牛输卵管上皮细胞转人胶原蛋白cDNA基因及转基因克隆胚胎

以2岁奶牛输卵管为材料,用胰酶消化法分离得到了牛输卵管上皮细胞。输卵管上皮细胞在DMEM／F12培养基中生长良好。用一代牛输卵管上皮细胞为靶细胞,对其进行了电穿孔转染,转染对象是分子大小为31085bp的以β-casein启动子为基础的含有人胶原蛋白cDNA基因和EGFP、Neor双标记基因的质粒。电穿孔试验发现,牛输卵管上皮细胞在低渗缓冲液中电转染可以获得阳性转染子,其中以90mOsm／kg为最佳。电压以800V为好,电压高和低都不利于电穿孔的成功。成功转染的细胞用800mg/L G418进行筛选,在10d后获得了较大的阳性细胞克隆簇。对获得的阳性细胞克隆簇进行扩大后,得到了较纯的阳性细胞克隆系,流式细胞仪检测其纯度为81．6％。在荧光显微镜下选择阳性细胞作为核移植供体细胞进行了转基因克隆试验,结果显示以转基因和非转基因细胞为核供体获得的重构胚融合率差异显著（51．9％比63．2％）,获得的桑椹胚／囊胚率差异不显著（20．3％比25．5％）。对获得的具有绿色荧光的胚胎进行DNA分析,结果显示这些胚胎成功转入了外源基因,并且转入的外源基因结构完整。     

中国美利奴羊“U”系新类群

新疆农垦科学院从1992～1997年，选择优秀的美利奴公，母羊，运用超数排卵、人工授精、手术采卵、同期发情、胚胎移植和B超妊娠检查等现代技术，培育出了在羊毛长度、密度、细度、强力、伸度和产毛量等方面均高于原中国美利奴羊的“U”系新类群，并已在兵团6个师，局扩繁和改良一般细毛羊，获得巨大的成功。     

欧洲肉羊生产及国内发展现状

受中国畜牧兽医学会养羊分会委派,由养羊学会分会牵头组团,一行7人于2006年10月赴欧洲进行了为期15d的肉羊生产培训考察。通过专家讲座、现场参观、交流研讨等方式,开阔了视野,拓宽了思路,特别是欧洲在肉羊生产管理方面的经验和先进技术,对提高我区养羊业生产水平和经济效益,尽快把肉羊产业做大做强,建立新疆特色畜牧业生产体系都具有一定的借鉴作用。     

对兵团养羊业的思考

本文作者对兵团养羊业进行了回顾 ,认为兵团养羊业要大发展 ,必须根据国内外市场的发展变化做出相应调整 ,如在保留现有细毛羊群体的同时 ,大力发展优质羔羊肉和优质超细羊毛生产 ,并重点培养上规模的能够配套进行养羊生产的个体或集体养羊户 ,树立品牌意识 ,扩大经营自主权 ,积极参与市场流通 ,使其向规模效益型发展     

灭虫丁(7051)对中国美利奴母羊妊娠及哺乳期痒螨病的防治效果

对妊娠至哺乳期中国美利奴母羊 181只进行了连续投服灭虫丁 (70 5 1)片剂的治疗及预防羊螨试验 ,并对妊娠母羊所产羔羊进行了初生至断奶体重的测量 ,通过试验 ,投服 (70 5 1)片剂母羊妊娠期和哺乳期对羔羊的生长发育没有影响 ,对照组与试验组羔羊初生体重和断奶体重差异不显著 (P >0 .0 5 )。经试验在母羊妊娠和哺乳期投服 (70 5 1)片剂对预防和治疗绵羊痒螨有较好效果且不影响羔羊的生长发育。     

绵羊腹腔内窥镜子宫角深部冷冻精液输精试验

采用人用黄体酮 ,PMSG对绵羊进行同期发情处理 ,46只绵羊 48h同期发情率为 95 .6 5 % (4 4/ 46 ) ,用解冻后活力仅 0 .2的冷冻精液 ,借助腹腔内窥镜子宫角深部输精 ,情期受胎率 72 .73% (32 / 44 ) ,与澳大利亚Salamoan教授腹腔内窥镜子宫角冷冻精液输精情期受胎率 74.0 4% (77/ 10 4)且冻后活力 0 .5 ,仅差 1.31个百分点 ,差异不显著 (P <0 .0 5 ) ,而与常规冷冻精液输精的情期受胎率 5 5 .45 % (178/ 32 1)相比 ,高出 17.78个百分点 ,差异极显著 (P <0 .0 1)。     

中国美利奴羊非繁殖季节同期发情冻胚移植试验

利用相同来源相同质量的冷冻胚胎，对中国美利奴羊进行了春季非繁殖季节和秋季繁殖季节的同期发情和胚胎移植的对比试验。其中非繁殖季节2－3月份，同期处理受体母羊189只，发情101只，同期率53．4％，移植受体85只，受胎17只，受胎率20％。繁殖季节9－10月份，同期处理受体羊205只，发情137只，同期率66．82％。移植121只，受胎67只，受胎率55．37％。由试验结果看出，中国美利奴母羊在繁殖季节的同期率和胚胎移植的受胎率明显高于非繁殖季节（P＜0．01）。     

HGTP基因与羊毛细度的相关性分析及其启动子活性研究

本研究旨在构建高甘氨酸-酪氨酸蛋白(HGTP)启动子荧光素酶报告基因载体并验证其活性,阐明HGTP基因在萨福克羊和中国美利奴羊皮肤毛囊组织中的表达差异与羊毛经济性状的关系。运用PCR方法扩增HGTP基因启动子序列片段,克隆至pGL3-Basic载体中构建重组质粒,并通过双酶切验证和测定核酸序列鉴定;转染皮肤成纤维细胞并检测报告基因的活性;测定羊毛的纤维直径、长度的数据,利用实时荧光定量PCR分析HGTP基因在不同品种绵羊的皮肤毛囊组织中的表达情况。结果显示,萨福克羊与中国美利奴羊的羊毛纤维直径及自然长度差异极显著(P0.01),HGTP基因表达水平与羊毛纤维直径存在极显著的高度正相关(P0.01),与羊毛自然长度呈现显著的中等负相关(P0.05),而羊毛直径与自然长度之间存在极显著的高度负相关(P0.01)。HGTP基因在萨福克羊和中国美利奴羊皮肤组织中的表达水平差异极显著(P0.01)。启动子活性荧光素酶检测结果显示,KAP6.1、KAP7和KAP8.1启动子元件在绵羊皮肤成纤维细胞和3T3细胞中均有表达,且在绵羊成纤维细胞中的活性极显著高于在3T3细胞中的活性(P0.01)。HGTP基因可以作为研究羊毛纤维直径、自然长度的候选基因。构建不同长度的表达载体,转染皮肤成纤维细胞,获得的2个启动子元件都能驱动外源基因在体外细胞水平表达。绵羊HGTP基因启动子的功能研究为调控羊毛发育提供了理论依据。     

HGTP基因与羊毛细度的相关性分析及其启动子活性研究

本研究旨在构建高甘氨酸－酪氨酸蛋白（HGTP）启动子荧光素酶报告基因载体并验证其活性,阐明HGTP基因在萨福克羊和中国美利奴羊皮肤毛囊组织中的表达差异与羊毛经济性状的关系。运用PCR方法扩增HGTP基因启动子序列片段,克隆至pGL3-Basic载体中构建重组质粒,并通过双酶切验证和测定核酸序列鉴定;转染皮肤成纤维细胞并检测报告基因的活性;测定羊毛的纤维直径、长度的数据,利用实时荧光定量PCR分析HGTP基因在不同品种绵羊的皮肤毛囊组织中的表达情况。结果显示,萨福克羊与中国美利奴羊的羊毛纤维直径及自然长度差异极显著（P<0.01）,HGTP基因表达水平与羊毛纤维直径存在极显著的高度正相关（P<0.01）,与羊毛自然长度呈现显著的中等负相关（P<0.05）,而羊毛直径与自然长度之间存在极显著的高度负相关（P<0.01）。HGTP基因在萨福克羊和中国美利奴羊皮肤组织中的表达水平差异极显著（P<0.01）。启动子活性荧光素酶检测结果显示,KAP6.1、KAP7和KAP8.1启动子元件在绵羊皮肤成纤维细胞和3T3细胞中均有表达,且在绵羊成纤维细胞中的活性极显著高于在3T3细胞中的活性（P<0.01）。HGTP基因可以作为研究羊毛纤维直径、自然长度的候选基因。构建不同长度的表达载体,转染皮肤成纤维细胞,获得的2个启动子元件都能驱动外源基因在体外细胞水平表达。绵羊HGTP基因启动子的功能研究为调控羊毛发育提供了理论依据。