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生长抑素基因疫苗质粒pcS/2SS的构建、表达及免疫* 总被引:14,自引:3,他引:14
为构建高免疫原性的生长抑素(somatostatin,SS)DNA疫苗,将SS基因插入到pcS/SS中乙肝表面抗原(HBsAg)S基因第112-113氨基酸残基密码子之间,构建含2拷贝SS的融合表达质粒pcS/2SS。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pcS/2SS构建成功。脂质体包裹法将pcS/2SS转染HeLa细胞,ELISA检测表达产物的SS免疫反应原性。结果表明,融合目的基因在HeLa细胞获得表达,S/2SS融合蛋白具有比S/SS融合蛋白更强的SS抗原抗体反应性。将pcS/2SS免疫6只大鼠后,2/3的大鼠产生了抗SS抗体,结果证明,所构建的质粒pcS/2SS可以表达生长抑素,表达产物具有免疫原性。 相似文献
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管输天然气气质的相特性 总被引:1,自引:0,他引:1
天然气气质对其管输相特性影响显著,相关研究可为解决管道析烃等问题提供依据。基于气-液相平衡理论,结合PR状态方程和Van der Waals混合规则,通过气-液闪蒸计算,分析了天然气中CH4~C7组分变化对其相特性的影响规律。研究表明:CH4~C3组分对天然气相特性影响不大,C4以上组分的影响相对较大;随着管输天然气中高碳数组分含量的增加,其相特性曲线明显偏移;重组分含量的少量增加,即可显著提高管输天然气的临界凝析压力和温度,影响天然气的相特性,其中C7、C8组分的影响程度明显超过C6组分,C8组分的影响程度又明显超过C6、C7组分。工程设计中仅根据C6+总量分析天然气相特性不够准确,有必要对天然气重组分特征化和拆分方法进行研究。 相似文献
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水稻粉质胚乳fse3突变体的表型分析及基因定位 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】水稻各种类型的胚及胚乳变异突变体是解析胚发育及淀粉合成和调控路径的优良材料。研究旨在通过大规模的粉质胚乳致死突变体的基因克隆和功能鉴定,获得一系列调控胚发育及淀粉合成的关键基因,为稻米品质改良提供理论指导。【方法】从化学诱变剂N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)处理的粳稻品种宁粳3号突变体库中,筛选到一个稳定遗传的胚乳粉质皱缩致死突变体,命名为fse3(floury and shrunken endosperm 3)。将其与9311配制杂交组合,利用F2群体中隐性极端个体进行精细定位;将种子在30℃条件下清水浸种24 h,然后在35℃黑暗条件下用TTC染色2 h检测种子活力;用体视镜观察30℃吸胀9 h后的种子胚结构;从突变体杂合植株上分离粉质成熟种子,去壳后磨成糙米粉进行理化性质分析;用扫描电镜观察成熟淀粉颗粒的结构;制备半薄切片观察发育胚乳中的淀粉颗粒结构;利用qRT-PCR测定籽粒灌浆时期的淀粉合成相关基因表达量;并通过Western-blot检测相关淀粉合成酶的蛋白积累。【结果】与野生型相比,突变体籽粒的千粒重、籽粒大小、总淀粉含量、表观直链淀粉含量等指标均降低,淀粉在尿素溶液中的膨胀能力减弱,淀粉的黏度曲线与野生型也存在显著差异,fse3突变体的最高黏度、热浆黏度、冷浆黏度以及崩解值都显著高于野生型。TTC染色表明其胚活力下降,对发育中的胚纵切片观察发现突变体没有心型胚的分化。对发育中胚乳淀粉结构进行观察,发现fse3突变体的胚乳中产生大量小而不规则排布的单淀粉颗粒,复合淀粉颗粒发育滞后。成熟种子横截面观察发现fse3突变体淀粉颗粒排列疏松,大小不均匀,颗粒间存在较大间隙。利用F2群体中分离出的22个隐性极端个体将FSE3连锁在第9染色体长臂上,随后共用1 400个极端个体将目标基因定位于228 kb的区间内,包含28个开放阅读框。qRT-PCR发现在突变体中多个淀粉合成相关基因表现出不同程度的上调和下调,Western-blot结果表明部分淀粉合成酶的蛋白积累减少。【结论】FSE3是一个新的粉质胚致死基因,基因精细定位在第9染色体228 kb的物理区间,FSE3在水稻种子胚及胚乳的发育调控中起重要作用。 相似文献
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为了解决陇东旱塬区复种鲜食玉米生产选种困难问题,采用起垄覆膜栽培模式,在陇东地区对5个鲜食玉米进行田间试验研究,对鲜食玉米的植株特性、果穗特征情况进行了统计分析,同时进行感官评价,旨在为该区域鲜食玉米产业化发展提供指导。结果表明,5个鲜食玉米品种均能正常成熟,生育周期为75~83 d,绿色超人最长,为83 d;绿色超人的穗长、穗行数、行粒数和单穗质量分别为22.5 cm,18.1行,41.4粒和0.32 kg,与其他品种呈显著性差异,且籽粒统一,颜色为黄色,但有秃尖发生,感官评价为二级;美甜糯1号和萃甜518的穗粗和穗行数分别为5.2 cm,14.6行和4.9 cm,14.5行,双棒率高,籽粒统一,颜色为白色,皮薄嫩脆,食味性好,感官评价为一级;俏春1号生育期较短,有秃尖,单穗质量为0.21 kg,感官评价为二级;金糯加甜型籽粒不统一,感官评价为三级。美甜糯1号和萃甜518综合评价优,产量高,适宜于陇东旱塬区生产应用。 相似文献
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水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫中的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
LOX3是主要的水稻种胚脂氧合酶同工酶。为了研究水稻LOX3基因在逆境胁迫中的作用,构建了LOX3基因的反义植物表达载体,用农杆菌介导法转化水稻品种武运粳7号和Kasalath,获得了转基因植株。PCR和Southern鉴定证实基因已经导入水稻基因组中,种胚LOX3缺失鉴定和半定量RT PCR分析证实反义RNA抑制了LOX3基因的表达。对T2代转基因植株进行了水分胁迫处理及稻瘟病和白叶枯病的接种鉴定。结果显示,与非转基因对照相比,反义LOX3转基因植株对水分胁迫、稻瘟病和白叶枯病都表现敏感,说明水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫反应中发挥一定的作用。 相似文献