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羊口疮(ORF)的快速诊断对于该病的防控至关重要,而环介导等温扩增(LAMP)技术可以满足对羊口疮病毒(ORFV)高效性的现场检测需求。本试验对ORFVVIR基因扩增,通过优化反应条件,对LAMP检测ORFV进行了显色反应、特异性和灵敏性的检测,并进行了后续的临床检测。结果显示,利用优化的LAMP染色法,将呈现绿色的阳性组与橙色的阴性组区分开。对扩增的质粒和阳性对照样品的检测呈现出了阳性条带,而对山羊痘、绵羊痘、牛传染性鼻气管炎和牛副流感3型病毒的检测并无阳性条带。优化的LAMP检测ORFV的灵敏度比传统PCR高出1 000倍。对15份临床样品检测的结果表明,优化的LAMP电泳和染色法对ORFV的检出率均为100%,与传统PCR检测结果相一致。上述结果表明优化的LAMP对ORFV的检测具有特异性、高灵敏性且更加方便等优点,从而更适用于现场的高效检测。 相似文献
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试验以2株乳杆菌MG2 1、L casei zhang按不同剂量分别饲喂小鼠,在5,10,15,20,25,30天测定其血清中IgG及肠道内SIgA含量。结果表明:饲喂不同剂量2株菌的乳悬液均能极显著地提高IgG、SIgA的含量(P<0.01)。在提高IgG含量方面,2菌株均表现出低、中剂量饲喂组随着饲喂时间的不断增加,有超过高剂量组的趋势。在第25天时,菌株MG2 1中剂量组极显著地高于高剂量组;L casei zhang低剂量组极显著地高于中、高剂量组。而SIgA高剂量组比低、中剂量组高。 相似文献
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鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白(OMP)作为抗原,制备免疫激发复合物型(Immunostimulating Complex,ISCOM)亚单位疫苗。ISCOM型OMP亚单位疫苗在电镜下可笼型颗粒结构,直径为60mm-120nm。无菌性检测结果为无菌,具有可靠的安全性。对3周龄雏鸡肌注接种,6周龄攻毒,接种80ugOMP/只ISCOM型亚单位疫苗的雏鸡以鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。 相似文献
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应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据国外报道的鸡传染性支气管炎病(IBV)Gray株的纤突蛋白(S1)核苷酸序列,自行设计合成了S1蛋白主要抗原决定簇基因两侧的1对引物,跨幅为1.0kb。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的3株IBV进行RNA提取,反转录后PCR,经琼脂糖凝胶电泳结果表明,3株毒株均获得了与预期一致的PCR产物;此外,IBVPCR灵敏度的测定结果表明,PCR方法可检测出10pg的模板,PCR酶切结果为,HaeⅢ、TagⅠ酶对3株PCR产物均有1个酶切位点,而MsPⅠ酶无酶切位点 相似文献
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提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感(H5)亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫(ND)组和禽流感(AV)组首免,再分别于首免台2周加强免疫,在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明,与对照组相比,试验各组抗体水平达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.16~2^2.67。说明,2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感(H5)亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。 相似文献
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将内蒙古地区呼和浩特市和包头市获得的两株鸡新城疫病毒分离株纯化培养后,提取病毒RNA,用一步法RT—PCR扩增F基因,测出F基因的全部核苷酸序列为1662bp,编码554个氨基酸。与国内外发表的部分NDV病毒的核苷酸序列进行比较。结果表明,这两株分离株核苷酸同源性为97.5%,与标准毒株F48E9的同源性分别为86.8%和85.8%。与长春、广东、广西、山东、河北、浙江、韩国等地的NDV的同源性在96.3%-98.8%之间。并且这2株分离株F蛋白的裂解位点氨基酸组成为112R—R-Q—K—R—F117,具有典型的强毒株裂解位点的特点。 相似文献