刺参精子冷冻保存方法研究

为获得适宜的刺参Apostichopus japonicus精子冷冻保存技术,综合借鉴现有水产动物精子冷冻保存方法,对刺参精子降温方式、冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度进行了筛选,在筛选出适宜的刺参精子降温方式基础上,分别以煮沸消毒海水和超纯水为溶剂,加入葡萄糖、NaCl、KC1、海藻糖、无水CaCl2和冷冻保存剂[二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)或1,2-丙二醇(1,2-G)]配制冷冻保存剂终体积分数为5％、10％和15％的冷冻保存液(Aj-1～Aj-27),以体积比为1:1、1:2和1:3的比例混合精子与冷冻保存液进行冷冻保存,冷冻48 h后分别在37 ℃和30℃水浴条件下进行精子复苏,以精子活率、快速运动时间和精子寿命为指标,综合筛选冷冻保存刺参精子的适宜冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度.结果表明:将刺参精子与以超纯水为溶剂配制的Aj-20精子冷冻保存液(12 g/L葡萄糖、7 g/L NaCl、0.7 g/L KC1、5 g/L海藻糖、0.1 g/L无水CaC12和终体积分数为10％的DM-SO)以体积比为1:2的比例混合,以三步法降温方式冷冻保存,并在30 ℃水浴短时迅速复苏,该技术方法为本研究筛选到的最优刺参精子冷冻保存方法;与本研究中其他冷冻技术方法相比,应用该优选方法冷冻保存的刺参精子在复苏后精子活率最大(19.00±4.00)％、快速运动时间最长(1 178.67 s±14.57 s)、寿命最久(2 817.33 s±93.76 s);应用该优选方法冷冻保存72、120、408 h的精子复苏后受精率可达70％以上(精子与卵子数量比为1×106:1),受精的卵囊孵化率可达到50％.研究表明,本研究中筛选获得的冷冻保存液配方及其冷冻保存方法比较适宜刺参精子的长期冷冻保存,具有应用于生产实践的潜力.     

棘皮动物性别决定与分化研究进展

棘皮动物是重要的海洋渔业资源,中国现有棘皮动物500余种,其中海参和海胆均被誉为"海产八珍",具有极高的经济价值.大多数棘皮动物不存在明显的雌雄二态性,但在性腺色泽、免疫力、激素水平等层面却展现了性别差异,因此,针对棘皮动物性别决定及分化机制展开研究、实现单性群体养殖具有重要的理论和经济意义.本文综述了棘皮动物,尤其是经济棘皮动物(海参、海胆)的生殖对策、性别决定和性别分化遗传基础,并就棘皮动物性染色体的确定、性别连锁分子标记的开发应用、基因编辑技术应用及性激素诱导单性养殖等方面提出未来重点研究建议,以期推动经济棘皮动物性别控制育种工作进程.     

温度骤降对光滑河兰蛤的胁迫效应

设置3种温度骤降模式,研究光滑河兰蛤肌肉中可溶性蛋白、可溶性糖含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、总抗氧能力、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和溶菌酶活力。试验结果表明,3种降温模式对试验蛤肌肉中各生化指标均有显著影响(P0.05)。试验过程中,可溶性蛋白和可溶性糖含量均能维持初始水平。大幅降温和中幅降温组中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力在1h内显著降低,过氧化氢酶活力在3h后开始趋于稳定;小幅降温组超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力随胁迫时间延长均呈升高-降低-再升高的波动变化;总抗氧能力在3种降温模式中均呈波动变化。碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活力在大幅降温组和中幅降温组均呈波动变化;在小幅降温组,二者均在1h内显著降低,6h后趋于稳定;溶菌酶活力在3种降温模式中均呈波动变化,6h后均出现大幅波动。研究结果显示,温度骤降会影响机体生理功能和免疫力,可能是诱发水产动物疾病的原因之一。     

不停电检修和运维的协同管理

<正>国网北京检修公司作为国网北京市电力公司的直属二级单位,主要负责北京电网35 kV及以上架空输电线路、变电站、电缆线路及电力隧道的运维检修、缺陷处理、技术改造、故障抢修等工作。负责35 kV及以上变电设备的电气试验、继电保护及自动装置等定期校验工作。运维工作量大与运维人员力量相对不足矛盾突出,过大的运维工作量已超出运维人员的承载力,致使部分检修     

虾夷扇贝三倍体诱导与培育技术的研究

取繁殖期虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis)亲体，采用阴干、流水和升温海水催产以及小水体、高密度、雌雄分池排放、人工授精的方法，可获得批重受精卵。分别使用浓度为0．05，0．10，0．15，20，0．30，0．50和0．70mmol/L的6－DMAP诱导虾夷扇贝三倍体，实验水温分别为12℃和14℃。结果表明，水温12℃，6－DMAP0．05mmol/L时，在授精后67min处理胚胎45min诱导三倍体效果较好，三倍体率达83．3％，面盘幼虫相对孵化率达69．5％；水温12℃和14℃时，6－DMAP可诱导17．3％－100．0％的三倍体面盘幼虫；6－DMAP处理组胚胎发育至面盘幼虫的时间比对照组慢，故应推迟1d选优；处理组幼虫初始壳长、壳高及日生长速度皆高于对照组；6－DMAP的残留人影响处理幼虫的成活率，用0．2ml/L的DMSO海水浸洗处理可减轻6－DMAP的副作用。     

氨氮对刺参幼参的急性毒性研究

[目的]为合理调控刺参养殖水体中的氨氮浓度提供参考价值。[方法]采用常规生物急性毒性试验法,在pH8．O、水温20℃条件下研究氨氮对刺参幼参的急性毒性。[结果]氨氮对刺参幼参的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为318．6、288．2、244．5和212．1mg／L,安全浓度为21．2mg／L;非离子氨对刺参幼参的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为12．00、10．86、9．21和7．99mg／L,安全浓度为0．80mg／L。[结论]刺参幼参对氨氮的耐受力较强。     

饲料中DHA含量对刺参成参生长及其体壁营养成分的影响

为确定刺参Apostichopus japonicus成参饲料中二十二碳六烯酸(DHA)的适宜添加量,采用摄食生长试验,探讨了在水温(12±2)℃下饲料中DHA含量(0.02%、0.30%、0.60%和1.20%)对体质量为(73.49±1.26)g的刺参成参生长和体壁营养成分的影响,试验共进行121 d。结果表明:饲料中DHA含量为0.60%时成参增重率最高,显著高于对照组(0.02%DHA)(P0.05);饲料中DHA水平显著影响成参体壁营养成分,摄食DHA含量为0.30%~1.20%饲料的刺参,其体壁中二十碳五烯酸(EPA)、DHA和n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)含量无显著性差异(P0.05),但显著高于对照组(P0.05);饲料中添加DHA时,刺参体壁中DHA/EPA和n-3/n-6 PUFA显著升高(P0.05);0.30%DHA处理组刺参体壁中苯丙氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸和总必需氨基酸含量最高,且显著高于对照组(P0.05),但总必需氨基酸/总非必需氨基酸各组间无显著性差异(P0.05)。研究表明,饲料中DHA含量为0.60%时成参的生长速率最快,DHA含量为0.30%时已具有较高的营养物质(必需脂肪酸和氨基酸)沉积率,成参对饲料中DHA的最适需求量为0.30%~0.60%(饲料干物质)。     

刺参4个功能基因的表达分析

为研究刺参Apostichopus japonicus的生长发育,采用实时定量PCR方法,对刺参腱生蛋白基因、胶原蛋白α2基因、整合蛋白αV基因和整合蛋白βL基因等4个候选功能基因不同月龄的组织表达进行了分析。结果表明:刺参12、13、14月龄时,腱生蛋白基因在刺参肠、管足、呼吸树、皮肤、体壁、体腔液细胞、疣足和纵肌等8个组织中均有不同程度的表达,其中在体腔液细胞和呼吸树组织中的表达量较高(P0.05);胶原蛋白α2基因在刺参管足、呼吸树、体壁、疣足和纵肌组织中的表达量随月龄的增加而逐渐增加,其中在呼吸树组织中表达量最高,在纵肌、疣足、体壁、肠和体腔液细胞等组织中的表达量逐渐降低;整合蛋白αV基因在纵肌组织中的表达量随月龄的增加而逐渐增加;整合蛋白βL基因在皮肤、体壁、疣足和管足组织中的表达量较低。本研究结果为深入研究刺参这4个功能基因提供了参考。     

低盐刺参家系的建立与生长性状比较

目前尚未见关于刺参低盐家系建立的报道,本实验采用巢式的配对方法建立低盐刺参半同胞家系9个,共36个全同胞家系以及4个对照组,分别饲养于21‰、24‰、27‰、30‰四个不同盐度下。对体长、体重定期进行测量、分析。结果表明:不同低盐刺参家系在不同盐度环境下的生长差异显著。在21‰盐度下,5、7号家系具有明显的优势;在24‰盐度下5、7、9号家系具有明显的优势;在27‰盐度下7、11号家系具有明显的优势;在30‰盐度下9号家系具有明显的优势。通过分析发现,7、11号家系在低盐环境下的生长表现优秀,可以作为进一步进行耐低盐家系选育的材料。     

κ-卡拉胶寡糖对仿刺参溶菌酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影响

采用10 g/L的两种κ-卡拉胶寡糖对仿刺参Apostichopus japonicus进行体壁注射刺激后,测定其体腔液中溶菌酶（LSZ）、碱性磷酸酶（AKP）和超氧化物歧化酶（SOD）活性的动力学变化。结果表明：在注射κ-卡拉胶寡糖后的第1天,1、2号寡糖组的LSZ活性达到最高,分别是对照组的7.0和6.0倍,极显著高于对照组（P〈0.01）;AKP活性于注射后第2天增至最高,1、2号寡糖组的酶活性分别是对照组的1.9和2.6倍,前3天试验组的酶活性显著高于对照组（P〈0.05）;1号寡糖组的SOD活性于注射后第2天达到最高,然后逐渐下降,而2号寡糖组的酶活性第2天呈现增加,第5天达到最高,1、2号寡糖组的酶活性最高时分别是对照组的2.0倍和2.3倍,且极显著高于对照组（P〈0.01）。非参数检验分析表明,1、2号寡糖组3种酶活性变化趋势与对照组差异极显著（P〈0.01）,说明κ-卡拉胶寡糖具有增强仿刺参免疫活性的作用。