蓝莓花青素的研究进展

花青素作为一种天然食用色素,与合成色素相比,具有安全性高,资源丰富,且具有一定的营养和药理作用等优点,已在食品、医药、化妆品等领域得到了广泛的应用.近年来,由于蓝莓富含花青素,逐渐成为国内外研究的热点.本文综述了蓝莓的概况、蓝莓花青素的基本结构及种类、提取纯化技术、稳定性及其生理功能的最新研究进展,以期为蓝莓产业化发展中的技术问题提供一定的参考.     

热变性法提纯蜂王浆中SOD的初步研究

测定了蜂王浆中超氧化物歧化酶（SOD）在60℃，65℃，70，75℃4个温度条件下热击后的酶活及蜂王浆在这4个温度条件下的蛋白质总含量，根据其比活（酶活／蛋白质含量）大小可知在70℃温度条件下热处理蜂王浆是提纯蜂王浆中SOD的最佳温度。     

蜂毒肽获取方法的研究概述

蜂毒肽是蜂毒中的主要活性成分,作为典型的抗菌肽,具有镇痛、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理活性,有较大的科学研究价值和广泛的医疗应用价值。但蜂毒肽纯品获取的高成本阻碍了其开发和应用。主要从蜂毒中分离纯化和生物工程技术应用两个方面概括和比较了目前获取蜂毒肽的方法,以期为相关研究提供参考。     

不同纯化浓缩方法制备的新城疫疫苗对SPF鸡免疫效果的研究

为研究利用不同纯化浓缩方法制备的新城疫疫苗对SPF鸡免疫效果的影响,试验取经过纯化浓缩的新城疫抗原制备的疫苗、经离心未经浓缩的抗原制备成的疫苗和经浓缩未离心的抗原制备成的疫苗分别免疫30日龄SPF鸡,免疫后分别在第7d、14 d、21 d、28 d、35 d、45 d、70 d、90 d采集血清检测新城疫抗体水平。结果表明,经浓缩纯化后抗原制备的疫苗与其他两组抗原制备的疫苗相比,物理外观性状基本相同,浓缩纯化后抗原制备的疫苗其单位抗原含量更高、杂质更少,抗体水平更高,统计数据显示差异显著。因此研究得出,浓缩倍数(即抗原含量)越高,抗体水平越高,持续的时间也越长。     

猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达

本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆到pET-30a( )中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,诱导表达。结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达。     

中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶的纯化及部分性质研究

以中华蜜蜂的工蜂成体为提酶材料,经正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀,0.1 5%NaCl溶液透析,得粗酶液.用Sephadex G-150葡聚糖层析柱纯化粗酶,获得提纯的碱性磷酸酶,提纯倍数为16.79,比活力达到135.85 U/mg.以对硝基苯磷酸二钠(PNPP)为底物,测定提纯后的碱性磷酸酶的理化性质.结果表明:该酶的最适温度为45℃,最适pH值为8.6,米氏常数(Km值)为0.97×10-3mol/L.甲醛、甲醇、乙醇和乙二醇对碱性磷酸酶均有抑制作用.     

从甜瓜子叶中提取总DNA

用分子标记方法检测甜瓜杂交种子纯度,如果从真叶中提取DNA,检测周期至少需要15d。为了缩短检测周期,我们分别以甜瓜的成熟干种子、吸胀水后“露白”种子、3d龄刚转绿子叶、6d龄子叶、9d龄子叶和12d龄子叶为材料,进行了提取总DNA的研究。结果表明:除了干种子和吸胀水后“露白”种子外,其他的材料都可以提取到DNA,但是DNA的质量因子叶日龄不同而存在很大的差异。不同日龄的子叶中,以3d龄子叶提取的DNA质量好。子叶6d龄时,提取的DNA质量次于3d龄,少量DNA开始出现降解,以后随着子叶日龄的增加,DNA降解加重。另外,与以真叶为材料提取的DNA样品相比较,子叶DNA样品中的蛋白质等杂质含量高,应增加氯仿抽提纯化次数。     

柱状田头菇凝集素的分离纯化及其部分性质

经硫酸铵分级沉淀、活性炭柱吸附、DEAE-Sepharose FF离子交换层析及Sephadex G-100分子筛层析,从柱状田头菇子实体浸出液中分离到在PAGE上显示1条蛋白质染色带的凝集素ACL(Agrocybe cylindracea lectin)。经Sephadex G-100测得ACL分子量为67890,经SDS-PAGE测定,其亚基分子量分别为34673、20000和13183。ACL的中性糖含量为5．87％,氨基酸中天冬氨酸含量最高,半胱氨酸含量最低。ACL能凝集多种动物和人的A、B或O型红细胞,对鼠红细胞的血凝活性可被7种单糖和3种双糖抑制。ACL是一种对热较为稳定的凝集素。     

桑萎缩病病原类菌原体的提纯、致病性及抗血清制备研究

用0．3mol／L甘氨酸缓冲液从病桑嫩叶提取病原类菌原体（MLO）,提取液上清经硅藻土柱层析分离,其洗脱液用高速离心浓缩,制备成部分纯化的病原MLO提纯物。采用显微注射技术,将提纯病原注射到介体昆虫体内,使病原在昆虫体内繁殖,再将获毒虫放饲在健桑苗上传毒接种,获得表现典型萎缩病症状的病株。病柔韧皮部筛管细胞的超薄切片在电镜下观察到大量病原MLO粒子,证实提纯MLO具致病性。同时用提纯病原为免疫抗原制备兔抗血清,抗血清用健桑提取液吸收后,获得仅与病桑抗原产生反应的特异抗血清,免疫电泳测验、仅产生一条沉淀带。     

稻瘟菌诱导性稻叶脂氧合酶的进一步纯化及抗体制备

 采用DEAE-Toyopearl离子交换、Buty l-Toyopear l疏水层析、CM-Toyopearl离子交换、Sephacryl S100凝胶过滤和FPLCMono Q等步骤,从非亲和性稻瘟菌侵染稻叶中纯化了两种诱导性脂氧合酶,即CM-Loxl和CM-Lox2。SDS-PAGE检测结果表明:CM-Lox1和CM-Lox2为单链多肽,它们的分子量分别为98 kd和102 kd。利用微量免疫法制备了CM-Lox1和CM-Lox2的抗体,制备的抗体效价达到1:1000倍,能检测0.5~2.0 ng的抗原。免疫印迹杂交证明CM-Lox1和CM-Lox2之间存在密切的血清学关系。此外,Anti-CM-Lox1和Anti-CM-Lox2与水稻中另一稻瘟菌诱导性脂氧合酶RLL以及发芽种子出现的RL-2也存在交叉反应。