猪繁殖呼吸综合征病毒S3毒株的分离及其免疫特性研究

从某猪场仔猪体内分离到一株PPRSV毒株，该毒株能在Marc-145细胞上增殖产生致细胞病变，该病变能被PPRSV美洲型阳性血清所抑制，不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制，经美洲型PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应，电镜观察到直径55－60nm的病毒粒子，接种阴性仔猪未见临床症状异常，但抗体检测阳性。命名该分离毒为PPRSV－S3毒株。在S3弱毒株分离鉴定的基础上，进一步在猪体上对其致病性和免疫力进行研究。S3毒株接种仔猪后，仔猪不表现任何症状，也不向外排毒。4－5周龄的仔猪接种S3株后可产生坚强的免疫力，免疫后4－6个月能抵抗强毒攻击。后备母猪配种前2－3周免疫接种S3株，怀孕90－95d攻强毒，未发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔等繁殖障碍现象。结果表明，S3是一株自然分离的弱毒株，且具有良好的安全性和免疫力。     

猪繁殖与呼吸综合征流行病学简述

猪繁殖与呼吸综合征 (Porcinereproductiveandrespirato rysyndrome,PRRS )是 2 0世纪 80年代中后期发现的一种新的病毒性传染病 ,以母猪发热、厌食、流产、死产、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍以及仔猪呼吸道症状和高死亡率为特征 ,在全球各养猪场迅速传播 ,给养猪业带来了严重的危害 ,引起了各国学者的广泛关注。PRRS首次暴发于 1987年美国的北卡罗纳、衣阿华等州的猪群中 ,以后在德国、加拿大、日本、荷兰、西班牙、法国、英国、丹麦、日本、韩国、朝鲜等国相继报道 ,短短几年便几乎蔓延到全球各养猪场。初期由于不明原因 ,曾被称为猪神…     

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗研制及应用研究

猪细小病毒 (ＰＰＶ)能引起母猪尤其是初产母猪的繁殖障碍 ,主要表现为母猪受胎率降低、产活仔数减少、出现死胎和 (或 )木乃伊胎。到 2 0世纪 80年代ＰＰＶ在我国的流行已经相当广泛 ,给养猪业带来严重的经济损失。预防本病的唯一办法是应用疫苗。我所在ＰＰＶ分离和鉴定的基础上 ,一直致力于猪细小病毒病疫苗的研究 ,于 1 987年研究成功猪细小病毒ＡＥＩ灭活疫苗〔1〕,1 994年研究成功猪细小病毒病弱毒疫苗〔2 ,3〕。对于猪细小病毒ＡＥＩ灭活疫苗在经过不断的改造、完善及一系列试验后 ,现在研制的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗具有免疫剂…     

猪细小病毒弱每株(PPVs-1A)对猪的安全性试验

为了证买PPV_(S-1)株的黄全性,以1—4毫升肌注接种5月龄左右阴性猪6只,观察8天,接种猪无明显临床症状,没有发生病毒血症和排毒.以4毫升(TCIDS_(50)10~(7.5)HA:4096)肌注接种孕猪(孕龄38～46天)4只,一头未接种怀孕母猪与接种孕猪同居饲养42天.结果5只孕猪都没有发生病毒血症,接种后42天宰杀,共收集到胎猪68只,从68只胎猪中没有分离到PPV.     

不同代次的猪细小病毒(PPV S-1株)NS1基因的克隆与序列分析

根据GenBank中猪细小病毒PPVNADL-2株NS1基因序列设计了一对引物,以PPVS-1分离株不同传代代次的DNA为模板．进行PCR扩增。将扩增产物分别克隆到pGEM．T载体中进行测序。结果表明：扩增片段长约2．2kb。包含完整的NS1基因,共编码662个氨基酸。应用DNAStar软件进行序列分析,结果显示：所有代次的NS1核苷酸同源性在99．4％以上,氨基酸同源性在98．5％以上;PPVS-1分离株在传代致弱的过程中,NS1基因出现了一些变异,有4处较为一致的突变,即1052位C→T、1636位G→A、1717位A→G、1732位T→G．对应的氨基酸变化分别为Thr^351→Met^351、Val^546→Met^546、Asn^573→Asp^573、Set^579→Ala^579．这可能是PPVS-1在ST细胞上传代致弱的分子基础之一。     

猪伪狂犬病病毒在不同细胞中增殖的研究

研究了猪伪狂犬病病毒(PRV)在ST、PK-15、CEF、BHK-21细胞系上的增殖情况。结果表明:4种细胞对PRV均敏感,PRV在4种细胞上增殖产生的病毒毒价分别为10~(-8.87±0.04)TCID_(50)/mL、10~(-8.50±0.03)TCID_(50)/mL、10~(-7.68±0.06)TCID_(50)/mL和10~(-7.87±0.05)TCID_(50)/mL。4种细胞都能产生明显的病变,但不同的细胞上出现病变不同,PK-15细胞(20±2)h出现细胞病变且病变为葡萄串状的细胞;ST细胞(22±2)h出现细胞病变且病变为细胞圆缩后成合胞体病灶;BHK-21细胞(25±1)h出现细胞病变且病变为细胞圆缩后成合胞体病灶,有拉网现象;CEF细胞(24±2)h出现细胞病变为葡萄串状的细胞。以上结果说明,ST细胞也适合用于PRV的增殖培养。