Achaetomium sp.Xz8甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达及其酶学性质分析

甘露聚糖酶作为最主要的半纤维素酶类现已被广泛地应用在饲料、造纸、洗涤剂、食品及石油开采等领域。本研究从高温真菌Achaetomium sp.Xz8菌株中利用兼并引物和Thermal asymmetric interlaced PCR(Tail-PCR)的方法克隆获得一个新的糖苷水解酶5家族的甘露聚糖酶基因(man5Xz8)。基因全长1 239bp,序列分析发现其编码412个氨基酸和1个终止密码子,预测的信号肽序列为N端的20个氨基酸。将成熟蛋白序列克隆到毕赤酵母分泌型表达载体p PIC9中,利用甲醇诱导重组酵母菌表达目的蛋白,经SDS-PAGE电泳分析,表达蛋白分子量约55.0 k Da。对其酶学性质进行测定,Man5Xz8的最适p H值为5.0,在p H值9.0可以保持40%以上的酶活性,在p H值5.0~9.0具有良好的p H稳定性。最适作用温度为50℃,并对SDS具有较高的耐受性。以角豆胶为底物,Man5Xz8的比活、Km及Vmax值分别为101.6 U·mg-1、4.4 mg·m L-1、128.2μmol·min-1·mg-1。因此,Man5Xz8为后期研究甘露聚糖酶的工业应用和酸碱催化机制提供了良好的材料。     

宜兴市农机维修服务中心建设的思考

<正>近年来随着宜兴市农业机械化水平的不断提高,农机具的成倍增长造成了全市农机维修网点维修能力严重不足。为提升我市农机维修服务能力,满足全市农机化事业快速发展的需要,我市成立了以宜兴市农机维修服务中心为龙头,各农机维修为主体的,功能齐全、优势互补的农机维修服务网络,农机维修难的问题得到了初步解决。1农机维修服务中心建设的迫切性据2013年宜兴市农机化统计年报数据显示,截止2013年底,全市农机化维修网点总数为55家,其     

两种土壤改良剂对3种牧草生长及土壤含水量的影响

在盆栽试验条件下种植雀稗(Paspalum thunbergii)、黑麦草(Lolium perenne)、拉巴豆(Dolichos lablab),研究土壤改良剂对喀斯特不同品种牧草生长及土壤含水量的影响。在相同的土壤条件及水分管理状态下,3种牧草的生物量存在明显的差异,尤其是秸秆炭处理的3种牧草平均值分别为1.57、0.25、7.70 g·株-1,具体表现为拉巴豆雀稗黑麦草;但土壤含水量的变化存在显著差异(P0.05),种植雀稗的平均土壤含水量最高分别比黑麦草和拉巴豆高15.4%和31.1%,雀稗的土壤持水能力明显高于拉巴豆。土壤添加5%秸秆炭后,在连续10 d不降雨的条件下,雀稗、黑麦草和拉巴豆的平均土壤含水量分别比对照高17.9%、17.4%和19.8%。本研究显示,施用秸秆炭对牧草生长具有促进作用,尤其是雀稗在秸秆炭处理下的生物量分别比对照和秸秆提高了9.5%和30.6%,种植雀稗有利于提高喀斯特土壤含水量,秸秆炭添加后其提高效果更显著。     

南海底层鱼突额鹦嘴鱼Scarus ovifrons Temminck et Schlegel|1846肠道产酶微生物研究

通过不同培养基对南海底层鱼突额鹦嘴鱼ScantsovifrousTemmincketSchlegel，1846肠道微生物进行分离与16S、18SrDNA鉴定，并构建系统发育树，然后结合选择性培养基进行产蛋白酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶等微生物的筛选。结果表明，从突额鹦嘴鱼肠道分离纯化出23株微生物，其中14株产酶，以产蛋白酶与淀粉酶为主，部分产纤维素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶；产酶微生物主要为Bacillussp．；分离出3株菌（H-16、J-13与Y-13G）其16S、18SrDNA序列与模式种相似度低于97％，为潜在的新种。研究表明，南海底层鱼突额鹦嘴鱼肠道含有大量产酶微生物。     

中性植酸酶在豆粕型饲料中替代磷酸二氢钙对花鲈生长及磷代谢的影响

本文旨在研究豆粕型饲料中用中性植酸酶替代不同水平的磷酸二氢钙,对花鲈(Lateolabrax japonicus)生长和磷代谢及利用的影响。以(2.52±0.01)g的花鲈为试验对象,用中性植酸酶分别替代试验用的豆粕型饲料中60%(PE6)、80%(PE8)和100%(PET)的磷酸二氢钙,每个替代水平饲料中分别设置1000FTU/kg(PE610,PE810,PET10)和1500FTU/kg(PE615,PE815,PET15)2个梯度。8周的养殖试验结果显示,在豆粕型饲料中用中性植酸酶替代磷酸二氢钙后,对各试验组花鲈的生长、鱼体成分和蛋白质消化率均无显著影响(P>0.05);但PE615和PE815组的干物质消化率显著高于对照组(P<0.05),PE815组的脂肪消化率显著高于PE610、PET10和PET15组(P<0.05),而PE615和PE815的总磷消化率显著高于对照组、PE610组和PET15组的(P<0.05)。各试验组的总磷摄入量、表观磷的摄入量、粪磷和非粪磷的排出量均随试验料中磷酸二氢钙添加量的减少而显著降低(P<0.05),而除PE610和PE815以外的各试验组的总磷储积率却显著高于对照组(P<0.05)。根据本试验的结果,在含有30.5%豆粕的花鲈饲料中添加一定量的中性植酸酶同时减少磷酸二氢钙的添加量后,仍能显著提高饲料中磷的消化和利用(P<0.05)。中性植酸酶的添加量以1000FTU/kg饲料为宜,其作用相当于12g/kg的磷酸二氢钙。     

来源于青霉Penicillium sp. C6的β-1,3(4)-葡聚糖酶基因的克隆及酶学性质分析

从青霉Penicillium sp. C6菌株基因组DNA中克隆到一个新的16家族的葡聚糖酶基因,命名为bglc6(GenBank登录号:JX854434)。其cDNA全长为1 044 bp,包含N端前20个氨基酸的信号肽序列和一个16家族的结构催化域。bglc6编码的氨基酸序列与Grosmannia clavigera kw1407的假设葡聚糖酶蛋白序列最高一致性为64%。成熟蛋白BglC6在毕赤酵母中已成功表达,酶学性质分析表明,BglC6最适pH为4.5,最适温度为50℃,在酸性范围内具有良好的稳定性。以大麦葡聚糖酶为底物时,BglC6的比活、Km及Vmax值分别为253.8 U/mg,8.42 mg/mL,478.4 μmol/min·mg。蛋白BglC6对大多数金属离子有较好的抵抗能力。因此,该葡聚糖酶在动物饲料行业领域中具有潜在的应用前景。     

黑河43号大豆高产高效栽培技术

黑河43号大豆原代号黑交00-1152,育成单位是黑龙江省农业科学院黑河农科所以黑交92-1544为母本、黑交94-1211为父本,经有性杂交,系谱法选育而成.黑河43号大豆在嫩江种植,自2008～2012年进行了5年的区域试验和大面积的生产示范试验,平均单产为2780.45kg/hm2,目前已成为嫩江地区的主栽品种,经过5年的区域试验和大面积生产试验、示范,总结出了该品种的丰产栽培技术,为嫩江地区大豆产业的发展提供技术依据.     

马铃薯品种筛选试验

2012年克山农场进行了马铃薯品种筛选试验,对各品种在克山农场的适应性、抗病性和产量做出综合评定,现将试验结果总结如下. 1 试验材料与方法 供试马铃薯品种为尤金、荷兰7号、延薯4号、花525、克新1号、大西洋、夏坡帝、克新16号、抗疫白. 试验设在克山农场科技园区,年降雨量475.3mm,年平均气温1.3℃,≥10℃有效活动积温2339.8℃,无霜期134d,有机质含量5.29％,全氮0.35％,全磷0.2％,呈微酸性土壤,土壤肥力中等、肥力均匀、排水良好、地势平坦、土壤类型为淋溶黑钙土,前茬玉米,秋整地、春起垄夹肥,垄距为80cm,种下施肥3～5cm,公顷施肥纯量300～330kg,施肥比例为N∶P∶K=2∶1.5∶1. 试验采用大区对比法,每品种面积为666.6m2,早熟和中熟品种株距21cm;中晚熟和晚熟品种株距为24cm.5月3日播种,播深在8～15cm.其它管理同大田.     

杨树品系在五氯酚污染土壤上的生长适宜性试验

为筛选用于五氯酚污染土壤植物修复的备选植物材料,采用土培试验,设置5个不同浓度的五氯酚污染处理,通过观测植株地茎、株高和生物量等3个指标对8个不同的供试杨树品系进行了生长适应性评价.结果显示,LA08-N26生物量最大,株高受土壤中五氯酚浓度的影响最小;LA02-N26和2A07N33生物量小于LA08-N26,其株高及地茎受到的影响较小.这3个杨树品系均在五氯酚污染土壤上具有较强的适应能力,可以作为修复五氯酚污染土壤的备选植物材料.其余供试品系因观测指标易受污染浓度影响,初步判断不适合在五氯酚污染的土壤上生长.     

3种DNA提取方法对养殖池塘不同生境菌群PCR-DGGE分析的影响

比较3种DNA提取方法(溶菌酶法、CTAB法及珠磨法)对养殖池塘几种生境(底泥、饲料、草鱼肠道内容物及肠道壁)菌群PCR-DGGE分析的影响。结果表明,以3种提取方法获得的DNA为模板均能进行16S rDNA V3区特异性片段扩增;但不同DNA提取方法对池塘不同生境菌群DGGE指纹图谱存在显著影响。DGGE指纹图谱显示草鱼肠道内容物菌群(溶菌酶法)与肠道壁菌群(溶菌酶法)存在较高一致性,底泥菌群(CTAB法)及饲料菌群(溶菌酶法)与鱼体肠道菌群(包括内容物菌群和肠道壁菌群)则存在明显差异,但肠道菌群与底泥菌群的相似度相对更高。研究提示采用微生物分子生态学工具对养殖池塘不同生境进行菌群结构分析时,需提前优化DNA提取方法;在以投饲为主的养殖鱼塘中,草鱼肠道菌群更多源自于池塘底泥。