猪体细胞胞质注射核移植研究

首例体细胞克隆动物“多利”羊诞生以来,各种体细胞核移植动物相继成功克隆,但其克隆效率很低（低于10％）以及大都表现出不同程度的器官衰竭或发育畸形等。猪体细胞核移植在异种器官移植和克隆性治疗上具有重大意义,但其克隆效率更低（1%-2％）。利用胞质注射技术对比不同供核细胞、是否经血清饥饿和不同时间段激活对重构胚发育的影响,在其重构胚卵裂率上,试验结果表明：颗粒细胞与胎儿成纤维细胞无显著差异（43．37％,45．98％;P〉0．05）;血清饥饿与否无显著差异（45．61％。50．71％;P〉0．05）;在核移植后1-3h和3-5h激活显著高于立即激活（51．82％,56．98％。8．51％;P〈0．05）。     

陕北白绒山羊屠宰性能和器官发育的研究

通过测定不同月龄陕北白绒山羊羯羊屠宰性能及器官发育各项指标,为评价陕北白绒山羊产肉性能及明确其适宜屠宰月龄提供理论依据。试验选择农户饲养条件下不同月龄（分别为6、8、10和12月龄）陕北白绒山羊羯羊进行屠宰性能及器官发育的研究。结果表明：（1）试验羊10 月龄的屠宰率和净肉率最高。除屠宰率、净肉率和内脂率外,其他指标均随月龄的增加而增加。（2）试验羊10 和12 月龄瘤胃重显著大于6 和8 月龄(P<0.05),其他胃室重和肠重在各个月龄之间差异不显著(P>0.05)。各胃室及大小肠占宰前活重的比例均在6 月龄最高。从各胃室占复胃重的比例看,瘤胃比例最大,其次是皱胃,瓣胃比例最小,但在各月龄之间差异均不显著(P>0.05)。（3）试验羊内脏器官重量均随月龄的增加而增加,且在不同月龄间差异极显著或显著。10 和12 月龄肾脏占宰前活重比例显著小于6 月龄(P<0.05),其他指标在各个月龄之间差异不显著(P>0.05)。综上,说明陕北白绒山羊羯羊在10~12 月龄生长发育速度较快且产肉性能较好,因此得出在农户饲养条件下陕北白绒山羊羯羊在10月龄即可出栏屠宰。     

MSTN及FGF5基因编辑不改变绒山羊母羊同期发情能力

基因编辑动物是研究动物生产性状及基因功能的良好载体,目前关于各类基因编辑动物的研究广泛开展。然而,基因编辑动物繁殖性能方面是否与野生型个体具有明显差异则尚未见报道。本研究拟通过比较野生型绒山羊与MSTN、FGF5基因编辑绒山羊对同期发情处理的响应差异,确定其与野生型绒山羊同期发情效率的差异。以野生型和MSTN、FGF5基因编辑陕北白绒山羊为研究对象,在繁殖季节采用同种处理方式(CIDR + PG)对试验羊只进行处理,研究两类羊只在繁殖季节同期发情效率的差异。结果表明,野生型绒处理后同期发情率为100%,基因编辑绒山羊处理后同期发情率也为100%,两组无差异;比较MSTN和FGF5基因编辑的羊只在处理后同期发情效率的差异,发现两组无差异,与野生型绒山羊相比同样无差异。本研究结果证实了MSTN及FGF5基因编辑后不影响母羊的繁殖性能,为基因编辑动物的推广应用提供了试验基础。     

不同禾本科牧草种子萌发特性的比较研究

通过系统比较陕北农牧交错区11种引进禾本科牧草种子的萌发特性,以期为有效开展优质牧草品种筛选与评价提供理论依据。结果表明：不同禾本科牧草种子的发芽指标和幼苗指标均存在显著差异,高丹草种子的田间发芽率、室内发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数显著最高,披碱草种子的田间发芽率、室内发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数显著最低;苏丹草幼苗鲜重、根长、芽长和根芽比均显著高于其他牧草幼苗;不同牧草种子室内发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、幼苗鲜重和根长两两之间均存在显著的正相关关系;隶属函数分析表明综合排序前3位的牧草品种为苏丹草、高丹草和多年生黑麦草。综上表明苏丹草、高丹草和多年生黑麦草较适宜于在陕北农牧交错区进行推广种植。     

我国绒山羊产业现状分析及发展趋势探讨

山羊在动物学分类上属于偶蹄目、牛科(洞角科)、羊亚科、山羊属,具有适应性强、品种丰富、分布广泛的特点。作为山羊的重要组成类型之一,绒山羊是我国独特的生物资源,在经过了长期的科研选育后,我国拥有了世界上产绒量高和绒纤维品质好的品种。绒山羊产业是我国畜牧业中的一项重要产业,其主要产品山羊绒和山羊肉可为我国的经济发展提供有力支撑,有着良好的发展前景。近年来,随着国内外绒山羊遗传育种研究的推进,绒山羊在产绒、繁殖、生长等多个重要经济性状上得到不断地改进和提升。再加上我国相关政策的扶持及国民对优质畜产品的迫切需要,使得绒山羊产业迎来新的发展机遇。为此,本文应用大数据和数据库分析等方法对绒山羊产业的现状,品种分布,产业概述以及未来发展方向等进行了概述。     

内蒙古绒山羊KAP6.2基因多态性与生长性状和绒细度性状的关联分析

为探讨角蛋白关联蛋白6.2(keratin-associated protein 6.2, KAP6.2)基因遗传多态性与内蒙古绒山羊生长性状和绒细度性状的相关性,以期为内蒙古绒山羊遗传育种改良提供理论依据,本研究采集598只雌性内蒙古绒山羊耳组织,提取基因组DNA并进行PCR扩增,检测KAP6.2基因的插入/缺失(Insertion/Deletion, InDel)突变,分析突变位点与生长性状和绒细度性状的相关性。结果显示,在育成羊中,该突变位点与胸围和十字部显著相关(P<0.05),与体长、胸宽和胸深极显著相关(P<0.01);在成年羊中,该突变位点与胸宽显著相关(P<0.05),与胸围、十字部高和胸深极显著相关(P<0.01);在育成羊和成年羊全部群体中,该突变位点与体长、胸围、十字部高、胸深和胸宽极显著相关(P<0.01),与绒细度显著相关(P<0.05)。上述结果提示,KAP6.2基因外显子区24 bp InDel突变位点与内蒙古绒山羊部分生长性状显著或极显著相关,与绒细度显著相关,可作为内蒙古绒山羊部分生长性状和绒细度性状选育的遗传标记,...     

家兔角膜缘干细胞缺失病理模型的制作

根据角膜缘干细胞定位于角膜缘上皮基底层,为角膜上皮增殖分化的源泉并保持角膜上皮完整性的理论。将20只家兔随机分为4组,每组5只,分别将角膜缘上皮全周或半周板层手术切除,或用1mol/LNaOH直接擦除等方法破坏角膜缘干细胞,探索制作角膜缘干细胞完全缺失病理模型的有效途径。结果表明,处理后4周,全周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮层用1mol/LNaOH擦除的5只试验家兔角膜表面全部血管化、结膜化,未发生睑球粘连,角膜基质胶原纤维完整未见溃疡、穿孔等病变,细胞印迹学检查为结膜表型,可作为实验性角膜缘干细胞移植的病理模型;全周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮用生理盐水擦除的5只试验家兔,有2只为结膜表型,另3只为角膜表型,观察期内结果不稳定;半周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮层用生理盐水擦除的5只试验家兔,角膜表面透明,全部为角膜表型;直接用1mol/LNaOH擦除角膜缘和中央角膜上皮的试验家兔,有4只角膜基质胶原纤维断裂、溶解,并伴有严重的溃疡、穿孔、睑球粘连等病变,不能用于移植试验,另1只角膜表面透明,未见结膜和新生血管长入,细胞印迹学检查为角膜表型。     

内蒙古绒山羊KAP9.2基因遗传多态性及其与生长性状的关联分析

【目的】 探究内蒙古绒山羊KAP基因家族角蛋白相关蛋白9.2（KAP9.2）基因插入/缺失（insertion/deletion,InDel）突变及其与生长性状的关系,以期为内蒙古绒山羊分子育种提供理论基础。【方法】 选取606只雌性阿拉善型内蒙古绒山羊为研究对象,采集耳组织提取DNA并测定其体重及体高、体长和胸围等体尺数据,利用琼脂糖凝胶电泳方法与直接测序技术检测KAP9.2基因的InDel突变,检测遗传多样性指标,利用SPSS 23.0软件分析突变位点与生长性状的关联性。【结果】 在内蒙古绒山羊KAP9.2基因外显子区存在30 bp的InDel突变,产生II、ID和DD 3种基因型。多态信息含量（PIC）显示,该位点在育成羊群体中属于中度多态（0.25<PIC<0.50）,在成年羊群体中属于低度多态（PIC<0.25）,且均处于哈代-温伯格平衡状态（P>0.05）;在整个群体中,属于低度多态（PIC<0.25）,但偏离哈代-温伯格平衡状态（P<0.05）。关联分析结果表明,在育成羊群体中,此30 bp的InDel突变对体长和十字部高有显著影响（P<0.05）,对体高、胸深和胸宽有极显著影响（P<0.01）;在成年羊群体中,此突变对管围、胸深和胸宽有极显著影响（P<0.01）。进一步的分析发现,在育成羊和成年羊全部群体中,此突变对体长和十字部高有显著影响（P<0.05）,对体高、胸深和胸宽有极显著影响（P<0.01）。【结论】 KAP9.2基因InDel突变对阿拉善型内蒙古绒山羊多个生长性状有显著或极显著影响,可作为内蒙古绒山羊优良性状选育的分子标记。     

黄白双花口服液治疗犊牛腹泻的系统药理学分析

【目的】利用系统药理学构建黄白双花口服液治疗犊牛腹泻的活性化合物—靶点—通路—疾病相关蛋白的关系网络模型,阐述黄白双花口服液治疗犊牛腹泻的分子机制,为犊牛腹泻防治药物研发提供理论依据。【方法】根据口服利用度（OB）≥30%和类药性（DL）≥0.18,利用中药系统药理学数据库（TCMSP）检索黄白双花口服液中每味中药（黄连、白头翁、金银花、黄芩、地榆和乌梅）的活性化合物及与其相对应的作用靶点,导入Cytoscape绘图软件中建立活性化合物与其对应靶点的互作网络图;通过基因数据库（Gene Cards）检索犊牛腹泻的有关靶点基因,使用维恩图求取二者的交集,得到犊牛腹泻与黄白双花口服液共同的靶点基因组合,然后导入String数据库中以获得相关蛋白相互作用网络图;将黄白双花口服液作用于犊牛腹泻的靶点基因导入DAVID数据库中,分别进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。【结果】从黄白双花口服液中筛选出43种活性化合物,分别对应131个相关靶点基因。黄白双花口服液与犊牛腹泻交集的蛋白质—蛋白质相互作用网络图包括128个节点及205条相互关系,其中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、白介素2（IL-2）、白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、促分裂素原活化蛋白激酶1（MAPK1）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3（CASP3）的出现频率较高。利用DAVID数据库对黄白双花口服液与犊牛腹泻交集靶点的蛋白进行GO功能富集分析,最终富集到204条GO功能条目（FDR< 10-2）,其中细胞组成条目8条、分子功能条目12条、生物过程条目184条;黄白双花口服液治疗犊牛腹泻的相关蛋白主要富集于19条信号通路上（FDR< 10-2）。【结论】黄白双花口服液主要以黄连、白头翁、金银花、黄芩、地榆和乌梅中的槲皮素、β-谷甾醇、豆甾醇及山奈酚等活性化合物成分,通过ATK1、MAPK1、IL-2、IL-6和IL-8等靶点,经Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、T细胞受体信号通路和B细胞受体信号通路等,发挥抗菌消炎、抑制细胞损伤及调节免疫力等作用,以达到治疗犊牛腹泻的目的。     

空怀期陕北白绒山羊的能量需要量

本试验旨在研究空怀期陕北白绒山羊母羊对能量的适宜需要量。选择1.5岁陕北白绒山羊母羊24只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只羊。控制各组试羊粗蛋白质摄入量一致(实测值为74.0 g/d),测得各组消化能摄入量分别为7.6、8.3、8.9和9.6 MJ/d,进行为期40 d的饲养试验(前10天为预试期);饲养试验结束后,每组选择3只羊进行为期7 d的消化代谢试验。结果表明:空怀母羊对4种饲粮总能的消化率和代谢率分别为(65.3±3.23)%和(54.7±3.16)%。空怀期母羊平均日增重随能量摄入量增加呈线性增长。空怀母羊消化能和代谢能需要量分别为DE(MJ/d)=0.507 0W0.75+0.026 3 ADG和ME(MJ/d)=0.413 0W0.75+0.024 5 ADG(式中DE为消化能,W0.75为代谢体重,ADG为平均日增重,ME为代谢能)。综合得出,空怀期陕北白绒山羊饲粮中消化能和代谢能分别以9.17～10.14 MJ/kg和7.70～8.60 MJ/kg(风干基础)较为适宜。