细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用

为研究细胞信号转导和骨架在人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞中的作用,分别用酪氨酸蛋白激酶、酪氨酸蛋白磷酸酶、蛋白激酶C、Ca2+通道等信号转导抑制剂染料木黄酮、原钒酸钠、星状孢子素、硝苯地平和微丝蛋白聚合抑制剂细胞松弛素B处理鸡肠上皮原代细胞后,采用细胞免疫组织化学染色检测人源福氏志贺菌ZD02株对鸡肠上皮原代细胞侵袭率,用间接免疫荧光双重标记检测ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞后F-肌动蛋白分布的变化。结果显示,染料木黄酮、硝苯地平和细胞松弛素B能显著抑制人源福氏志贺菌ZD02株内化,星状孢子素和原钒酸钠对ZD02株的内化无影响,人源福氏志贺菌侵袭鸡肠上皮原代细胞时F-肌动蛋白发生聚集。本研究表明人源福氏志贺菌ZD02株侵袭鸡肠上皮原代细胞过程中需要酪氨酸蛋白激酶、Ca2+通道活化以及细胞微丝重排。     

猪源屎肠球菌致病力与耐药性及生物被膜形成能力的相关性分析

为研究猪源屎肠球菌的致病力与耐药性及生物被膜形成能力的相关性,本研究分别对9株猪源屎肠球菌进行动物试验、药敏试验和生物被膜形成能力的测定。结果显示有66.67%的菌株引起小鼠肝脏、脾脏出血等病变,并且其中部分菌株导致接种小鼠急性的高死亡率;9株屎肠球菌中KF-QX-1株耐药率最高为100%,其次为ZKXH01(95.24%)、NY01(90.48%)、NY-XY-4(80.95%)、SBLH(76.19%)、HUAX(71.43%)、NY-XY-1(71.43%)和ZHENGY(66.67%),耐药率低于50%的菌株只有JY02(14.29%);生物被膜检测结果显示9株菌中除NY01株外均有不同程度的的被膜形成能力,其中2株菌(JY02和NY-XY-1)生物被膜形成能力相对较强;通过对上述试验结果综合分析显示,肠球菌菌株对受试动物的致病力与其耐药性和生物被膜形成能力之间缺乏明显的相关性,但具有生物被膜形成及耐药两种特性会增强猪源肠球菌的耐药性和传播性,给人类和动物的疾病控制造成更大的威胁。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒XINX株的分离及NSP2基因的遗传进化分析

为了了解猪繁殖与呼吸综合征病毒在河南地区猪体内的进化情况,笔者采集了河南新乡地区出现的疑似猪繁殖与呼吸综合征的流产猪胎,并进行了病毒的分离鉴定,同时对分离病毒株的NSP2基因部分序列进行遗传进化分析。结果共分离并鉴定出1株美洲型猪繁殖与呼吸病毒XINX,且NSP2基因部分序列的分析显示,该毒株与以往的分离毒株不同,其NSP2基因存在393 bp的不连续缺失,同国内之前报道的经典毒株和高致病性毒株间均存在较大差异,目前在国内尚数首次出现。研究结果为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子进化提供了重要信息。     

雏鸡肠组织β1基因的鉴定及时空表达特性

设计1对引物,建立RT-PCR方法对β1基因mRNA进行鉴定;以GAPDH基因为内参,建立检测鸡β1基因表达水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,并用此方法测定1²0日龄雏鸡不同肠段组织β1基因表达水平。结果显示,从鸡肠组织成功鉴定出β1基因mRNA;检测内参基因GAPDH和目的基因β1的实时荧光定量PCR方法扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1),满足使用比较Ct值法对β1基因mRNA进行相对定量分析的前提;扩增曲线、熔解曲线及凝胶电泳结果提示该方法特异性好。实时荧光定量PCR检测结果表明,1日龄雏鸡十二指肠和盲肠、10日龄雏鸡空肠和直肠、5日龄雏鸡回肠组织中β1基因相对表达量最高。结果表明,鸡肠组织中存在β1基因表达,并在不同日龄不同肠段表达水平存在差异。     

鸡源鲍氏志贺菌的RAPD分析

【目的】确定鸡源鲍氏志贺菌的进化地位。【方法】选用6条随机引物(P1~P6),采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对1株鸡源鲍氏志贺菌、2株鸡白痢沙门菌、2株鸡肠致病性大肠杆菌和2株痢疾志贺菌共7株菌的基因组DNA进行分析,同时对个别特殊序列进行克隆测序,并在此基础上分析了鸡源鲍氏志贺菌与其他15个相关菌株的进化关系。【结果】6条随机引物中有4条引物(P1,P2,P4和P6)能较好地在志贺菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡致病性大肠杆菌3种菌中检测到多态性分子标记;这4条有效引物共扩增出了64个DNA片段,其中7个菌株共有的谱带有3条,多态性片段有61条,多态率达95.3%。引物P2可根据扩增图谱将志贺菌和大肠杆菌与沙门菌鉴别出来;用引物P6对上述7株细菌进行扩增,发现同种菌株间谱带特别相似,其中鸡鲍氏志贺菌与人痢疾志贺菌扩增条带的相同率达66.7%,与鸡肠致病性大肠杆菌扩增条带的相同率达44.4%,而鸡白痢沙门菌与志贺菌的扩增谱带相差甚远,可用于3种细菌的鉴别。对扩增片段进行的测序及进化分析结果显示,鸡源鲍氏志贺菌与人源志贺菌的进化距离最近。【结论】鸡源鲍氏志贺菌可能是人源志贺菌的一个变异株或新的亚种。     

分析废弃采石场中的复绿技术

牢固生态文明建设理念,加大生态保护和修复力度,对废弃采石场实施治理,可以消除地质灾害隐患、保持水土,对修复区域生态景观天窗有重要作用。主要围绕废弃采石场的复绿技术展开分析和论述,介绍了废弃采石场复绿技术应用的重要作用,并提出废弃采石场中复绿技术应用的举措。     

应对金丝小枣烂果病的几项措施

近些年来金丝小枣烂果病在沧州地区发生较严重,给广大枣农造成不小的经济损失。1枣烂果病的症状与病原体枣的烂果病一般分为三种类型,即浆烂型、黑疔型和褐皮型。浆烂型枣果病斑初为红色水浸状小点,后迅速扩大,形成明显的红色病斑。有的表面有明显的轮纹,多数病斑表皮下散生黑色小点,病组织土黄色至浅褐色软腐、脓状、有酒糟味,后期病果皱缩成深红色至黑色腐果,表面密生黑色瘤状小点。此种类型烂果病主要危害脆熟期的枣果。黑疔型病斑初期圆形,略凹陷,颜色与枣果表皮的红色相近,多数病斑直径小于0.5cm,果肉组织软腐,后期失水后病斑表皮及病…     

猪伪狂犬病的诊断与防治

浙江省浦江县某一新办外贸猪场于１９９８年元月发生一种以妊娠母猪流产、早产、死胎,初生仔猪在２－３日龄整窝突然发病,体温升高,迅速衰弱、昏迷、死亡为特征的急性、热性传染病。根据临床特征、流行病学、实验室诊断,确诊为猪伪狂犬病（ＰＲ）。１临床症状初生仔猪...     

猪丹毒的防治体会

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种急性、热性传染病,其主要特征为高热、急性败血症（急性）、皮肤疹块（亚急性）、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎（慢性）。近几年来,该病有＂死灰复燃＂的趋势,在不同规模的猪场时有发生,给猪场造成了较大的经济损失。2014年9月8—21日,某猪场不断发生妊娠母猪急性死亡,共计6头,其中4头晚上采食正常,次日早晨发现死于栏内（图1）;     

对多媒体教学方法的认识与实践

随着国民经济的发展,我国高等教育招生规模不断扩大,在校生人数不断增加。这给高校的教学工作带来了巨大的压力,主要表现在学生班次较多、师资短缺、教学设施不足,往往需要7~8个甚至更多的班合班上课。在这种情况下仍用“粉笔加黑板”的传统教学方法进行教学,已很难达到提高教学效果的目的。以计算机和投影仪为主体的多媒体技术的发展为解决这一问题提供了有力的工具,使在多班合并上课甚至远程教育情况下仍能保证高质量的教学成为可能。但是,任何事情都有两面性,如果对多媒体使用不当则适得其反。只有正确认识和运用多媒体教学方法,才能充分…