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应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的Annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除Annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,Annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的Annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为Annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。 相似文献
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本试验旨在研究竹叶提取物对奶牛瘤胃体外发酵参数及产气量的影响。试验选用健康、体况相近的荷斯坦奶牛用于瘤胃液的采集,以精粗比为4∶6的全混合日粮作为发酵底物。试验组分为6组,各组分别添加0(对照)、0.75、1.50、3.00、4.50、6.00 mg/g的竹叶提取物,每组6个重复,每个重复3个批次。体外发酵24 h后,记录产气量,测定瘤胃发酵参数。结果表明:1)各组的发酵液pH均无显著差异(P>0.05)。试验组的发酵液中氨态氮(NH_3-N)浓度均显著低于对照组(P<0.05),其中3.00和4.50 mg/g竹叶提取物组的发酵液中NH_3-N浓度显著低于其他各组(P<0.05)。试验组的发酵液中干物质消失率均显著高于对照组(P<0.05)。2) 4.50、6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中总挥发性脂肪酸浓度显著高于其他各组(P <0. 05); 3. 00、4.50、6. 00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中乙酸浓度显著高于其他各组(P <0. 05); 4. 50、6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中丙酸浓度显著高于对照组(P <0. 05); 3. 00、4. 50、6. 00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中丁酸浓度显著低于其他各组(P<0.05); 6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中异戊酸浓度显著低于对照组(P<0.05)。各组的发酵液中异丁酸、戊酸浓度以及乙酸/丙酸均无显著差异(P>0.05)。3)试验组的体外发酵甲烷体积和甲烷含量均显著低于对照组(P<0.05)。各组的体外发酵产气量无显著差异(P> 0.05)。综上所述,体外条件下添加竹叶提取物在不影响瘤胃发酵模式的同时可以显著降低甲烷排放,其中添加4.50 mg/g竹叶提取物效果最佳。 相似文献
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陈勇江王金荣苏兰利乔汉桢李国辉 《饲料研究》2019,(1):118-120
甘露寡糖作为饲料添加剂,可以提高动物的生产性能、改善动物肠道消化环境,还可以提高动物的肠道黏膜免疫功能,较为广泛地应用在动物生产中。综述了甘露寡糖在动物体内的作用机制,并阐述其在家畜、家禽以及水产动物生产中的应用。 相似文献
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苏新路 《河南畜牧兽医(综合版)》2019,(4):16-17
1品种和引进情况简述夏洛来羊是国际知名肉用羊品种,该品种原产于法国中部的夏洛来丘陵和谷地,是以英国莱斯特羊、南丘羊为父本、当地的细毛羊为母本杂交而育成。该羊具有生长发育快(成年公羊110~140kg,母羊达75~95kg)、屠宰率高(达50%以上)、繁殖性能好(年产羊羔2~3只)等特点。 相似文献
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猪圆环病毒病(PCV)是由猪圆环病毒感染,以免疫抑制为主要特征的一类病毒性传染病,临床表现较为复杂,圆环病毒对免疫器官有严重的侵害性,可导致机体免疫系统免疫高度抑制。猪圆环病毒目前尚无疫苗和特效治疗药物,一旦爆发流行,养猪业将会遭受巨大的经济损失。 相似文献
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2004年10月,河南省西华县皮营乡马楼村一猪场发生了以发烧、皮肤发红、大便干燥、尿黄,后期耳朵发紫为主要特征的疾病,经化验室诊断为附红细胞体、链球菌和圆球病毒混合感染。进行综合治疗后,效果较为明显,现将诊治情况报告如下。 相似文献