艾滋来了?

公元1348年到公元1352年间,黑死病把欧洲变成人间地狱,断送了欧洲三分之一的人口,总计约2500万人;18世纪,欧洲蔓延天花,死亡人数高达1亿5千万人以上;19世纪,不知有多少人被肺结核夺去了亲人或朋友;……     

一个乞者的尊严和梦想

“I have a dream！”一个纯正的英式英语发音。 “I have a……dream! Ihave a……dream”一个带着浓重安徽口音的发音。[第一段]     

进境木质包装松材线虫抽样准确性的探讨

深圳局 2 0 0 0年从进境木质包装上截获松材线虫 1 2批次 ,其中日本 8批次 ,美国 3批次 ,香港 1批次。深圳局 2 0 0 1年从进境木质包装上截获松材线虫 89批次 ,其中美国54批次 ,日本 3 5批次。经过不断探索和创新 ,我们总结出一套适合深圳口岸进境木质包装松材线虫的抽样方法 ,     

新型鸭呼肠孤病毒σB蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

为制备新型鸭呼肠孤病毒（new-type duck reovirus,NDRV）XX株σB蛋白的多克隆抗体,试验经RT-PCR扩增NDRV XX株σB基因编码序列,构建原核表达质粒pET-32a（+）-σB,将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞后,经IPTG诱导获得His-σB重组蛋白。SDS-PAGE显示成功表达出约55 ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,其表达时的最佳诱导时间、IPTG诱导浓度分别为3 h和0.25 mmol/L。经Ni²⁺柱亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,将蛋白经Western blotting和蛋白质谱鉴定为高纯度的σB重组蛋白,将纯化后σB重组蛋白按合理免疫程序免疫家兔,获得多抗隆抗体经Western blotting分析显示出特异性的反应。本试验结果为NDRV σB蛋白功能的深入研究及基因工程疫苗的研发奠定了基础。     

响应面法优化斑点叉尾(鮰)鱼皮胶原蛋白的热水法提取工艺

以斑点叉尾(鮰)(Ietalurus punetaus)鱼皮为原料,采用响应面法对胶原蛋白热水法提取工艺进行优化.在单因素试验的基础上,使用Design-Expert软件对提取温度、提取pH与料液比进行三因素响应面试验,以胶原蛋白得率为响应值优化热水法提取条件,并验证响应面预测值与实测值的一致性.胶原蛋白最佳提取工艺条件为提取温度100℃、提取pH为6、料液比1∶10(g∶mL),胶原蛋白得率为16.98％.实测值与响应面预测值拟合良好,说明通过响应面试验设计对热水法提取胶原蛋白的优化是有效的.     

温室草莓架式栽培病虫害绿色防控技术

正随着生活水平的提高,人们对安全绿色食品的需求日益增长,为此,笔者归纳总结了先进的草莓病虫害绿色防治技术,并整理了近4年的温室草莓架式栽培(图1)生产中的相关经验,形成了系统的温室草莓架式栽培病虫害绿色防控技术路线,和大家分享。绿色防控技术路线温室架式草莓病虫害绿色防控以"预防为主,防治结合"为方针,结合生态控制,应用生物防治、物理机械防治、农业防治以及化学防治等措施进行综合防控,技术路线如图2所示。     

浙西某地土壤重金属特征分析及风险安全评价

以浙西某地的表层土壤为研究对象,采用地统计学方法和相关性分析对土壤重金属特征进行研究,利用潜在生态风险指数开展土壤污染风险评价,最终对研究区农用地表层土壤重金属元素进行安全评估。结果表明,研究区表层土壤中Cd、Hg、Pb、Zn具有强烈的空间相关性,而Cr、Ni、As、Cu具有中等空间相关性。Cd-Pb-Zn、Cr-Ni等2类元素组合具有同源性特征,而其他元素不具有明显的自然伴生关系;土壤pH值与各重金属元素之间不存在明显的相关性。土壤重金属单项生态风险指数表现为HgCdAsPbCuCrZnNi,综合潜在生态危害指数为126.57,生态风险处于轻微水平。区内大部分农用地属于优先保护类土地,安全利用类土地占研究区面积的31.15%,严格管控类土地仅占研究区面积的4.23%。     

植物青枯菌LAMP检测方法的建立

【目的】由茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum,简称青枯菌）引起的青枯病（bacterial wilt of plants）是世界范围内危害最为严重的土传细菌病害之一,严重制约了多种经济作物的生产。建立高效、精准的早期诊断技术,是实现青枯病有效防控的基础。论文旨在建立一种能够特异检测青枯菌的环介导等温扩增方法（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）,实现青枯菌的田间快速检测。【方法】通过比对分析青枯菌的lpxC基因序列,并利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0得到4条LAMP特异性引物,F3（5′- CCTGTACGTGGTCGGCTAT-3′）、B3（5′-ACCGCAACACGGGATCA-3′）、FIP（5′-TACGCCGTTTCATCGGCCAGGTACACGGCGCACAAGT -3′）、BIP（5′-ATCGTCACGTTCGACAAGGTGGAATGCCGGCTGCAACTG-3′）。通过单因素变化试验对LAMP反应体系中的各参数进行优化,设置反应温度为60、61、62、63、64、65℃,设置镁离子浓度为2、4、6、8、10、12 mmol·L^-1,设置内外引物浓度比为2﹕1、4﹕1、6﹕1、8﹕1、10﹕1、12﹕1,确定最优反应体系。以分离自不同寄主的24个青枯菌株为参试对象,5个非青枯菌株（Ralstonia mannitolilytica、Ralstonia pickettii、Enterobacter sp.、Acidovorax citrulli、Burkhoderia cepacia）为对照,验证LAMP检测方法的特异性。将青枯菌GMI1000菌株的基因组DNA进行10倍梯度系列稀释,以原液和10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷倍的稀释液为模板同步进行LAMP和普通PCR检测,比较两者的检测灵敏度。将马铃薯青枯病菌株Po41、姜青枯病菌株Z-Aq-1分别与马铃薯块茎和生姜根茎组织悬浮液混合,以LAMP检测方法对混合物进行检测,并以同样方法对表现典型萎蔫症状的人工接种番茄植株和健康植株以及田间马铃薯罹病块茎样品进行检测。反应结果直接通过观察产生的白色焦磷酸镁沉淀情况进行判定,或通过加入1 μL SYBR GreenⅠ荧光染料进行观察,阳性样品为绿色,阴性样品为橙色。【结果】建立了特异性检测青枯菌的LAMP方法,优化后确立了检测体系中FIP/BIP与F3/B3的浓度比为8﹕1（1.6﹕0.2 μmol·L^-1）,镁离子浓度为6 mmol·L^-1,反应温度为63℃。特异性检测结果显示,仅参试青枯菌反应管中的反应液呈现绿色,表明建立的检测体系具有高度特异性。以青枯菌GMI1000菌株的DNA原液及不同梯度的稀释液为模板进行的LAMP和普通PCR检测结果显示,LAMP的检测灵敏度为1.42 pg,比普通PCR高10倍。能够快速准确地从植物组织悬浮液、罹病番茄植物组织及田间罹病样品中检测到青枯菌。【结论】建立的青枯菌LAMP检测方法,高效特异,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果,适合基层和现场检测。