中华蜜蜂酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶相关基因 及其全长转录本发掘与分析

为深入开展中华蜜蜂相关研究提供参考信息和基础,利用已获得的纳米孔(Nanopore)测序数据对中华蜜蜂Apis cerana cerana的酚氧化酶(phenoloxidase, PO)和丝氨酸蛋白酶(serine protease, SP)相关基因和全长转录本进行发掘和分析。通过Blast工具将中华蜜蜂所有全长转录本比对KEGG和Nr数据库以筛选出PO和SP相关基因和全长转录本。采用gffcompare软件将PO和SP相关全长转录本与东方蜜蜂参考基因组(ACSNU-2. 0)已注释基因进行比较以优化结构。使用Astalavista软件鉴定PO和SP相关基因的可变剪接(alternative splicing, AS)事件,再利用IGV浏览器进行结构可视化。通过PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline预测和分析可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)位点,并通过TBtool软件鉴定APA位点上游的基序(motif)。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因与146条转录本。优化了16个参考基因组已注释PO和SP相关基因的结构,其中5′端延长和3′端延长的基因均有7个,5′端和3′端同时延长的基因有2个。鉴定到PO和SP相关的10个基因的389次AS事件,其中最丰富的AS类型是5′端可变剪接。PCR结果证实了2次AS事件的真实性。共鉴定到34个PO和SP相关基因含有1个及以上的APA位点,其中含有3个APA位点的基因数量最多;在APA位点上游鉴定到多个motif,一致性序列为：GGHKSYWSHHTRATWTCNBHDMRRYWYRTNYTVACNGCKGCDCAYTGYR。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因和146条全长转录本,优化了东方蜜蜂参考基因组已注释的PO和SP相关基因结构,并发掘出PO和SP相关基因的389次AS事件和237个APA位点。     

牦牛G蛋白信号转导调节因子2克隆及序列分析

为了初步探讨牦牛RGS2基因的结构和功能,试验采用RT-PCR方法及TA克隆法得到麦洼牦牛RGS2基因,并运用不同的生物信息学软件对序列进行分析。结果表明:牦牛RGS2基因系列含1个540 bp的开放阅读框,共编码178个氨基酸,Gen Bank数据库中登录号为FJ786041。编码Phe的密码子UUU、编码Leu的密码子UUG、编码Ile的密码子AUU等20种密码子为该基因的偏好性密码子,确定的27种最优密码子均以G或C结尾。RGS2氨基酸序列与普通牛、绵羊、山羊相似性分别为99.5%、96.3%、96.1%。系统发育树上,牦牛与普通牛聚在一起,亲缘关系最近。     

母猪与仔猪PRRS免疫程序的观察与分析

试验旨在观察南堰猪场母猪与仔猪的PRRS免疫程序。选取15日龄乳猪、25~79日龄保育猪、产后15d及产后25d的母猪,采用猪蓝耳病毒ELISA抗体检测法,检测其母源抗体与免疫抗体水平,其中25日龄仔猪的PRRS母源抗体合格率仅41.3%,而接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后14d具有可靠保护力。因此,该场仔猪的PRRS免疫程序需要调整,免疫接种时间可提前到15日龄。产后25d的断奶母猪即免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后146d免疫抗体合格率为100%,说明所选用的高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗免疫保护期达5个月。因此,采用母猪断奶时接种该疫苗的跟胎免疫法切实可行。     

大叶早杨梅在临海的引种表现

大叶早是福建省漳州市的一个杨梅种质。2009年从浮宫镇引入接穗小苗嫁接,2010年定植于临海市小芝镇溪下村省级杨梅种质资源圃里。2014年开始投产后调查发现,大叶早在该资源圃里成熟最早,并且树势强健,结果性能好,抗病性强。异地高接后代性状稳定。通过连续7年观察,成熟期比荸荠种早5~8天,果实单果质量极显著大于荸荠种杨梅;与当地最早成熟的杨梅种质临海早野比较,成熟期提早3~4天,且果实含酸量极显著低于临海早野,可作为杨梅早熟品种适当发展。     

奶牛生物钟基因BMAL1真核表达载体的构建及生物信息学分析

本研究旨在克隆奶牛脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1基因（Brain and Muscle Arnt-Like Protein 1,BMAL1）的蛋白编码序列（Coding Sequence,CDS）并构建其真核表达载体,运用生物信息学方法解析其CDS序列和编码蛋白特性。以牛肝脏组织为材料,利用PCR技术扩增奶牛BMAL1基因中带有同源臂的CDS片段。采用同源重组法,将目的片段连接至酶切线性化的pc DNA3.1-Puro-N-3HA真核表达载体上,酶切及测序结果均符合预期的质粒命名为pc DNA3.1-3HA-c BMAL1。将空载与重组质粒分别转染至HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR技术（q PCR）和Western Blotting技术检验奶牛BMAL1基因的过表达效果,并利用生物信息学软件分析BMAL1基因CDS区及其编码蛋白的特性和功能。结果显示,pc DNA3.1-3HA-c BMAL1真核表达载体构建成功,将该质粒转染至HEK293T细胞后,成功实现了BMAL1在m RNA和蛋白水平的过表达;牛BAML1基因与绵羊、山羊同源性最高,BMAL1蛋白为不稳定蛋白,其上不存在...     

云南野生药用蜜源植物——粉叶小檗

粉叶小檗是云南山区常见的一种野生蜜源植物,目前尚未人工引种栽培。该植物具有较高的药用价值,是一种药用蜜源植物。文章就粉叶小檗的形态特征、养蜂价值、药用价值进行了阐述,提出对野生状态的粉叶小檗的保护建议。     

云南特色蜜粉源植物——米团花

米团花是云南的一种特色蜜粉源植物,米团花蜂蜜在色泽和风味上极为独特。米团花蜂蜜和米团花植物本身具有多种用途。米团花蜂蜜有很高的保健作用;米团花是传统地方药材,可开发成食用色素;还具有园林观赏和生态修复作用。文章通过对米团花的植物学特性、泌蜜特性、蜂蜜品质等的介绍,为米团花植物的开发利用及米团花蜂蜜的营销和扩大生产提出建议。     

离子选择电极法对北豆腐铜残留量的检测分析

通过对测定液组分和条件的摸索及对方法精密塑、加标回收率的验证,确定以离子选择电极法测定分析北豆腐样品铜含量,研究凝固剂工业级氯化镁和食品级氯化镁对北豆腐铜含量的影响关系,为评价豆腐中违法添加物提供方法指导。     

牦牛性激素结合蛋白基因克隆及组织表达研究

试验旨在阐明牦牛性激素结合蛋白(SHBG)基因CDS序列及其在母牦牛生殖轴中的表达特点,为探讨该基因在牦牛繁殖中的调控作用奠定基础。试验分别采集5头健康成年母牦牛和母黄牛的下丘脑、脑垂体前叶、输卵管、卵巢和子宫组织,根据NCBI公布的黄牛SHBG基因设计特异性扩增引物,分别采用RT-PCR技术、生物信息学方法和实时荧光定量PCR技术进行牦牛SHBG基因克隆、序列分析和组织表达检测。结果显示,牦牛SHBG核苷酸序列的编码区(CDS)全长为1 206 bp,共编码401个氨基酸,其中,亮氨酸(L)、甘氨酸(G)、脯氨酸(P)和丝氨酸(S)较多,含量分别为16.5%、9.7%、8.7%和9.0%。蛋白质分子式为C_(1944)H_(3061)N_(535)O_(566)S_(10),分子质量为43.30 ku,理论等电点5.63,与黄牛核苷酸和氨基酸同源性分别为99.0%和97.5%。SHBG蛋白为亲水不稳定蛋白,存在跨膜结构和信号肽;二级结构中主要包含无规则卷曲和延伸链,与三级结构分析一致。系统进化树表明牦牛与黄牛亲缘关系最近。SHBG基因在牦牛输卵管的表达量显著高于其他组织(P0.05),其他组织之间差异不显著(P0.05)。SHBG基因在黄牛输卵管表达量极显著高于牦牛(P0.01),在黄牛卵巢表达量显著高于牦牛(P0.05),两物种的其他组织中表达量差异不显著(P0.05)。本研究探讨了牦牛SHBG基因序列及其在生殖轴的表达特性,为进一步研究SHBG基因对牦牛繁殖调控作用提供了一定理论依据。     

汽车保养维修及管理工作分析

随着我国人民对汽车的需求量逐渐增加,出行安全也越来越受到重视,为满足人们的需求汽车的种类也在增多,而日常的保养工作成为重中之重,但是目前生活中的汽车保养维修及管理还存在机油使用、养护工作以及汽车保养不规范的问题,但是本文根据存在的问题提出规范使用汽车机油、贯彻落实安检工作等针对性的解决措施。