柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测

【目的】为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。【方法】利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1，以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBR Green I荧光染料法两种荧光定量PCR（共3种）反应体系；确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性，据此对3种体系进行了比较；从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测。【结果】两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级，而TaqMan探针法由于使用了杂交探针，其特异性尤其可靠，另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性，加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势，使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测。【结论】本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术。     

不同品种绵羊D-loop区遗传多样性研究

线粒体DNA（Mitochondria DNA,mtDNA）D-loop区的进化速度快且多态性丰富, 因此在生物的遗传多样性和起源进化研究中具有重要意义。采用PCR扩增和基因测序的方法分析甘肃高山细毛羊（G）、欧拉羊（O）、杜泊羊（D）、蒙古羊（M）、小尾寒羊（S）和湖羊（H）的线粒体DNA D-loop区遗传多样性和进化关系。结果显示,试验羊D-loop区中GC含量低于AT含量,共检测到171 个变异位点,单一多态位点58 个,简约信息位点113 个,共87 个单倍型,单倍型多样度（H_d）分别为 0.993、1.000、0.968、1.000、0.933和1.000,核苷酸多样度（P_i）分别为 0.022 37、0.014 63、0.011 93、0.017 47、0.021 40和0.023 48,湖羊的平均核苷酸差异度最大（K=31.622）,而杜泊羊最小（K=15.995）。蒙古羊和杜泊羊的核苷酸平均差异数K_xy最大,蒙古羊和欧拉羊的核苷酸平均差异数K_xy最小。核苷酸歧异度D_xy与核苷酸平均差异数K_xy结果一致。系统发育树结果显示,湖羊与小尾寒羊先聚集在一起,然后与杜泊羊聚为一类;欧拉羊与蒙古羊先聚为一类,然后与甘肃高山细毛羊聚为一大类,说明湖羊与小尾寒羊遗传差异小。     

不同繁殖力绵羊BMPR-IB基因CDS区597位点多态性检测

为探究骨形态发生受体蛋白IB基因(Bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB)编码区多态性对绵羊繁殖性能的遗传效应,以湖羊、产单羔蒙古羊、产双羔蒙古羊、产单羔欧拉羊、产双羔欧拉羊母羊为研究对象,对试验群体的BMPR-IB基因CDS区597位点进行了多态性检测。结果显示:在产双羔和产单羔的蒙古羊、欧拉羊中均检测到野生GG基因型、杂合突变GA基因型和纯合突变AA基因型,而湖羊只检测出GA、AA两种基因型。湖羊的优势基因型为AA,优势等位基因为A;产双羔蒙古羊、产双羔欧拉型藏羊、产单羔欧拉型藏羊优势基因型均为GA型,其中产双羔蒙古羊与产双羔欧拉藏羊优势等位基因为A,产单羔欧拉型藏羊优势等位基因为G;产单羔蒙古羊优势等位基因型为GG,优势等位基因为G。经多态信息含量(Polymorphism information content,PIC)及χ~2适合性检测分析可知,产双羔与产单羔的蒙古羊、欧拉羊均处于中度多态(0.25相似文献   

两种测定苜蓿芽多糖方法的比较

采用蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法测定了苜蓿芽多糖(MSP)含量,并比较了2种方法的适用性。结果表明:蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法测定的MSP含量分别为(2.76±0.46)%和(3.17±0.88)%,前者显著低于后者(P<0.05);由于苜蓿芽提取液的颜色在苯酚-硫酸法测定波长下具有一定的吸光度,使其结果偏高,因此采用该方法需要对提取液进行脱色处理,而蒽酮-硫酸法测定结果更符合实际值。蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法的回收率分别为(94.18±5.00)%和(99.40±3.51)%,回收率相对标准差分别为5.31%和3.53%,说明苯酚-硫酸法用于测定苜蓿芽多糖含量灵敏度更高、重复性更好。     

补播和划破草皮对退化亚高山草甸植被恢复的影响

在甘肃省甘南州临潭县研究围栏内补播和划破草皮对退化亚高山草甸植被的高度、总盖度、地上生物量和功能群物种多样性总指数的影响。结果表明,在各划破草皮处理中,牧草总盖度、地上生物量和功能群物种多样性总指数随着补播量的增加而增加,植被高度随着补播量的增加呈先增加后降低的趋势。补播和划破草皮有显著互作效果,补播量3[垂穗披碱草(Elymus nutans)播量为49.1 kg·hm-2,老芒麦(Elymus sibiricus) 播量为67.5 kg·hm-2,紫花苜蓿甘农1号(Medicago sativa cv.Gannong No.1)播量为23.3 kg·hm-2]和划破草皮组合的牧草地上生物量(201.5 g·m-2)、总盖度(88.2%)和功能群物种多样性总指数(1.203)达到最大值,补播量1（垂穗披碱草播量为26.7 kg·hm-2,老芒麦播量为37.5 kg·hm-2,紫花苜蓿甘农1号为0）和划破草皮组合的植被高度(11.7 cm)达到最大值。就各补播水平平均值而言,划破草皮植被高度、总盖度、地上生物量和功能群物种多样性总指数显著高于未划破草皮。综合考虑高度、总盖度、地上生物量和功能群物种多样性总指数,经关联度分析可知,补播量2（垂穗披碱草播量为37.5 kg·hm-2,老芒麦播量为52.5 kg·hm-2,紫花苜蓿甘农1号18.3 kg·hm-2）和划破草皮为最优组合。     

利用玉米秸秆酶解液发酵胶质芽胞杆菌WY120的研究

胶质芽胞杆菌WY120是微生物肥料生产常用菌株,传统的生物钾肥菌剂发酵生产的主要原料是采用淀粉、蔗糖和葡萄糖等。以玉米秸秆为原料,通过与淀粉蔗糖培养基发酵培养胶质芽胞杆菌的比较研究,探讨了玉米秸秆酶解液作为碳源发酵生产胶质芽胞杆菌的可行性。结果显示,玉米秸秆酶解液作为碳源发酵生产的胶质芽胞杆菌,其活菌数为3.52×108 cfu/mL,是淀粉蔗糖培养基的1.63倍。秸秆酶解液培养基的优化试验结果显示,其最佳初始葡萄糖浓度为15 g/L,活菌数可达到3.95×108 cfu/mL。当转速为250 r/min,pH控制在7.0~7.2时,5 L发酵罐的试验结果显示,其活菌数高达6.76×108 cfu/mL,是摇瓶培养的1.71倍。研究结果表明,玉米秸秆可替代传统的淀粉蔗糖为碳源发酵生产胶质芽胞杆菌,为玉米秸秆资源化利用提供了一种新途径。     

茶叶副产物开发利用提高茶园经济效益

我国年产茶叶已达到56万多t,茶叶在生产过程中,茶叶的副产物也相当可观.据调查,生产1吨红茶约有30～50kg的茶灰、筋毛、梗朴等副产物;生产1吨绿茶或其它茶类,有20～30kg的副产物.据此测算,目前,我国每年茶叶加工中的副产物至少在1.6万t以上;茶树更新修剪下来的枝叶等有数万t之多;全国已开花结果的茶园约为80万hm2,茶籽年产量也有8～10万多t;此外,还有大量的低档粗老茶叶.因此,综合开发利用茶叶副产物,不仅可提高茶叶生产的经济效益,而且可以丰富人民的生活.现将茶及其副产物开发利用情况作一简要的综述.     

不同品种枣树对大气氟污染的抗性研究

为探明不同品种的枣树对大气氟污染的抗性差异,选用4个红枣品种为材料,比较了枣园自然发病和人工诱导两种条件下枣树对氟的抗性指数差异。研充结果表明,不同枣树品种抗性存在明显差异,无论是在污染区、清洁对照区还是诱导区,只要大气氟含量超标,4个品种抗性从强到弱均为：赞皇大枣〉木枣〉郎枣〉壶瓶枣。对枣果果肉、果皮和叶片的氟含量进行测定,结果显示同一处理区同一品种枣组织氟含量为叶片〉果皮〉果肉,同一处理区内品种间氟含量为赞皇大枣〉木枣〉郎枣〉壶瓶枣,不同处理区比较则是污染区〉诱导区〉清洁区。     

济源市农产品质检体系实验室建设的研究

一、实验室现状 济源市农产品质量检测中心实验室面积1200余m^2,先后配备了气质联用仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度计、液相色谱仪等国内外先进检测仪器和前处理设备110余台（件）价值500余万元。2006年,先后通过了河南省质量技术监督局的计量认证和河南省农业厅的机构认可,是农业部无公害农产品产地环境认定定点检测机构和无公害农产品认证定点检测机构,是河南省农产品质量安全例行监测的承担单位。     

兰州百合叶片快速繁殖体系的建立

本实验以兰州百合叶片为外植体,在相同的培养条件下,通过比较不同激素的浓度配比对外植体进行芽诱导及生根诱导效果,选择适合兰州百合快速繁殖的最佳体系,为兰州百合大规模生产提供技术支持。研究结果表明：MS＋6-BA1．0mg/L＋NAA0．5mg／L为诱导芽的最佳培养基,诱导丛生芽增殖的最佳培养基是：Ms＋6-BA1．0mg/L＋NAA0．2mg／L,I／2MS＋IBA0．1ms／L诱导生根效果最好。