猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株多重RT-PCR方法的建立及应用

为了建立鉴别猪瘟病毒(Classical swine virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)及经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)的快速检测方法,根据GenBank中公布的已知序列,设计合成了针对CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV特异性引物。经过引物筛选及对退火温度、引物比例等扩增条件的优化,建立了用2对引物同时检测CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV的多重RT-PCR方法。该方法可同时扩增出287bp的CSFV、374bp的HP-PRRSV和464bp的C-PRRSV目的核苷酸片段,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)等无交叉反应,最低可以检测到11.3pg的CSFV、4.7pg的HP-PRRSV和2.8pg的C-PRRSV总RNA。分别用多重和单项RT-PCR检测了从河北省采集的31份血清或组织样品,其中CSFV、HP-PRRSV、C-PRRSV以及CSFV与HP-PRRSV混合感染的检出率分别为19.4%、22.6%、0%与9.7%,多重与单项RT-PCR的符合率为100%。本试验建立的多重RT-PCR方法可同时鉴别CSFV、HP-PRRSV与C-PRRSV,适于猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测与流行病学调查。     

猪呼吸繁殖障碍综合症诊疗体会

<正>猪呼吸繁殖障碍综合症是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种高度传染性疾病。主要以母猪妊娠晚期流产,死胎和弱胎明显增加,母猪再发情推迟等繁殖障碍;仔猪出生率降低,断奶仔猪死亡率高,仔猪的呼吸道症状等为主要的临床特征。笔者通过多年临床实践,对猪呼吸繁殖障碍综合症的诊治进行了详细论述和总结,希望能为同行工作者在本病的防制实践中提供帮助。1流行病学1.1病原猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)属于尼多     

“猪康散”保健用药对人工感染猪繁殖与呼吸综合征病毒仔猪血清细胞因子含量的影响

选取28日龄健康杜长大三元杂交仔猪40头,随机分为4组,每组10头。36~39日龄中药组(Ⅲ、Ⅳ组)分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%"猪康散",40日龄除阴性对照组(Ⅰ组)外均滴鼻接种PRRSV SCM株1.0mL。于40、45、50、55、60日龄每组选取4头仔猪,前腔静脉采血测定血清细胞因子(IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α)的变化。结果显示,在整个试验期间,除0.5%中药组40日龄仔猪血清中IL-2含量与阴性对照组差异不显著外(P0.05),0.5%和1.0%中药组仔猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量均显著高于阴性对照组和阳性对照组(P0.01或0.05);除两中药组40日龄仔猪血清中IL-6含量差异不显著外(P0.05),1.0%中药组仔猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α含量均显著高于0.5%中药组(P0.01或0.05)。结果表明,在断奶仔猪基础日粮中添加0.5%和1.0%质量分数的"猪康散"能明显提高人工感染PRRSV仔猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量,从而提高仔猪机体免疫功能,达到抗PRRSV的能力。     

鱼类鳃霉病的特点与诊治

<正>鳃是鱼类主要的呼吸器官,对维持鱼类正常生命活动具有不可替代的作用。鳃的病变直接导致呼吸功能障碍,对鱼类的生长乃至存活均会造成严重影响。鳃霉病是鱼类常见鳃病类型之一,具有发病急、病死率高的特点,一旦发生往往造成极大损失,已引起广大养殖户和鱼病防治工作者的高度重视。尽管如此,笔者在辽宁地区进行鱼病诊治与病例采集工作时发现,许多养殖户和鱼病防治工作者对鳃霉病的认识存在误区,有些甚至是错误的观点和看法。经常有     

四川省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

为了解2012-2013年四川省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异背景和分子流行病学情况,对PRRSV阳性病料中的Nsp2、ORF5基因进行RT-PCR扩增和序列测定,所获得的序列分别与美洲型代表株(VR2332)、欧洲型代表株(LV)、标准毒株和变异毒株进行相似性分析。结果本研究成功获得8条Nsp2基因序列和17条ORF5基因序列,序列分析表明所有PRRSV流行毒株均属于美洲型,其中8株Nsp2基因序列与标准毒株和变异毒株的核苷酸相似性分别为75.2%~88.6%和94.8%~97.1%,推导的氨基酸相似性分别为58.7%~79.2%和92.8%~94.8%;17株ORF5基因序列与标准毒株和变异毒株的核苷酸相似性分别为90.1%~96.6%和95.6%~99.4%,推导的氨基酸相似性为77.2%~93.0%和88.0%~96.8%;与标准毒株相比,8株Nsp2基因有30个不连续氨基酸缺失,17株ORF5基因序列有点突变。从遗传进化分析看,所有流行毒株均属于PRRSV亚群Ⅲ。     

温度对肉鸡生长的影响

<正>随着畜牧业经济的发展,现代化的养殖设备在养殖业中发挥着重要作用。以饲养肉鸡为例,现代化的养殖设备和养殖环境更方便人们管理,人为控制温度对于肉鸡生长的影响十分重要。一般认为,肉鸡生长的适宜温度是15~21℃,本文将从高于适宜温度、适宜温度和低于适宜温度三个方面对肉鸡生长的影响进行阐述。1控制变量的对比试验在一个养殖肉鸡的厂房内,将所有肉鸡平均分为3部分隔离开来,保持食物数量和水的供给等条     

中东呼吸综合征的流行与研究进展

本文全面介绍了MERS的疾病概况、人间及动物间流行情况,目前该病已经蔓延到全球25个国家,造成1300余人感染、近500人死亡,并有4个国家发现骆驼MERS病例;总结了世界卫生组织（WHO）、世界动物卫生组织（OIE）和联合国粮农组织（FAO）等采取的防控措施,并从病毒来源、能否人际间传播、有效疫苗和药物研制等3个方面对MERS的研究进展进行了概述。目前认为,人类MERS的传染源可能是骆驼, MERS-CoV仅发生了有限的人传人,还没有研制出有效的特异性疫苗和药物。本文还简述了我国的防控情况,并提出了相关防控建议。     

多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。     

深度剖析母猪产程与死胎的相关性

我国PSY(15头左右)与欧美国家(30头以上)之间的巨大差距主要原因是围产期胎儿死亡率过高,其中产死胎是第1位的,30%的母猪在分娩过程中有1~2头以上的仔猪发生死亡,且约有5%~10%的发育正常仔猪在分娩中死亡。从产程过长与仔猪脐带断裂过早、呼吸障碍、代谢损伤和仔猪过大4个方面深度剖析了产程与死胎之间的关系,说明产程过长是导致死胎比例增加的最主要原因。     

猪酒糟中毒的病因分析及防治

酒糟是酿酒的糟渣,农村养猪常把酒糟当作很好的猪饲料,如果猪食入大量发酵处理不当的酒糟会导致的一种中毒现象。中毒后病猪出现昏迷不醒、体温降低、呼吸缓慢、严重呕吐等症状。酒糟是酿酒工业的副产品,历来作为家畜的补充饲料而广泛应用,尤其用来饲喂猪。1临床症状与剖检变化乙醇中毒症状:当长期食用或大量食用新鲜或没有变质的酒糟引起的中毒,则为酒精和乙醇中毒。酒糟中除酒精外还含有酒油,由于酒油的存在使毒