应用免疫印迹法检测异尖线虫病人及实验动物血清中的抗体

本实验应用简单异尖线虫幼虫制备的全虫抗原及分泌－代谢抗原，以免疫印迹法检测异尖线虫病人血清及人工感染实验动物血清中的抗体。在７份病人阳性血清及重复经口感染异尖线虫幼虫的大鼠血清中，均查出识别Ｐ４６蛋白成分的特异抗体。而在２５份蠕虫病人血清中（包括蛔虫病、犬弓蛔虫病、丝虫病、旋毛虫病、肝片吸虫病等）未出现此特异抗体。Ｐ４６抗原成分显然是异尖线虫病的特异抗原成分。免疫印迹法用来诊断慢性异尖线虫病是一种特异性较强的方法。     

免疫印迹分析试验感染肝片吸虫和大片吸虫绵羊的IgG应答

免疫印迹(Westernblot)分析试验感染肝片吸虫和大片吸虫绵羊的抗片形吸虫分泌捧泄产物(FhESP和FgESP)IgG应答，结果表明，FhESP中分子质量在17．1～21．6ku之间的4条主要蛋白带仅被肝片吸虫感染以后(0WPI以后)的血清识别且不被对照组血清识别；FgESP中分子质量在19．0～71．1ku之间的6条主要蛋白带仅被大片吸虫感染以后(0WPI以后)的血清识别且不被对照组血清识别。     

罗非鱼海豚链球菌16srRNA基因的序列测定和系统进化分析

为了从分子水平上对～株来源于发病罗非鱼的链球菌进行分类学鉴定，本研究利用原核生物16srRNA基因通用引物对该菌株进行了16srRNA基因的克隆及序列分析。结果扩增出长约1．5kbp目的片段，测序得到一条长度为1447bp核苷酸序列。核苷酸同源性分析表明，该序列与NCBI公布的海豚链球菌（Streptococcus iniae，s．iniae）SCCF5L菌株16srRNA基因核苷酸序列同源性最高（99．496），暂称为中国广西株（S．iniae-CGX）。同时，亲源关系较近的S．iniae、S．difficile和S，agalaciate代表菌株构建的系统发育进化树显示，该菌株与S．iniae代表菌株组成同一进化分支，与s．agalaciate代表菌株组成的另一进化分支距离较近（95．596），而与S．difficile代表菌株组成的进化分支距离较远（92．3％）。本研究证实，从发病罗非鱼脑组织分离得到的致病性链球菌为海豚链球菌。     

酶切图谱及序列分析虫体ITS2鉴别中国的片形吸虫

提取我国广西、四川、黑龙江、甘肃等地及法国的片形吸虫的总DNA,用PCR扩增完整的ITS-2.对得到的PCR产物用限制性内切酶Hsp 92Ⅱ,Rca I进行酶切和RFLP技术分析.并对ITS-2 PCR产物进行双向测序.以便确定国内片形吸虫种内及种间ITS-2的特点和序列变异的水平.结果显示:广西、四川、黑龙江、法国等地的样品通过PCR均扩增到约550 bp的ITS-2目标片段.Hsp92Ⅱ,Rcal可区别不同种的片形吸虫.对PCR产物的序列分析结果表明片形吸虫ITS-2全长均为362 bp,同种内ITS-2序列无变异,不同种间ITS-2序列存在5～6个碱基差异,变异率约为2.8%.对各地区片形吸虫ITS-2的PCR RFLP分析与对PCR产物的DNA序列分析一致证明,来自四川的样品和法国样品同属肝片形吸虫F.hepattca;广西样品属大片形吸虫F.gigantica;黑龙江的样品为中间型片形吸虫.本研究首次从分子水平上证实我国除有肝片形吸虫、大片形吸虫外,还存在中间型的片形吸虫.     

国产磷酸左旋咪唑对猪消化道线虫的驱虫效果和毒性试验

业已证明,左旋咪唑(Levamisole)是畜禽寄生线虫的一种广谱驱虫药,国内外大量报道的均为盐酸左旋咪唑(Levamisole hydrochloride)。磷酸左旋咪唑(Levamisole phosphate)注射液为近年来上市的新药,多用于牛羊驱虫,对猪注射驱虫和毒性尚未见公开报道。我们受桂林制药厂的委托,对该厂新近研制合成的磷酸左旋咪唑进行鉴定试验,本文系鉴定试验项目的一部分,现将试验结果整理报告如下:     

肝片吸虫病（fasciolasis）免疫学研究综述

肝片吸虫作为外来入侵的生物体，必然遭到宿主体内防御系统的抵抗，同时寄生虫在长期进化过程中也发展了破坏或逃避宿主免疫攻击的自我保护功能。研究双方的关系和其中的机制有助于新药及疫苗的研制和防制战略的制定。一般认为羊对肝片吸虫是敏感动物，而牛首次感染后表现有一定的抗力，但从未有完全免疫现象出现。肝片吸虫病的免疫表现为宿主对已定居的成虫无排斥，而对新感染的童虫有一定的抑制作用，因此是属于带虫免疫。肝片吸虫病免疫机制的研究用试验动物大鼠、兔或羊人工感染肝片吸虫，都能激发出各种程度的细胞免疫反应及体液免疫反…     

大片吸虫感染水牛对宿主增重影响的初步研究

试验初步研究大片吸虫感染水牛对宿主增重影响。 1 0头 1 0 -1 2月龄本地与摩拉或尼里杂交一代水牛分为A、B两组 ,A组 5头作对照 ,B组5头每头经口感染 2 5 0个大片吸虫囊蚴。感染前和感染后每月称重一次。从感染后第 1 0 -1 9周检查大片吸虫虫卵。结果表明 ,水牛感染大片吸虫后第 1 4周检出虫卵。对照组水牛从感染后第0 -4个月的平均增重分别为 0 0 ,2 2 6,40 6,5 1 8和 72 6;感染组水牛的同期增重为 0 0 ,1 4 6,2 7 0 ,3 5 2和 5 2 6千克 ;感染组的增重从感染后第 2个月开始至感染后第 4个月 ,两组的增重有显著性差异 (P 0 0 5 )。     

<广西壮族自治区畜禽寄生虫名录>补遗与修订(Ⅲ)

本文是《广西壮族自治区畜禽寄生虫名录》补遗与修订（Ⅲ）,收载了广西畜禽体内外寄生虫共计518种,隶属于7门,10纲,25目。它们包括：鞭毛虫2科,2属,2种,;类锥体虫2科,4属,46种;无类锥体虫2科,2属,4种;纤毛虫1科,1属,1种;吸虫16科,38属,95种;绦虫6科,24属,42种;线虫30科,64属,136种,棘头虫3科,3属,5种;蜱螨7科,13属,25种;昆虫19科,38属,162种。     

斑点叉尾鮰肠败血症病原菌的分离与鉴定

近两年来，一种严重的传染性疾病在广西斑点叉尾鮰养殖业中流行，造成鱼苗100％死亡；咸鱼的损失也高达30％～80％不等。为了确定该病病原，本试验对患病斑点叉尾鮰脑、肝脏、脾脏和肾脏组织进行了细菌的分离、鉴定及致病性试验。结果从南宁和合浦两地分离到NN和HP两株G短杆菌，人工感染试验表明，腹腔注射感染可引起健康斑点叉尾鮰100％死亡，浸泡感染可引起30％-55％死亡，并且感染发病的斑点叉尾鮰症状与自然发病症状相似。两株细菌的形态特征、培养特性和生理生化反应指标均与国外报道的鮰爱德华氏菌参考菌株（JCM1680）相同；两株细菌的16SrRNA基因序列与JCM1680菌株16s rRNA基因序列同源性均为99．3％。以上研究证实，NN和HP两株细菌为致病性鮰爱德华氏菌，其引起的传染性疾病为斑点叉尾鮰肠败血症。本研究首次对国内斑点叉尾鮰肠败血症进行病原菌的分离和鉴定，证实了斑点叉尾鮰肠败血症在广西斑点叉尾鮰养殖业中的流行及造成严重经济损失，对国内该病的控制及斑点叉尾鮰健康养殖具有重要的指导意义。     

重组tHsp70对罗非鱼腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

利用酵母分泌表达的重组罗非鱼热休克蛋白70(heat shock protein 70 of tilapia,tHsp70),与海豚链球菌(Streptococcus iniae)抗原在体外非共价结合形成tHsp70-抗原复合物,通过对体外培养的腹腔巨噬细胞NO释放水平、吞噬活性及免疫相关基因表达进行检测,研究tHsp70对罗非鱼细胞免疫功能的影响。结果显示,tHsp70在体外能够与海豚链球菌菌体、胞外分泌物(extracellular bacteria products,ECP)结合形成tHsp70-抗原复合物;tHsp70-抗原复合物和tHsp70均可显著增强罗非鱼腹腔巨噬细胞的贴壁和生长、NO释放及吞噬活性(P<0.01),而ECP单独作用可引起腹腔巨噬细胞死亡,显著降低腹腔巨噬细胞NO释放(P<0.05),但tHsp70与ECP体外非共价结合后可减轻ECP对巨噬细胞的损伤;tHsp70-抗原复合物和tHsp70作用于腹腔巨噬细胞,白细胞介素8(IL-8),热休克蛋白70(HSP70),CXC趋化因子受体4(CXCR4)和颗粒蛋白前体(PGRN)4个基因的表达量均显著高于海豚链球菌抗原单独刺激和无刺激对照组(P<0.01)。研究表明tHsp70具有免疫增强和免疫佐剂的功能,为开发罗非鱼链球菌病Hsp70-肽疫苗提供了实验依据。