| 猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株多重RT-PCR方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 王晓波,李丽敏,袁万哲,宋勤叶,孙泰然,逯继成.猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株多重RT-PCR方法的建立及应用[J].中国兽医学报,2015,35(5). |
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| 作者姓名： | 王晓波 李丽敏 袁万哲 宋勤叶 孙泰然 逯继成 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学动物医学学院河北省兽用生物制品工程技术研究中心,河北保定,071000
2. 保定市动物疫病预防控制中心,河北保定,071001 |
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| 摘 要： | 为了建立鉴别猪瘟病毒(Classical swine virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)及经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)的快速检测方法,根据GenBank中公布的已知序列,设计合成了针对CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV特异性引物。经过引物筛选及对退火温度、引物比例等扩增条件的优化,建立了用2对引物同时检测CSFV、HP-PRRSV和C-PRRSV的多重RT-PCR方法。该方法可同时扩增出287bp的CSFV、374bp的HP-PRRSV和464bp的C-PRRSV目的核苷酸片段,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)等无交叉反应,最低可以检测到11.3pg的CSFV、4.7pg的HP-PRRSV和2.8pg的C-PRRSV总RNA。分别用多重和单项RT-PCR检测了从河北省采集的31份血清或组织样品,其中CSFV、HP-PRRSV、C-PRRSV以及CSFV与HP-PRRSV混合感染的检出率分别为19.4%、22.6%、0%与9.7%,多重与单项RT-PCR的符合率为100%。本试验建立的多重RT-PCR方法可同时鉴别CSFV、HP-PRRSV与C-PRRSV,适于猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测与流行病学调查。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性/经典毒株 多重RT-PCR 应用 |
The development and application of multiplex RT-PCR for smultaneous dtection of cassical sine fver vrus and hghly pthogenic/cassical prcine rproductive and rspiratory sndrome vrus |
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| WANG Xiao-bo,LI Li-min,YUAN Wan-zhe,SONG Qin-ye,SUN Tai-ran,LU Ji-cheng.The development and application of multiplex RT-PCR for smultaneous dtection of cassical sine fver vrus and hghly pthogenic/cassical prcine rproductive and rspiratory sndrome vrus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2015,35(5). |
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| Authors: | WANG Xiao-bo LI Li-min YUAN Wan-zhe SONG Qin-ye SUN Tai-ran LU Ji-cheng |
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| Keywords: | CSFV HP-PRRSV/C-PRRSV multiplex RT-PCR application |
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