羊口疮的实验室诊断及防控措施

羊口疮是一种严重危害养羊业的传染性疾病,其病原为羊口疮病毒(ORFV),主要感染动物的口唇、鼻孔、眼部及周围皮肤,出现丘疹和脓疱,易对幼龄动物吸吮乳汁和成年动物采食造成一定的影响。该病一年四季均可发生,在春夏季节尤为严重,传播速度快、范围广,在世界各地广泛流行,常给养羊业造成巨大的损失。对羊口疮的病原学、流行病学、临床症状、实验室诊断及防治措施等方面进行综述,以期为羊口疮的防控提供理论依据。     

内蒙古地区部分奶牛场副结核病的血清学调查

采用ELISA检测方法对内蒙古地区17个奶牛场的2 391头奶牛进行牛副结核血清学检测。结果表明,大型奶牛场副结核的血清阳性率较低,在0~5%之间;小型奶牛场的副结核血清阳性率较高,平均阳性率为14.1%。调查结果提示,内蒙古地区奶牛场存在牛副结核病的流行,对该病的防控工作应给予高度重视。     

羊口疮病毒强弱毒株免疫相关基因的比较分析

通过对采集到的青岛市某发病羊场羊口疮病料（强毒）在山羊成纤维细胞上连续传90代（弱毒）后, 分别进行病毒基因组提取, 并对提取到的基因组分别命名为ORFV-QD和ORFV-RD。根据GenBank上发表的ORFV全基因组序列设计并合成3对特异性引物, 分别扩增ORFV-QD和ORFV-RD的B2L基因、F1L基因和VIR基因片段, 并将扩增得到的基因组片段分别克隆到pMD-19T载体上, 转化到DH5α感受态细胞中, 对重组质粒进行鉴定后送至测序公司进行测序, 用DNASTAR软件对测序结果进行拼接及3组基因之间核苷酸同源性比较分析, 将测序结果与NCBI上已公布的13组ORFV全基因组相应基因核苷酸序列进行同源性比对分析、构建系统进化树及氨基酸序列比对分析。结果表明, 3组基因与参考序列的B2L基因、F1L基因和VIR基因核苷酸同源性分别为92.1%~98.4%、96.1%~99.1%和94.6%~100%。将2株病毒基因组与参考序列进行氨基酸序列比较分析, 结果显示2株病毒基因组之间并没有较为明显的差异。     

鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆杭体的制备

本试验利用纯化的鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus , DTMUV)奉贤株(FX2010)免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得3株能够稳定分泌杭DTMUV的杂交瘤细胞,分别命名为:J1-E5-E4, 7B5和1E5-B6,3株杂交瘤细胞诱导同品系刁、鼠的杭体效价为1:12 800,1:6 400和1:25 600。间接ELISA和IFA结果显示,3株单杭均可以与DTMUV发生特异性反应。进一步研究发现,J1-E5-E4可以与DTMUV-E蛋白结合,使得表达E蛋白的293T细胞显现出特异性的绿色荧光;在病毒中和试验中,J1-E5-E4可以中和DTMUV,使其失去致死鸡胚的能力。这些结果表明,J1-E5-E4是一株针对DTMUV-E蛋白中和表位的单杭,该单杭将在DTMUV诊断和杭原分析中发挥重要作用。     

两株乳酸杆菌对鸡新城疫HI抗体效价影响的研究

本研究利用两株乳酸杆菌L.casei.zhang和MG2-1制成乳酸菌液和发酵乳,以不同的剂量灌服给雏鸡,在10日龄和28日龄进行两次新城疫疫苗（Ⅳ系）滴鼻点眼免疫,在二免后的第7d和14d检测血凝抑制效价.结果表明,与对照组相比,试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平0.61～1.77（log2）.由于菌株、剂量等的差异,各试验组在提高抗体水平上也有所不同.两株乳酸杆菌制成乳酸菌液和发酵乳对雏鸡免疫机能均有促进作用.     

内蒙古地区鸡沙门氏菌病流行病学调查

对内蒙古呼和浩特、包头、集宁、丰镇、东胜、临河、赤峰、通辽8个地区的27个养殖场随机采取血清样品共12824份,采用平板凝集试验,进行鸡白痢、鸡伤寒抗体检测。结果表明:父母代蛋种鸡平均阳性率为20.66%,最高达46.25%,最低为1.33%;商品蛋鸡平均阳性率为47%,最高达70%,最低为32.5%;父母代肉种鸡平均阳性率为12.66%,最高达38%,最低为1.08%;商品肉种鸡平均阳性率为72.9%,最高达92.5%,最低为51.67%。     

传染性法氏囊病病毒细胞培养的研究

将由内蒙古地区分离到的J、W、H和Z 4个IBDV株经鸡胚传5代适应后.在CEF、Vero和RK_(_13)细胞上传代.J、W和H毒株能在CEF、Vero和RK_(_13)细胞上适应,并具有明显致细胞病变;Z毒株不易在上述三种细胞中增殖.     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及鉴定

本试验从天津某鸡场、呼和浩特市两个鸡场发病鸡群分离到３个肾型ＩＢＶ毒株，分别命名为Ｔ、Ｈ、Ｗ株，并对其培养特性、形态特性、血凝性、致病性、对新城疫病毒的干扰性等方面进行研究。结果表明，３个毒株很快适应于鸡胚，引起鸡胚出血、萎缩、绒毛尿囊膜增厚；３个毒株也适应于鸡胚肾、肺细胞，适应性有差异；病毒增殖后制负染样品，在电镜下观察，可看到直径约１００ｎｍ左右，病毒囊膜外有疏松刺突的冠状病毒。用接毒的肾、肺细胞制成超薄切片后电镜下观察，可看到胞浆内的典型的ＩＢＶ；分离株对鸡的红细胞无凝集性，但用１％胰酶处理后表现不同程度的血凝性；３个分离株均能抑制鸡新城疫病毒Ｂ＿１株在鸡胚中繁殖；分离株回归４２日龄雏鸡后从第３天开始发病，发病率为１００％，病死率为６０－９０％。