辣椒耐热材料的筛选及耐热转录因子表达与功能鉴定

以10个辣椒品系为实验材料,进行田间鉴定和室内鉴定筛选耐热品种资源。室内鉴定用热害指数、电解质渗透率(REC)、叶绿素、丙二醛(MDA)、脯氨酸(PRO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)等8个指标综合评价10个辣椒品系的耐热性。结果表明:REC、MDA可以作为辣椒耐热性鉴定快速而简单的方法 ;测试的辣椒品系中最耐热的为B,A、C、D耐热性较好;Ca MBF1c基因对辣椒耐热性起正调控作用。     

克服甘蓝自交不亲和性方法的探讨

克服甘蓝自交不亲和性方法的探讨００３８１天津市蔬菜研究所曹必好王远欧十字花科蔬菜作物中,甘蓝的杂种优势很明显,生产上应用很广。其杂种种子当前主要是利用甘蓝自交不亲和系繁殖而得,但甘蓝的自交不亲和系有高度的自交不亲和性,造成其留种困难。目前甘蓝自交不亲...     

茄子青枯病诱导的cDNA文库构建与鉴定

以茄子抗青枯病自交系E-31为材料,在4叶期接种青枯病菌,48 h后采集叶片提取RNA,利用Gateway技术构建茄子uncut型cDNA文库。经检测,本研究获得的茄子叶片cDNA文库滴度达到0.01亿CFU/mL,总库容量为0.15亿CFU,平均插入片段长度在1.2 kb以上,重组率为100%。说明构建的文库能达到所需要的标准,可用于分离茄子的功能基因。     

转化用抗生素对青花菜离体再生的影响

为确定农杆菌转化青花菜时所用抗生素的适宜浓度,在分化与生根培养基中分别添加不同浓度的卡那霉素(Km)、500 mg/L的羧苄青霉素(Cb)与头孢霉素(Cef),探讨了对青花菜离体再生的影响.结果表明:青花菜外植体对Km比较敏感,表现在分化阶段10 mg/L Km能抑制带柄子叶与下胚轴分化不定芽,在生根阶段15 mg/L Km能完全抑制根的生出.在脱菌抗生素的使用上,分化阶段宜用Cb,并逐步降低浓度,生根阶段宜用低浓度的Cef.     

茄子种质资源的ISSR遗传多样性分析

利用ISSR分子标记分析茄子种质多样性,从100条引物中筛选出20条能够扩增出多态性条带稳定清晰的ISSR引物,对48份茄子材料的DNA进行扩增,共获得了186条谱带,其中多态性带153条(占所有谱带的82.2%).利用UPGMA法建立了48份茄子及其近缘野生种间的遗传关系聚类图.聚类结果表明,48份供试种质间的遗传相似系数分布在0.52～0.98之间,可将其分为5大类群.其中又将44份栽培品种分为5组,其品种间相似遗传系数在0.84～0.98之间,表明栽培品种的遗传背景比较窄.聚类结果与茄子的果形以及地理来源有一定的相关性,而与果色呈现不完全相关.     

提高辣椒离体再生不定芽伸长率的研究

通过调整培养基中的几种生长调节剂种类及其浓度组合，以及不同添加物，诱导不定芽分化与植株再生，有效地提高了不定芽的伸长率．结果表明：选用辣椒9～11d苗龄的带柄子叶在培养基MB＋BA5．0mg／L＋IAA1．0mg／L十GA31．0mg／L＋蔗糖3％＋琼脂6．5g／L十椰乳5％＋AgN035．0mg／L上培养，分化频率达97．8％；芽丛在MB＋ZT1．0mg／L＋IAA1．0mg／L＋GA31．5mg／L十椰乳5％＋AgN035．0mg／L培养基上伸长率达76．0％；幼苗在Ms＋IAA0．1mg／L＋NAA0．2mg／L培养基上能正常生根，生根率最高100％，并成长为健壮的再生植株。     

青花菜高效离体再生体系的建立

以青花菜为试验材料,探讨了影响离体再生的一些因素,结果表明：取用4～5d龄无菌苗的带柄子叶和下胚轴,分别培养在MSB＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L和MSB＋NAA0．2mg／L＋6-BA1．0mg／L＋AgNO3 2．5mg／L培养基上,获得了较高的分化率（80％）;再生芽插入MS＋IBA0．2mg／L培养基,生根率达100％。     

应用RAPD标记鉴定结球甘蓝品种

利用RAPD标记对17个结球甘蓝品种进行了分析。结果显示较低浓度基因组DNA、高浓度Taq酶及一致的Mg^2 浓度,有利于RAPD结果的稳定。所有品种经12个引物扩增后,发现利用其中4个引物在17个品种间所扩增出的多态性标记可将全部品种鉴别。17个品种的遗传多样性分析显示,秋冬甘蓝品种内的遗传差异较春甘蓝品种内更大。因此,为保持结球甘蓝多样性,将更多的遗传资源用于春甘蓝品种选育是必要的。     

用茎瘤芥再生芽离体筛选抗S－（2－氨乙基）－L－半胱氨酸变异体研究

将茎瘤芥“棒棒菜”（Ｂｒａｓｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ．ｔｕｍｉｄａｃｖ″Ｂａｎｇｂａｎｇｃａｉ″）下胚轴离休培养的再生芽，用１２０～４０Ｇｙγ射线照射后，在原培养基（ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋ＢＡ２．０ｍｇ／ｌ）上培养１周，转到加Ｓ－（２－氨乙基）－Ｌ－半胱氨酸（ＡＥＣ）的原培养基中，经过连续７代选择，获得了抗ＡＥＣ的变异体植株。其蛋氨酸和精氨酸含量分别为对照的１．８４倍和３倍，赖氨酸比对照略有增加，总氨基酸含量为对照的１．４５倍。     

人工雄性不育基因及恢复基因表达载体的构建

结合Cre/loxp定位重组系统和杂种一代的育种特点,构建了雄性不育基因表达载体pCABARTABn和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre.将位于质粒pTIABn中的雄性不育基因表达盒(含TA 29启动子、barnase基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp 2个同向lox位点之间,再将上述表达盒连同lox位点切下插入pCAMBar,获得以除草剂Basta为筛选剂的雄性不育基因表达载体pCABARTABn.PCR方法从溶原菌BM 25.8基因组DNA扩增出Cre基因,克隆测序验证无误后插入PBI 525 CaMV 35 S-35 S双启动子和Nos终止子之间,再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点,得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre.