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为了解血清2型猪链球菌(S.suis2)河南分离株的毒力基因型及cps2j全基因突变情况,本研究扩增S.suis2毒力基因gdh、cps2j、mrp、ef 、sly、orf2和fbps,并对s.suis2的cps2j进行全基因序列测定和同源性分析.结果表明,gdh、cps2j、mrp、ef、sly、orf2和fbps基因在8个S.suis2分离株中的检出率分别为100%(8/8)、100%(8/8)、62.5%(5/8)、75%(6/8)、87.5%(7/8)、100%(8/8)和100%(8/8);其中cps2j全基因核苷酸及推导的氨基酸序列与来源不同的S.suis2分离株同源性分别达98%和97%以上,以该基因构建的系统发育树表明8株S.suis2河南分离株与国内外不同参考株同源性高,亲缘关系密切. 相似文献
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为进一步了解和掌握疫病对我省农区肉牛生产的危害程度,以制定切实可行的综合防制措施,我们对河南省肉牛群疫病进行了调查研究,报告如下。
1资料的收集和整理 调查时间为2002-2004年,选择当地政府支持、杂交改良效果好、秸秆资源丰富、群众养牛积极性高、规模养牛条件具备、基础设施完善、气候条件适宜、有一定肉牛生产基础并具有代表性的太康、商丘、鲁山、鹿邑、滑县、内乡、唐河、鄢陵、伊川、镇平、开封等11个县市进行了疫病调查,每县抽样调查2个行政村,村的人口规模与经济条件在全县范围内处于中等水平; 相似文献
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利用在大肠杆菌中表达的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白作为包被抗原,建立了检测抗禽腺病毒血清4型(FAdV-4)中国流行株抗体的间接ELISA方法。所建立方法的最佳条件为:抗原最适包被量为0.25μg/孔,包被时间为37℃1h,然后4℃过夜;被检血清的最佳稀释度为1∶800,作用时间为2h;二抗选用HRP标记的兔抗鸡IgY,稀释度为1∶4 000,作用时间为1.5h;显色液TMB作用条件为室温5 min。所建立ELISA的判定标准为:样品的S/P值大于或等于0.055 3判为阳性,小于0.041 8判为阴性。用建立的ELISA方法对抗鸡新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法有较好的特异性,组内和组间重复的最大变异系数为5.6%和5.7%,所建立的ELISA方法重复性良好。用所建立的ELISA方法对50份来自于疑似患肝炎-心包积液综合征病鸡的血清样品进行检测,阳性检出率为98%,与FAdV-4病原学检测结果符合率为100%。结果表明:本试验所建立的ELISA方法可用于抗FAdV-4中国流行株抗体的检测,为肝炎-心包积液综合征病监测和流行病学调查提供了方法。 相似文献
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采用体外定量法检测20株鸭源鸡杆菌的被膜形成能力,并对被膜形成能力较强的1株鸭源鸡杆菌在不同环境(培养时间、培养基质、营养条件)下产生生物被膜(BF)的差异进行了研究。结果显示,大部分鸭源鸡杆菌均具有不同程度形成被膜的能力,其中3株被膜形成能力中等,2株形成能力较强;鸭源鸡杆菌在银染法、试管法和微量板定量检测法中形成BF的最佳培养时间分别是24、60、24h。其生长周期为8h开始起始黏附、20h大量黏附阶段、24h时形成了完整的生物被膜、32h生物被膜老化散播,之后起始新一轮的被膜周期。葡萄糖、蔗糖及NaCl的加入均在一定程度上抑制了被膜的形成,且随着加入量增加NaCl对被膜形成抑制更显著,而低质量浓度的MgSO4在一定程度上促进BF的形成。扫描电镜观察发现,生物被膜内鸭源鸡杆菌聚集成团状、相互黏连形成致密的三维立体结构。 相似文献
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为了解河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)流行毒株的遗传变异情况和发展趋势。通过RT-PCR方法,对2012―2013年采自河南省各地疑似病料进行PRRSV检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分子流行病学分析。结果显示:54份疑似病料中17份检测为阳性,阳性率为31.5%,并分离出3株PRRSV;通过完整的ORF5基因和部分NSP2基因序列遗传进化分析表明,河南地区流行毒株主要为美洲型PRRSV,且17份阳性样品中10份与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)高度同源、2份与经典PRRSV高度同源、另外5份与美洲流行毒株NADC30高度同源,该类毒株的NSP2基因在不同部位存在393个核苷酸缺失,国内尚未见相关报道。结果表明,2012―2013年河南地区PRRSV主要流行毒株为HP-PRRSV,同时出现了新的变异毒株,使河南地区乃至我国PRRSV变异种类更加多样化,提示加强PRRSV流行及变异的监测十分必要。 相似文献
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根据GenBank中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus2,PCV2)的核苷酸序列设计2对引物,使用扩增全基因的引物对来源于河南省焦作、开封和滑县的3株PCV 2型JZ株、KF株和HX株的ORF2基因进行扩增,扩增片段克隆到pMD18 T上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,测序结果登录在GenBank上,登录号分别为EF028202、EF064149和EF467928.序列分析表明,PCV2河南分离株ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为92.4%~99.6%,氨基酸序列同源性为90.6%~97.9%,进化分析表明,河南分离株处于同一分支,与欧洲株亲缘关系较近.应用另一对引物从重组质粒pMD18-T-ORF2中PCR扩增出587 bp不包含核定位信号序列的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经IPTG诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测,表达的重组蛋白分子量约为40 kD,可被PCV2阳性血清识别,说明PCV2 ORF2基因得到成功表达. 相似文献
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2005年河南省猪圆环病毒病血清学调查 总被引:5,自引:0,他引:5
应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)进行血清学抗体检测,血清样品来自河南省6个地区的15个发病猪场。结果显示其总体阳性率为20.3%,母猪阳性率12.9%,断奶仔猪阳性率28.6%;同时对仔猪来源不同的猪场进行调查,自繁自养的猪场阳性率明显较低,而从外购买仔猪的猪场阳性率高达47.1%。由此表明猪圆环病毒Ⅱ在河南省已普遍流行。 相似文献
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河南省四种猪病的血清学监测与分析 总被引:2,自引:0,他引:2
河南农业大学牧医工程学院疫病检测中心实验室从河南省88个规模化猪场采取血清样品1095份,采用5套试剂盒检测了猪瘟(HC)、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、猪Ⅱ型圆环病毒病(PCV-Ⅱ)4种引起猪繁殖障碍综合征的传染病。其中对24个场进行猪瘟抗原检测,并对包括这24个场在内的64个猪场病例的血清样品618份进行猪瘟、猪繁殖与呼吸障碍综合征、伪狂犬病及圆环病毒病的抗体检测。结果表明,猪瘟抗原检出率是27.8%,抗体检测阳性保护率达81.3%;使用猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的猪场血清阳性率是85.7%,未使用此疫苗的猪场,阳性率高达69.5%;使用伪狂犬病毒基因缺失苗的猪场抗体阳性率33.8%;圆环病毒抗体阳性率高达73.5%。同时HC、PRRS、PR及PCV-Ⅱ的混合感染也较严重,阳性率分别为18.1%、35.7%、44.7%、78.5%,圆环病毒的阳性率最高。 相似文献