斜纹夜蛾核型多角体病毒基因ⅡORF13的克隆、表达与启动子活性分析

 【目的】研究新发现的斜纹夜蛾核型多角体病毒II株基因 ORF13的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV II ORF13基因序列设计引物,经PCR扩增并克隆ORF13。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF13片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,起始密码子上游-84bp处发现杆状病毒晚期启动子基序ATAAG,没有发现明显的早期启动子基序。启动子活性分析和转录时相分析证实,ORF13是一个早期和晚期都表达的基因,在病毒感染2 h就开始转录,18 h达到最高峰,24 h以后转录水平有所下降,但基本维持恒定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1:3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF13是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。ORF13编码的蛋白可能是一种BV的膜蛋白,与细胞跨膜转运有关,制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。     

农户普通菜棚脱毒马铃薯原原种生产技术

宁蒗县是云南省西北部的马铃薯种植大县,常年播种面积8 000 hm2。种薯脱毒是目前马铃薯生产上极为重要的增产技术,脱毒种薯的生产是脱毒技术的核心内容,直接影响脱毒技术的推广应用和增产效益。由于马铃薯种薯用量大,加大了脱毒种薯的生产难度。为了提高脱毒种薯的生产速度,实现规模化、工厂化、集约化生产,     

桃果实发育过程中山梨醇及酶活性变化

碳水化合物的种类和含量是决定果实品质的重要因素,果实中碳水化合物的转化、积累除受内源激素、韧皮部卸载等因子影响外,很大程度上依靠其代谢相关酶活性的调控.糖是植物生长、发育的一个重要的、多重的角色,是果实生长发育的基础物质,同时为果实细胞膨大提供渗透动力.山梨醇属于糖醇类,是山梨糖光合同化产物,可以作为可溶性贮存物质,也可作为类似于蔗糖的一种同化物运输物质.此外,山梨醇与提高植物的抗逆性、改善果实风味也有关(周睿等,1993;Beruter et al.,1997),其在果实内能通过其代谢酶被迅速转化(周睿等,1993;Bianco et al.,2002),山梨醇脱氢酶(sorbitoldehydrogenase,SDH)和山梨醇氧化酶(sorbitol oxidase,SOX)是参与山梨醇代谢的关键酶,其中SDH催化山梨醇转化成果糖与葡萄糖,SOX催化山梨醇氧化成葡萄糖(周睿等,1993;Yamaki et al.,1986).     

2001～2007年《安徽农业科学》基金论文分布情况分析

依据《中国引文数据库》的统计数据,分析了《安徽农业科学》2001~2007年的基金论文分布情况。     

我国农作物和农学（农艺学）类专业期刊分类的建议

对《中国期刊引证报告（扩刊版）》和《中国学术期刊综合引证报告》的关于农作物、农学（农艺学）类专业期刊分类结果提出一些异议,并按学术类、技术类和科普类3类对农业基础科学期刊进行了重新划分。     

质疑“扩版=质量下降”——以《中国农学通报》和《安徽农业科学》为例

基于《中国学术期刊综合引证报告》的统计数据,以《中国农学通报》和《安徽农业科学》杂志为例,质疑“扩版=质量下降”的推断,以期为农业期刊的良性发展提供科学数据。     

我国农业基础科学期刊分类的建议

对《中国期刊引证报告（扩刊版）》和《中国学术期刊综合引证报告》的关于农业基础科学期刊分类结果提出一些异议,并按学术类、技术类和科普类3类对农业基础科学期刊进行了重新划分。     

2007年我国20种农业科学类期刊引证指标分析

采用文献计量学方法对2007年我国20种农业科学类期刊的引证指标进行分析。     

我国20个省级农业科学期刊在网络环境下的国内读者地域分布分析

依据中国学术期刊文献评价统计分析系统的统计数据,对我国20种省级农业科学类期刊2005年1月～2009年1月在网络环境下的国内各省读者地域分布进行分析。     

带有绿色荧光蛋白外源DNA转染绵羊成纤维细胞的研究

为了优化建立转染绵羊成纤维细胞系的外源基因转染体系,本研究利用带有绿色荧光蛋白（GFP）的外源基因,采用阳离子脂质体法,探讨了DNA用量、脂质体用量和转染时间等因素对转染绵羊成纤维细胞的影响。结果表明,在500 μL转染培养基中成纤维细胞达到85%汇合时,添加由50 μL DMEM中含有0.2 μg DNA和50 μL DMEM中含有2.0 μL LipofectamineTM 2000的两种溶液混合构成的转染液并转染12 h,可获得最高的转染效率。当转染12 h后,用基础培养液培养至第24小时,细胞核周区出现强绿色荧光,而当转染后48～64 h观察时,细胞核周区的荧光强度明显弱,而远离核周区的胞质中的荧光强度增加。