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将禽流感病毒H5N1亚型具有免疫原性的血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因,克隆于表达质粒Tmd-CMV-IRES-EGFP中,使其位于含细胞巨化病毒(CMV)早期启动子的调控下,并与增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联,将上述串联基因插入到火鸡疱疹病毒(HVT)基因的非必需区(US10)中,从而构建了带标记的重组转移质粒。将该转移载体质粒感染HVT的鸡胚成纤维细胞(CEF),利用脂质体共同转染CEF,待病毒蚀斑出现后,利用蚀斑筛选带有绿色荧光的重组病毒蚀斑,数轮蚀斑纯化,经荧光和PCR初步鉴定获得了重组火鸡疱疹病毒。 相似文献
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为建立一种能快速检测鸭坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）的分子生物学方法,从GenBank中下载了51个具有代表性的黄病毒全基因组序列及白洋淀病毒等5个禽源黄病毒株E基因序列,进行了黄病毒E基因序列分析,应用Primer 5.0软件设计了一对引物,扩增目的片段为549 bp,进行了TMUV RT-PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了TMUV RT-PCR检测方法应用该方法对收集的14份临床疑似蛋鸭鸭坦布苏病毒病发病样品进行了检测,共检出6份TMUV核酸阳性样品,检出率达42.86％。结果表明,该方法可用于水禽坦布苏病毒病的临床快速诊断、检测及流行病学调查。 相似文献
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应用同工酶标记区分玉米多胞质系的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
在以往培育成的含Ｍo１７细胞核的班米多胞质系（同核异质系）的基础上,开展了１１种多胞质系同工酶生化标记的筛选。通过在不同发育阶段选取不同部位组织样品,进行ＰＯＤ和ＥＳＴ同工酶的电泳分析结果表明,不同发育阶段不同部位组织样品,其同工酶带数与活性是不同的,选取３个发育阶段的不同组织,即授粉后９d籽粒、授粉后３４d籽粒乳和抽雄期雄穗作同工酶电泳分析,就可以将１１种多种胞质系区分开来。 相似文献
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已培育出一组多胞质系,即含Ｍｏ１７细胞核的同核异质系。在不同发育阶段,对１１种多胞质系的不同组织进行了蛋白质电泳分析,结果筛选到生化标记,从而可以生化水平上将不同的多胞质系予以区分。 相似文献