ） Zn status in weaned piglets; 2 ） intestinal microbe flora regulation; 3 ） intestinal structure and function;4） ion secretion in the intestine epithelium;5） intestinal immunology; and 6） secretion of brain-in- testine peptides. ZnO appears to regulate the intestinal microflora and decreases the release of histamine to prevent diarrhea. ZnO also increases the expression of intestinal insulin-like growth factor-1 （ IGF-1 ） and the IGF-1 receptor to ameliorate intestinal injury associat- ed with weaning, and mediates secretion of brain-gut peptides to stimulate food intake, to promote the growth of piglets. Better understanding of the underly-1 ing mechanisms should inspire us to supplement the diet for weaned piglets with ZnO and investigate new approaches to prevent diarrhea and enhance growth.     

猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2基因扩增及在前脂肪细胞3T3-L1中的表达

KLFs(Kruppel-like factors)家族和Egr2(Early growth response factor 2)是真核生物中广泛存在的锌指类基础调控因子,在各类细胞的增殖分化和组织发育中起关键作用,在此研究它们在3T3-L1前脂肪细胞中的表达差异。以肝脏cDNA为模板,扩增猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2部分编码序列,通过半定量RT-PCR进一步检测它们在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激下的前脂肪细胞3T3-L1细胞中的表达差异。结果表明,试验扩增到了长度分别为1 387bp、767 bp、518 bp和959 bp的猪Klf4、Klf5、Klf7和Egr2的部分编码序列,并通过与GenBank序列比对加以确认,在胰岛素和盐酸克伦特罗刺激的3T3-L1前脂肪细胞中检测到了它们部分表达,胰岛素刺激Klf4的表达,而抑制Klf5和Egr2的表达;盐酸克伦特罗刺激Klf5的表达,抑制Egr2的表达,对Klf4表达影响则随着浓度的升高由刺激变为抑制;而Klf7在3T3-L1前脂肪细胞中则检测不到有效表达。     

绵羊肌肉IGF-I.基因表达的发育性变化研究

生长激素（GH）在动物体内主要有两种作用方式：（1）GH与肝脏等靶器官上的GHR结合,产生胰岛素样生长因子（IGF）,随后IGF以内分泌方式进入血液,与胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）结合后到达靶器官,作用于胰岛素样生长因子受体（IGFR）,从而调节动物生长发育。②GH直接作用于靶器官GHR,通过旁分泌或自分泌IGF直接影响细胞的代谢,从而调节机体的生长发育。GH可作用于骨骼肌GHR,产生旁分泌或自分泌的IGF-I调节肌肉的生长发育,或直接影响细胞的代谢。笔者采用实时定量PCR法,以处于生长发育早期的雄性哈萨克羊和雄性新疆细毛羊为研究对象,检测了IGF-I基因在肌肉中表达情况。     

香蕉花蓟马对不同颜色的敏感性及色板田间悬挂组合选择

为明确香蕉花蓟马对不同颜色的敏感性及色板的田间悬挂组合,以香蕉种植基地为试验点,分别比较香蕉花蓟马对10种基本色和8种同类色的敏感性差异,测定颜色、悬挂高度和悬挂方式3者对香蕉花蓟马的互作效应。结果表明：10种基本色中,香蕉花蓟马对黄色最敏感,其次为粉色、蓝色和青色,对其他6种颜色的敏感性较弱;8种同类色中,香蕉花蓟马对橙黄最敏感,其次为香蕉黄、镉黄和纯黄,对其他4种黄色的敏感性较弱。颜色、悬挂高度和悬挂方式均显著影响粘虫色板对香蕉花蓟马成虫的诱集效果,3者间互作效应显著;4种敏感黄色粘虫板,香蕉黄、橙黄和纯黄的悬挂高度均以粘虫板底端与花蕾肩部平齐为宜,镉黄的悬挂高度以粘虫板底端高出花蕾肩部20 cm为宜,悬挂方式均以粘虫板长边为底端为宜,这4种组合以橙黄粘虫板组合对香蕉花蓟马的田间诱集效果最好。     

额种子蛋白体靶向表达口服重组胰岛素原载体构建及转化水稻

应用水稻种子生物反应器开发口服重组胰岛素原具有重要应用前景。通过分子设计保证重组胰岛素原在人体肠道内的自主加工成熟,根据水稻密码子偏爱性人工合成了霍乱毒素β亚基和人胰岛素原的融合基因(cholera toxin B subunit fused with human proinsulin,CTBIN),并在C末端添加内质网滞留信号KDEL。通过PCR技术从粳稻品种日本晴全基因组中克隆谷蛋白启动子及其信号肽序列pGluB1sig(GluB1 promoter and its signal peptide)用于驱动融合基因CTBIN的表达,插入载体pCAMBIA1302,构建了水稻种子蛋白体靶向表达口服重组胰岛素原的载体pCAMBIA1302-pGluB1sig-CTBIN-Nos。采用农杆菌介导法转化日本晴,获得了46株转基因水稻植株,Western杂交检测到CTB-人胰岛素原融合蛋白在水稻种子中表达。     

复方中药对奶牛回乳效果及泌乳相关因子的影响

【目的】探究复方中药对奶牛回乳效果及回乳期奶牛血清泌乳相关因子胰岛素样生长因子1(IGF-1)、信号转导和转录激活因子5(STAT5)和转化生长因子β1(TGF-β1)含量的影响。【方法】选取规模化奶牛场妊娠后期、即将干乳、产奶量为(15.42±0.71)kg的的健康奶牛80头。随机分为A、B、C、D组,每组20头,采用逐渐干奶法回乳,回乳开始当天记为第0天,A组为对照组,不饲喂复方中药,B、C、D组均从回乳第1天开始,每日上午8:00分别饲喂复方中药400、500、600 g,回乳完成后停止饲喂复方中药。分别采集回乳期奶牛第0、1、3、5、7、9和11天尾静脉血,并记录奶牛单日产奶量,ELISA法检测回乳期奶牛血清IGF-1、STAT5和TGF-β1含量。【结果】回乳期各组奶牛产奶量均随时间推移降低,A、B、C、D组回乳时间分别为11、7、5、5 d。在奶牛回乳期,各组奶牛血清IGF-1和STAT5含量均随时间推移呈下降趋势,并在回乳期后回升,而各组奶牛血清TGF-β1含量均呈上升趋势,并在回乳期后下降;回乳期奶牛产奶量与IGF-1和STAT5含量均分别呈极显著正相关(P0.01),与TGF-β1含量呈极显著负相关(P0.01);IGF-1与STAT5含量呈极显著正相关(P0.01),而TGF-β1与IGF-1、STAT5含量分别呈极显著负相关(P0.01)。【结论】复方中药能明显促进回乳期奶牛回乳,饲喂500 g/日即可达到最佳回乳效果。在奶牛回乳期,IGF-1和STAT5是奶牛回乳的负调控因子,而TGF-β1是奶牛回乳的正调控因子。     

黄颡鱼胰岛素样生长因子结合蛋白1基因的克隆及表达分析

为研究黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)胰岛素样生长因子结合蛋白1基因(IGFBP1)的特征,阐明IGFBP1基因在不同性别黄颡鱼组织中的表达特征和IGFBP1蛋白在雌、雄黄颡鱼肌肉中的表达差异,克隆IGFBP1基因的c DNA全长,并进行实时荧光定量PCR检测和Western Blot分析。结果表明:黄颡鱼IGFBP1基因c DNA全长为1 259 bp,其开放阅读框长度为714 bp,编码237个氨基酸,3'端和5'端非翻译区分别为407 bp和138 bp;黄颡鱼IGFBP1基因核苷酸序列与鲇形目斑点叉尾鮰的相似度(89%)较高,与鲢、鲤、鲫、草鱼和团头鲂等的差异较大;肝脏是黄颡鱼IGFBP1基因m RNA表达最丰富的组织,IGFBP1基因在雄性个体心脏、肾脏、肌肉和肠组织中的表达量显著高于雌性的(P0.05);IGFBP1蛋白在雌、雄黄颡鱼肌肉组织中都有表达,且在雄性个体中的表达量高于在雌性个体中的表达量。     

金雀异黄素对雌性大鼠体内促性腺激素及胰岛素样生长因子表达的影响

本试验旨在研究金雀异黄素(genistein,GEN)对雌性大鼠体内促性腺激素及胰岛素样生长因子表达的影响。选取40只SD雌性大鼠[体重(200±20)g],随机分为5组,分别为阴性对照(NC)组、GEN低(L)、中(M)、高剂量(H)组及阳性对照(PC)组,每组8只,NC组灌胃花生油(其他组灌胃试剂以此为溶剂);L、M、H组分别灌胃15、30、60 mg/(kg BW·d)GEN,PC组灌胃己烯雌酚0.5 mg/(kg BW·d)。试验期30 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)含量;实时定量PCR法检测卵巢IGF-1、IGFBP-1 mRNA表达水平。结果表明:与NC组比较,试验组血清中FSH、LH含量有升高趋势,但差异不显著(P0.05),作用效果与PC组一致;试验组血清IGF-1含量略有降低,但差异不显著(P0.05),PC组显著降低(P0.05);试验组血清IGFBP-1含量显著或极显著升高(P0.05或P0.01),PC组显著升高(P0.05);试验组卵巢组织中IGF-1、IGFBP-1 mRNA表达水平均升高,其中M、H组显著升高(P0.05),与PC组变化一致。由此可见,GEN能够提高雌性大鼠血清FSH、LH含量、降低血清IGF-1含量、提高血清IGFBP-1含量,同时提高卵巢中IG FBP-1、IG F-1 mRNA的表达水平,这些指标协同作用于卵巢,能够促进卵泡的成熟,调节卵巢功能。