| 斜纹夜蛾核型多角体病毒基因ⅡORF13的克隆、表达与启动子活性分析 |
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| 引用本文： | 盛晔,闵丹,李轶女,张志芳,朱越雄,朱江.斜纹夜蛾核型多角体病毒基因ⅡORF13的克隆、表达与启动子活性分析[J].中国农业科学,2011,44(6):1146-1153. |
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| 作者姓名： | 盛晔 闵丹 李轶女 张志芳 朱越雄 朱江 |
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| 作者单位： | (苏州大学医学部基础医学与生物科学学院); |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，苏州市科技支撑计划项目，苏州大学"211"工程基金 |
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| 摘 要： | 【目的】研究新发现的斜纹夜蛾核型多角体病毒II株基因 ORF13的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV II ORF13基因序列设计引物,经PCR扩增并克隆ORF13。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF13片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,起始密码子上游-84bp处发现杆状病毒晚期启动子基序ATAAG,没有发现明显的早期启动子基序。启动子活性分析和转录时相分析证实,ORF13是一个早期和晚期都表达的基因,在病毒感染2 h就开始转录,18 h达到最高峰,24 h以后转录水平有所下降,但基本维持恒定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1:3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF13是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。ORF13编码的蛋白可能是一种BV的膜蛋白,与细胞跨膜转运有关,制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。
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| 关 键 词： | 斜纹夜蛾 核型多角体病毒 ORF13 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2010-07-17; |
Cloning, Expression and Promoter Analysis of ORF13 of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus Ⅱ(SpltMNPVII) |
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| SHENG Ye,MIN Dan,LI Yi-nü,ZHANG Zhi-fang,ZHU Yue-xiong,ZHU Jiang.Cloning, Expression and Promoter Analysis of ORF13 of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus Ⅱ(SpltMNPVII)[J].Scientia Agricultura Sinica,2011,44(6):1146-1153. |
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| Authors: | SHENG Ye MIN Dan LI Yi-nü ZHANG Zhi-fang ZHU Yue-xiong ZHU Jiang |
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| Institution: | SHENG Ye1,2,MIN Dan1,LI Yi-nü2,ZHANG Zhi-fang2,ZHU Yue-xiong1,ZHU Jiang1(1School of Biology and Basic Medical Science,Medical College of Soochow University,Suzhou 215123,Jiangsu,2Biotechnology Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ORF13 |
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