斑鳢内脏白点病病原的分离鉴定

从患内脏白点病的斑鳢Channa maculata肝、脾、肾组织中分离并筛选出一株致病菌GC1,对该病菌的形态学及生理生化特性进行了测定,结果均符合舒氏气单胞菌Aeromonas schubertii的特性。以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,得到该菌的部分16S rRNA基因序列,长约1 502 bp。将所测序列与GenBank中序列进行Blast比对并构建系统进化树,结果表明,该序列与舒氏气单胞菌的同源性高达99%。人工感染试验证明,该菌株具有极强的致病力,LD50为104.5CFU/mL。29种药物筛选结果显示：该菌对菌必治、先锋必、头孢氨苄、头孢噻吩、先锋V、萘啶酸、四环素、氧氟沙星、氟罗沙星等18种药物高度敏感;对阿莫西林、红霉素、克拉霉素等7种药物中度敏感;对青霉素G、杆菌肽、苯唑青霉素等不敏感。     

倒刺鲃的人工饲养和疾病防治

倒刺鲃(spinibarbusdenticulatus)又名青竹鲤、竹柏鲤、红脸青竹，是珠江水系著名的优质经济鱼类。分类上属于鲤科、鲃亚科、倒刺鲃属。倒刺鲃个体大．生长快，肉质洁白鲜嫩，加上其色彩漂亮，很惹人喜欢。该鱼还具有食性杂，抗病力强．易养殖等优点，是一种很有推广价值的淡水养殖新品种。由于江河天然种苗十分缺乏．因此，一些水产研究单位和养殖场于数年前开展了倒刺鲃人工繁殖技术研究．其中珠江水产研究所已于2001年起连续3年取得了倒刺鲃人工繁殖成功，生产了一批鱼苗、鱼种供一些养殖者试养。同时．我们也进行了育苗和成鱼饲养试验。本文就笔者的试验心得，结合介绍个别同行的经验，供大家参考。     

草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析

在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列.该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性.为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达载体表达VP5重组蛋白,通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的NTPase活性.采用DNAstar软件预测M5基因编码蛋白的抗原性,综合蛋白亲水性、表面可及性与表面抗原性三项指标,预测编码蛋白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达86个,提示VP5蛋白具有较强的免疫原性.用重组蛋白VP5免疫健康草鱼,通过人工攻毒实验检测VP5蛋白的免疫保护作用.结果显示,VP5重组蛋白具有NTPase活性,且其NTPase活性依赖于Mg2+或Na+/K+,而Ca2+的存在可能抑制其活性;VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护.研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用.     

我国加州鲈的养殖现状和养殖技术(下)

(三)科学投喂1.投喂配合饲料加州鲈是肉食性鱼类,需经驯化才能使其摄食配合饲料,而且加州鲈对蛋白质要求较高,饲料中含粗蛋白需达到40%～50%。     

大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因序列分析及PCR快速检测方法的建立

为了早期快速诊断近年来流行于广东省养殖大口黑鲈(Micropterussalmoides)中的病毒性溃疡综合征,本研究用基因组步移的方法获得了大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouthbassulcerativesyndromevirus,LBUSV)主要衣壳蛋白(MCP)基因,该基因编码区全长1392bp。通过序列比较分析,在MCP基因内确定了一段241bp的特异性较强的片段作为靶序列,设计并合成引物,经过优化PCR反应条件,建立了可以快速检测大口黑鲈溃疡综合征病毒的PCR方法。实验表明,在PCR进行到30个循环反应时可以检测到的质粒最小浓度是104拷贝数/μL,相当于104个病毒粒子。利用该方法,从天然感染LBUSV的大口黑鲈脾脏组织DNA可扩增出241bp的片段,而健康大口黑鲈和感染了传染性脾肾坏死病毒样病毒的大口黑鲈脾脏组织则没有扩增条带。本研究建立的PCR检测方法具有检测快速、成本低、准确性高的特点,适用于大范围早期病害诊断的推广应用。     

大口黑鲈池塘养殖常见病害及其防治

大口黑鲈是我国重要的淡水养殖鱼类,但池塘养殖中大口黑鲈病害不断发生,常见病害主要为细菌性疾病、病毒性疾病和寄生虫病.对以上疾病的临床症状、病原及其特征、流行特性进行分析,提出针对当前大口黑鲈常见病害的有效防治技术和方法.     

加州鲈的常见病及防治

加州鲈鱼(Micropterus salmoides)又名大口黑鲈。1984年从国外引进。目前在我国南方部分地区迅速发展,其中广东省池塘养殖面积6000公顷。1992年鱼产量达1万多吨。该品种在名优鱼类养殖中占很重要位置。 近年,随着大面积推广养殖,一些鱼病严重危害生产养殖,本文就广东省内池塘、网箱养殖比较集中的地区流行的各种疾病及防治方法予以介绍,仅供有关鱼病工作者及养殖者参考。     

饲料中不同蛋白质及不同蛋白质含量对倒刺鲃鱼苗生长的影响

采用4种不同动、植物性蛋白质及其不同含量的饲料分别喂养4组倒刺鲃鱼苗别。试验结果：植物性蛋白质含量较高的饲料比含量较低的饲料更好促进鱼苗的生长；饲料中含有一定比例动物性蛋白质比不含动物性蛋白质会更好促进鱼苗的生长，并对有关问题进行了讨论。     

大口黑鲈溃疡综合征病毒TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立

根据大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,LBUSV)的甲基转移酶(MTase)基因核苷酸序列设计引物及TaqMan-MGB探针,优化荧光定量PCR反应条件和反应体系,建立了LBUSV的TaqManMGB探针荧光定量PCR检测方法.用含有MTase基...