抗诺氟沙星噬菌体单链抗体库的构建与筛选

应用噬菌体展示和重组抗体技术制备抗诺氟沙星(NFLX)单链抗体库,筛选获得抗NFLX高特异性、高亲和力的单链抗体scFv。将NFLX与BSA化学偶联获得的免疫源,免疫Balb/C小鼠,提取脾细胞RNA,反转录获得cDNA。以针对鼠源重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因的特异性引物,扩增获得VH基因和VL基因。通过SOE-PCR法将VH基因和VL基因通过柔性多肽Linker((Gly4Ser)3)拼接成VH-Linker-VL片段,酶切(sfiⅠ+NotⅠ)处理后,插入噬粒载体pCANTAB5E,并转化宿主菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07拯救,构建抗NFLX噬菌体单链抗体库。以包被抗原NFLX-OVA包被96孔板,亲和富集法,经三轮淘筛,间接Elisa初步检测重组scFv的特异性抗原结合活性。成功构建噬菌体单链抗体库,获得鼠源抗NFLX特异性的scFv,噬菌体中scFv插入率为90%,获得库容约为1.3×106的抗NFLX噬菌体单链抗体库,筛选得到5株抗NFLX的scFv。为运用噬菌体展示抗体技术制备特异性抗药物单抗及进一步建立药残检测新技术奠定了基础。     

诺氟沙星在淡水青虾体内药物代谢动力学研究

在（26±1）℃的水温条件下,青虾一次性肌肉注射25mg／kg诺氟沙星后,用反相高效液相色谱法测定青虾血淋巴和肌肉组织中诺氟沙星含量。青虾血淋巴药一时曲线和肌肉药一时曲线均可以用二室开放模型来描述,诺氟沙星在青虾血淋巴液中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/α为1．66h,消除相半衰期t1/β为1．69h,达峰时间T（Peak）为1．82h,峰浓度C（max）为6．0081μg/mL,曲下面积AUC为30．75μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2ka为1．66h。肌肉中的主要药动学参数为：分布相半衰期t1/ks为0．08h,消除相半衰期t1/2β为4．42h,达峰时间狄Peak）为0．03h,峰浓度C（max）为16．72μg/mL,曲下面积AUC为12．34μg·mL^-1·h^-1,吸收相半衰期t1/2a为0．08h。结果表明青虾肌注诺氟沙星后,能比较迅速的被吸收,并且在组织中维持较高的药物浓度。     

仔猪球虫病的诊治与体会

2010年6月15～22日,楚州区马甸镇某养猪户饲养的93头商品猪、6头母猪、1头种公猪中,已相继有56头仔猪发生以腹泻为主要症状的疾病。畜主先按传染性胃肠炎治疗,用病毒唑配合链霉素及庆大霉素治疗,效果不明显或无效,后又当细菌引发的仔猪白痢来治,先后使用痢菌净、土霉素、诺氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考等拌料、饮水或注射,也均无效果,以致病情加重,     

1 例仔猪腹泻的诊治

2014年3月上旬,南涧县某户存栏240头的猪场,有100多头仔猪相继发生腹泻;户主给病情较轻的猪投喂“氟哌酸”（诺氟沙星）,对重症病猪注射“恶痢停”（主要成分为乙酰甲喹）后,不见好转,且有7头仔猪死亡,遂请笔者前往诊治。笔者经现场查看,详细了解引进猪只、饲养管理和发病情况,诊断为由环境改变、饲喂不当、舍内温度过低诱使猪只发生应激反应导致消化不良引起的腹泻,通过改善养殖环境、加强饲养管理、调节胃肠功能等措施,     

红檵木花红色素提取物抗菌活性研究初报

用20％乙醇加微波处理提取红檵木花红色素，正丁醇、石油醚、乙醚、乙酸乙酯对粗提液进行纯化，牛津杯法检测花红色素粗提物及色素的各级提取物的抑菌活性，以诺氟沙星的抑菌活性为对照，计算抑菌系数。结果表明红檵木花红色素粗提物及各级提取物对金黄色葡萄球菌痢疾杆菌的生长有明显的抑制作用。     

一起肉鸡大肠杆菌与葡萄球菌混合感染的诊治

大肠杆菌和葡萄球菌均属于条件性致病菌,并且广泛分布于自然界中。禽致病性大肠杆菌常引起肉鸡局部或全身性感染,给肉鸡业造成严重的经济     

甲鱼血液中诺氟沙星浓度的反相高效液相色谱测定法

诺氟沙星是一种常用的喹诺酮类抗菌药物[王金生，1985]，通过抑制DNA旋转酶而杀菌。其杀菌活性由于氟化和接上呱嗪环而增强，且价格便宜，疗效好，已被广泛应用于甲鱼（Trionyxsinensis）养殖中病菌的防治。测定诺氟沙星在甲鱼体内的血药浓度可以为考察其在甲鱼体内的吸收、分布、代谢、排泄等药代动力学过程，研究和改善给药剂型和途径提供重要依据。目前，测定诺氟沙星人体及家兔等动物体内的血药浓度方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、液－质联用法，而甲鱼的血药浓度测定方法尚未见报道。本文参考许丹科等［1990］、…     

禽病防治技术问答

<正>1饲养的1800只肉杂鸡50天时发病,发病率在2%,先后用了诺氟沙星、环丙沙星、黄芪多糖、用新城疫Ⅳ系注射紧急免疫,现在每天死亡8～12只。     

烟酸诺氟沙星和乳酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内的药动学比较

应用高效液相色谱(HPLC)技术研究以相同浓度(30mg/kg)烟酸诺氟沙星和乳酸诺氟沙星对松浦镜鲤Cyprinus carpio specularis口灌给药后,药物在试验鱼血液、肝胰脏、肾脏中的药动学特征。相同给药剂量下,烟酸诺氟沙星和乳酸诺氟沙星在松浦镜鲤血浆中的血药浓度和时间关系均为一级吸收二室开放模型,吸收半衰期(t_(1/2ka))分别为0.061h、0.043h,消除半衰期(t_(1/2β))分别为29.969h、14.972h,达峰时间(T_(max))分别为0.327h、0.272h,达峰浓度(C_(max))分别为6.247mg/L、13.423mg/L,药时曲线下面积(AUC)分别为53.015mg·h/L、89.907mg·h/L,表观分布容积(V_d)分别为4.347L/kg、2.084L/kg。结果表明:在相同给药剂量下,乳酸诺氟沙星的吸收和消除速率均快于烟酸诺氟沙星,药物种类显著影响药动学特征。