一株猪源屎肠球菌的分离及其种属鉴定

为分离出可用作猪用微生态制剂的肠道益生菌株,本研究选择锦州市凌海大业乡生态猪场为试验采样点,采集10日龄左右健康仔猪肠道粪样12份。利用MRS琼脂培养基分离培养初筛目标分离菌株的形态特征和培养特性,再通过生理生化鉴定法和16SrRNA基因分子鉴定法,最终确定1株分离菌为屎肠球菌,并命名为LN/EF1312株,为后续肠道益生球菌的益生功能研究奠定了物质基础。     

应用RT-PCR方法快速诊断猪繁殖与呼吸综合征的研究

参照国内外已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因序列设计1对引物,建立检测PRRSV的RT-PCR方法,并对长春周边不同地区10个猪场送检的20份病料进行检测。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果表明,此方法可以用于临床检测PRRSV。应用该方法从3个猪场的4份病料检出PRRSV,证实长春周边地区存在PRRSV感染。     

恒河猴源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性和致病性

为了查明引起海口市某进境实验动物隔离场3例恒河猴死亡的原因，本试验分别采集3只恒河猴的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和淋巴结样本，进行细菌分离，通过细菌形态特征、显微镜镜检、生化鉴定、16S核糖体RNA(16S rRNA)序列分析对分离菌进行病原学鉴定；采用纸片扩散法(K-B法)测定分离菌的耐药表型；采用玻片凝集法测定分离菌的血清型；采用动物回归试验分析分离菌的致病性。结果显示，从3只恒河猴上各分离鉴定出1株大肠杆菌，命名为H01株(分离自脾脏)、H02株(分离自淋巴结)和H03株(分离自肝脏);3株大肠杆菌对12种常用抗菌药物产生不同程度耐药，并且都呈现多重耐药，其中对阿莫西林、庆大霉素、氯霉素、氟苯尼考和复方新诺明表现为耐药，仅对阿莫西林-克拉维酸钾、阿米卡星和多黏菌素B表现敏感；玻片凝集试验显示，H01株的血清型为O8,H02株的血清型为O3,H03株的血清型为O9;动物回归试验显示，3株分离菌都是强毒株。本试验为实验动物恒河猴源大肠杆菌病的防治提供参考依据。     

鹅星状病毒辽宁株分离鉴定及遗传变异分析与抗原表位预测

从辽宁某鹅场无菌采集病死雏鹅肝脏、肾脏等病料，通过鹅胚接种、核酸检测、电镜观察等方法进行病原的分离鉴定，并对所分离的毒株进行遗传变异分析和抗原表位预测。经过接种病料鹅胚的病变特征观察、病毒PCR核酸扩增和序列分析以及透射电镜形态鉴定，确认成功分离到1株GAstV(goose astrovirus),暂命名GAstV/LN/202101(简称LN202101)。针对编码衣壳蛋白保守结构域N和P2 Capsid domain的核苷酸序列对该毒株进行遗传进化树和同源性分析，结果显示该毒株与江西株JX01(MZ576222.1)等近2年发现的毒株亲缘关系较近，在同一簇分支，且属于GAstV-Ⅱ型；但同源性已表现出差异。以HAstV(human astrovirus)已验证表位为参考，依据抗原抗体结合模型，结合生信方法推测以下4段序列可能为GAstV的抗原表位：453～467aa(PQADSRSRYNANITF)、508～513aa(VCNTLA)、525～553aa(TAVLRVNTSTTSTGGQITELRNRLNIADG)和585～597aa(DSNPGETFQSFKM)。结果表明，GAs...