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用PCR方法扩增犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV) 貉分离株(PV/貉/CC/1/86)的VP2蛋白基因,并将其克隆入pMD18-T,命名为pTCPV,进行测序分析。结果除发现300G→S突变外,还发现32G→D突变。然后将PV/貉/CC/1/86 VP2蛋白基因克隆入真核表达载体pVAX1的CMV启动子的下游,构建了CPV核酸疫苗的真核表达质粒pVCPV。pVCPV转染BHK-21细胞能够表达CPV VP2蛋白,所表达的CPV VP2蛋白能够与抗CPV的阳性抗体发生特异性的抗原-抗体反应。用pVCPV免疫接种小鼠,用ELISA和微量中和试验检测免疫小鼠抗CPV抗体阳性,但是没有检测到抗CPV HI抗体; pVCPV免疫小鼠的脾淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显的增殖。结果表明, pVCPV免疫接种小鼠能够诱导机体产生抗CPV的特异性体液免疫和细胞免疫。 相似文献
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犬乙肝病毒S基因遗传变异研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用人乙肝诊断试剂盒,对检测出来的“三阳(HBsAg,HBeAg,抗-HBc)犬的乙肝病料进行了病毒分离和形态学鉴定,并以人乙肝病毒S基因两侧的保守区域作为模板,采用PCR方法扩增出犬乙肝病毒部分基因,序列分析结果,其核苷酸序列为1157bp,编码385个氨基酸,遗传变异分析结果表明,在S基因保守区内有27个编码氨基酸与人的不同,其中16个为性质相反或不同的氨基酸置换,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.5%和93.4%,系统发育进化树比较表明二者的遗传关系较远,揭示犬乙肝病毒与人乙型肝炎病毒S基因保守区之间存在很大差异;而与鸡,羊乙肝病毒S基因保守区序列相比较,遗传变异更大。 相似文献
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