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[目的]建立一种更优化的STO细胞冷冻保存方法.[方法]STO细胞传至第3代后,调节其浓度至2.09×105个/mL,开展冷冻保存试验.Ⅰ组将STO细胞置于4℃下平衡,1 h后转入-20℃下,12 h后将其转至液氮中保存;Ⅱ组将STO细胞装入已注入250 mL 95%乙醇的降温器后,立即转至-70℃下,12 h后再将其转至液氮中保存;Ⅲ组将STO细胞悬液于液氮面上方10 cm处平衡20 min,然后将其缓缓转至液氮中.同时,设Ⅳ组为对照组,即STO细胞不进行冷冻处理.在液氮中保存30 d后进行解冻,以STO细胞的回收率、存活率和生长情况为研究指标,通过MTT法进行STO细胞冻存效果评价.[结果]经冷冻处理后,3种方法STO细胞解冻后回收率和存活率均存在显著差异(P<0.05).Ⅱ组细胞解冻后细胞回收率低于Ⅰ组、高于Ⅲ组,但细胞存活率最高(84.91%).与Ⅰ组和Ⅲ组相比,Ⅱ组STO细胞冻存方法不仅能保证冷冻效果,而且可以回收更多的细胞.Ⅱ组STO细胞复苏后生长相对缓慢,但STO细胞经培养后可恢复至冷冻前的生长状态.Ⅰ组和Ⅱ组复苏后STO细胞的增殖速度较快,且增殖率基本相同,而Ⅲ组细胞的增殖速度较慢.[结论]Ⅱ组STO细胞于-70℃冰箱中平衡过夜,再转移至液氮中超低温冷冻是较为理想的保存方法. 相似文献
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试验将健康Wistar大鼠60只[体重:(250±20) g],雌雄各半,随机分为3组,每组20只.Ⅰ组:空白对照组,对试验大鼠仅进行假手术处理,从手术第二天开始灌服蒸馏水[4 ml/(d·只)];Ⅱ组:给药试验组,对大鼠造成实验性骨折,从手术第二天开始灌服接骨中药浓缩液[4 ml/(d·只)];Ⅲ组:骨折模型(阳性对照)组,对大鼠造成实验性骨折,从手术第二天开始灌服蒸馏水[4 ml/(d·只)].各组试验大鼠分别于手术后7 d、14 d和21 d心脏采血,测定血清中碱性磷酸酶(ALP)活性、血清钙浓度和血清无机磷浓度,结果表明:骨折发生后,与空白对照组相比,Ⅱ组和Ⅲ组大鼠血液中ALP活性增高,且差异显著(P<0.05),其中在骨折后14 d血液中ALP活性最高;各试验组中,Ⅱ组血液中ALP活性高于Ⅲ组,两者存在显著差异(P<0.05);骨折后7 d血钙升高,对应血磷降低,且各组间存在显著差异(P<0.05);骨折后14 d血钙降低,而对应血磷升高,且各组间均存在显著差异(P<0.05).表明,中药组方可通过增强大鼠机体内成骨活动,提高血清ALP活性和促进钙磷沉积,进而促进骨折愈合. 相似文献
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黄芪多糖对雏鸡感染IBDV后血液中SOD活性和MDA含量的影响 总被引:9,自引:0,他引:9
选择健康1日龄罗曼雏鸡200羽,随机分为4组,每组50羽。Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组为试验组。21日龄时对4组鸡进行传染性法氏囊病毒(IBDV)抗体测定,均为阴性;26日龄时对Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组试验鸡进行攻毒处理,IBDV0.3 ml/羽;Ⅲ组和Ⅳ组从攻毒当日起连续胸肌注射黄芪多糖(APS)3 d,总剂量分别为5 mg/羽和10 mg/羽;各组分别在21、29、32、35、38日龄时心脏采血,测定血液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明,攻毒处理后,Ⅱ组SOD活性显著降低(P<0.05),而MDA含量显著升高(P<0.05);给予APS组中,相同日龄水平下SOD值均高于Ⅱ组,且除29日龄时Ⅲ组外,其余各组与Ⅱ组均存在显著差异(P<0.05),相同日龄水平下MDA测定值均低于Ⅱ组,且除32日龄和38日龄时Ⅲ组外,其余各组与Ⅱ组均存在显著差异(P<0.05);Ⅲ组和Ⅳ组相比,后者SOD测定值均高于前者,而MDA测定值则相反,但两者仅在32日龄时MDA值存在显著差异(P<0.05)。从而提示,雏鸡感染IBDV后,其抗氧化能力降低,免疫功能低下。APS可提高人工感染IBDV雏鸡抗氧化能力,提高机体的免疫功能。注射APS处理中Ⅳ组对人工感染IBDV雏鸡的效果较好。 相似文献
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为研究硒中毒对雏鹅免疫机能的影响,在基础日粮中按2.0、5.0 mg/kg添加亚硒酸钠(试验组),以饲喂基础日粮为对照组,并于试验开始后7、14、21、28、35、42 d每组随机抽取6羽鹅,分别空腹称体质量后自心脏采血5 mL,用于T淋巴细胞转化率测定和血清中与自由基有关酶的测定,之后捕杀,摘取胸腺、脾脏、法氏囊,用于计算免疫器官指数。结果表明,硒中毒时雏鹅血清中 GSH -PX、SOD、CAT 活性, GSH 含量与对照组相比显著或极显著减少(P<0.05或P<0.01),而MDA的含量则显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),同时,试验组雏鹅的淋巴细胞转化率显著下降(P<0.05),免疫器官指数显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。这表明硒中毒时雏鹅的免疫机能低下,抗病力降低,自由基产生增多,与自由基清除有关的酶活性降低,过氧化物产生增多,最后导致机体生长发育迟缓,甚至死亡。 相似文献
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选取体重相近高邮鸭280只,随机分为4组(对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组),每组5个重复,每个重复14只(公母各半),对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础饲粮中添加100、250和400 mg/kg吲哚,在试验第14和28天,公母鸭各重复组随机挑选1只鸭采血,采用WST-8、TAB、ELISA方法测定并分析不同浓度吲哚对高邮鸭血清抗氧化指标和免疫功能指标的影响。结果显示:与对照组相比,在第14和28天时,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、白细胞介素1(IL-1)含量、白细胞介素8(IL-8)含量、白细胞介素12(IL-12)含量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)含量均无显著性差异(P>0.05),但试验Ⅱ组血清SOD活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量、IL-1含量、IL-12含量、TNF-α含量上升较明显,MDA含量、IL-8含量、GM-CSF含量、MCP-1含量下降较明显。结果表明饲粮中添加吲哚可以提高高邮鸭抗氧化损伤的功能,提高机... 相似文献
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为探究镉(Cd)在地肤[Kochia scoparia(L.)Schrad.]茎部与根系中的亚细胞分布特征,在不同pH和不同Cd浓度胁迫下,对成熟期地肤生物量及Cd在地肤根系、茎部的积累状况和化学形态特征进行研究。结果表明:所有处理地肤茎部生物量均高于根系,当Cd添加量为1.5~3.0 mg·kg-1时,T处理(pH 6.1)地肤总生物量高于TS处理(pH 5.0);地肤将58.09%~89.35%的Cd积累在茎部,所有处理地肤Cd的富集系数大小为茎>根系,表明地肤茎对Cd的积累能力强于根系,且在Cd添加量为1.5~9.0 mg·kg-1时,T处理地肤茎Cd积累量高于TS处理;地肤根系和茎中超过85%的Cd贮存在细胞壁与液泡中,表明二者是地肤细胞中Cd区室化分布和解毒的重要场所;地肤根系细胞器Cd所占比例低于地肤茎部,这也是地肤将更多的Cd富集在茎部的一个重要原因;地肤茎和根系中均以移动性和毒性相对较低的醋酸提取态、氯化钠提取态及乙醇提取态Cd分配比例最大(T为82.96%~88.17%; TS为83.70%~89.70%),其中醋酸提取态含量最高(T为37.31%~56.24%; TS为40.98%~52.32%),氯化钠提取态与乙醇提取态Cd含量接近,这种Cd赋存形式是地肤降低Cd生物有效性和减少Cd毒害的一种重要防御机制。当土壤pH为6.1和Cd添加量为1.5 mg·kg-1时,地肤对土壤Cd的解毒较好。研究表明,地肤具有对不同Cd胁迫水平的耐性,且对酸性土壤有较强的适生性,因此适用于湖南地区酸性农田土壤的修复治理。 相似文献
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为探究泰州地区某规模化孵化场鸡胚源沙门氏菌的生物学特征,试验对临床疑似沙门氏菌感染的死亡鸡胚中的沙门氏菌进行选择性增菌和分离,并对分离菌进行革兰氏染色鉴定、特异性基因扩增、毒力基因检测、药物敏感试验和耐药基因检测。结果表明:共分离到6株细菌,在沙门氏菌显色培养基上均呈现紫色小菌落,均为革兰氏阴性菌,特异性基因扩增鉴定为鸡伤寒沙门氏菌;从6株菌中共检测出15种毒力基因,除均不携带sopE基因外,sipA、sopA、sopB、ssaB、mgtC、misL、siiE、pipC、stn、fimA基因携带率为100%(6/6),sipC、sseL基因携带率为83.3%(5/6),ssaR、spvB基因携带率为66.7%(4/6);6株菌对大部分抗生素敏感,仅对多西环素(66.7%,4/6)、林可霉素(100%,6/6)、阿奇霉素(83.3%,5/6)和多黏菌素B(83.3%,5/6)的耐药率高于50.00%,3重耐药率为83.3%(5/6),4重耐药率为66.7%(4/6),5重耐药率为16.7%(1/6),6重耐药率为0(0/6);从6株菌中共检测出5种耐药基因,其中tet(A)、tet(B)... 相似文献