γ-干扰素对弓形虫MIC3的基因免疫效果研究

将编码弓形虫微线蛋白3(MIC3)的真核表达质粒pcMIC3和编码γ-干扰素(IFN-γ)的真核表达质粒pcIFN-γ各100μg混合肌肉注射,间隔2周、3次免疫Balb/c小鼠,同时设相同剂量的pcMIC3、pcDNA和PBS免疫对照组。分别以酶联免疫吸附试验(ELISA)、四氮甲唑蓝(MTT)比色法和乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测试验小鼠血清的特异性抗体、脾淋巴细胞的增殖应答和细胞毒性T细胞(CTL)活性,并观察腹腔接种弓形虫RH株速殖子后质粒的免疫保护效果。结果表明:与其它试验组相比,pcMIC3 pcIFN-γ组试验小鼠在免疫8周后的ELISA抗体水平、脾淋巴细胞的增殖应答和CTL活性显著或极显著提高,免疫小鼠45 d时的生存率为100%,能有效抵抗小剂量弓形虫强毒株的攻击。     

武汉地区鸡球虫种类的初步鉴定

从武汉郊区多个鸡场采回粪便 ,对艾维茵肉鸡进行感染 ,通过卵囊的实验室鉴定和鸡的病理剖检 ,初步鉴定出武汉地区鸡球虫有 :柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)、毒害艾美耳球虫 (E necatrix)、堆形艾美耳球虫 (E acervulina)、巨型艾美耳球虫 (E maxima)、布氏艾美耳球虫 (E brunetti)、和缓艾美耳球虫 (E mitis)等 6种 ,主要致病虫株为柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫     

黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化

选用黄瓜无毛突变体gl的子叶节为材料,对芽诱导阶段及根诱导阶段潮霉素的浓度进行筛选,分别确定2和3mg/L为其最适浓度;以pCAMBIA2301-gusA为载体,农杆菌GV3101介导,筛选出Silwet L-77(表面活性剂)的最佳体积分数为0.04%,侵染液浓度以原菌液(OD600=0.6)等倍稀释最佳;另外,对快速提取黄瓜DNA方法进行了优化。结果表明,添加500μL 0.5mol/L NaOH与200μL 100mmol/L Tris-HCl的组合最好。用优化的体系对表皮毛基因Gl进行遗传转化,获得7株阳性苗,为研究Gl基因的调控机制奠定了基础。     

湖北省规模化猪场寄生虫病综合防控措施研究

对省内不同地区８个规模化猪场的寄生虫病进行了调查，结果发现猪疥螨、弓形虫、、球虫和结节虫等为主要寄生虫。其中，猪疥螨的普遍存在，弓形虫血清学阳性率为２２．２％－６０．９％，胃肠道寄生虫感染率为６０．０－９３．３％，对调查结果进行了分析并提出了相应的防控措施。     

葡萄糖基氟虫腈处理下蓖麻内参基因的稳定性分析

【目的】筛选葡萄糖基氟虫腈（GTF）及溶剂二甲基亚砜（DMSO）处理下蓖麻Ricinus communis稳定的内参基因,为研究GTF的韧皮部装载机制提供参考。【方法】选取Actin,ARC,ef1a,SamDC,TUA6为内参基因,通过实时荧光定量PCR分析基因表达量并利用geNorm,NormFinder,BestKeeper,Delta CT软件及RefFinder在线分析工具综合比较不同时间和不同浓度的GTF与DMSO处理后,5个候选内参基因在蓖麻幼苗子叶中表达的稳定性。【结果】各软件分析得出的内参基因稳定性排名依次为geNorm：Actin=ef1a>SamDC>ARC>TUA6;NormFinder：SamDC>ARC>Actin>ef1a>TUA6;BestKeeper：Actin>ef1a>SamDC>ARC>TUA6;Delta CT：SamDC>Actin>ARC>ef1a>TUA6; RefFinder：Actin>SamDC>ef1a>ARC>TUA6,而单独分析DMSO处理时,稳定性排名则为：ef1a>SamDC>Actin>TUA6>ARC。【结论】综合分析GTF和DMSO处理,Actin的表达最稳定;在DMSO处理下,则ef1a最为稳定。     

天津市着力提升农机管理服务水平

2011年，天津市农机监理站启用了农机安全监理网上审批系统，新增2条移动检测线。农机驾驶员考试中心的建成，使其监理服务能力得以进一步加强。去年全市共检验拖拉机10939台，其中新注册登记1818台；     

蛋白AG检测多种动物弓形虫抗体AG-ELISA的效果评价

利用建立的可检测多种动物弓形虫抗体的AG-ELISA方法,检测了人工感染及自然感染4种动物血清中的弓形虫抗体.对人工感染猪血清的检测结果表明,AG-ELISA法可于感染后第10天全部检出阳性,早于MAT方法的第14天,其检出率、敏感性及准确度等指标亦优于MAT法.在对临床上304份动物血清检测中,AG-ELISA法对猪、羊血清的阳性检出率高于MAT法,而对犬、猫血清的栓出率则与MAT法相同.Kappa一致性试验表明,AG-ELISA法与MAT法符合良好.上述结果证实AG-ELISA法可用于多种动物弓形虫抗体的检测.     

实验感染血吸虫牛、兔抗体的消长规律

用家畜血吸虫病金标免疫渗滤法试剂盒(以下简称试剂盒)检测实验感染血吸虫治疗前后3头牛和3只兔的血清中的血吸虫抗体水平.结果表明,1号、2号和3号牛分别于感染后第3周、第4周和第2周检测到血吸虫抗体,于治疗后第29周、第27周和第39周抗体转阴.1号、2号和3号兔分别于感染后第3周、第3周和第4周检测到抗体,于治疗后第35周、第17周和第39周抗体转阴.用试剂盒检测可比粪孵毛蚴法提早2周检出病畜.表明本试剂盒可用于家畜血吸虫病的早期诊断,并且在患血吸虫病家畜治疗10个月后,用本试剂盒的检查具有疗效考核价值.     

猪蛔虫rAs37基因的克隆及原核表达

根据编码rAs37的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术从猪蛔虫感染性虫卵的cDNA中扩增编码rAs37的部分基因,克隆入pGEX-KG表达载体,转化入E.coli DH5α感受态细胞,经含氨苄青霉素琼脂平板筛选,小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定.然后阳性重组质粒转化入E.coli BL21-CodonPlus, IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定.结果显示,扩增的rAs37基因与GenBank中相应基因序列(AB078971)的同源性达100%,表达的rAs37融合蛋白表观相对分子质量约为60 000,且可被兔抗猪蛔虫免疫血清识别.说明所获得的表达蛋白质具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立猪蛔虫早期诊断方法和研制猪蛔虫的亚单位疫苗奠定了基础.