柑橘黄龙病可视化LAMP检测技术的建立及应用

建立柑橘黄龙病(HLB)可视化环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为HLB的快速检测提供有力的技术支持。根据LAMP技术原理,针对柑橘黄龙病菌16S rDNA靶序列的6个位点设计4条特异性引物,通过对反应体系和反应条件的优化,并在反应前的体系中加入1∶10的钙黄绿素(calcein)和氯化锰(MnCl2)混合液作为荧光显色剂,建立可视化LAMP检测技术,同时对该技术的特异性、灵敏度和样品检测进行了测试。该检测方法具有很高的特异性,反应体系中除了HLB具有特异性的扩增,产生黄绿色荧光扩增产物,其他供试菌株均无特异扩增。对柑橘黄龙病菌总DNA的检测限为1.51×10-3 ng/μL,而对含有目的基因的CG-pMD18-T质粒DNA的检测限为2.12×10-6 ng/μL,与定量PCR灵敏度相当,而比常规PCR灵敏度高1 000倍。利用可视化LAMP技术和定量PCR对来自漳州、南平、福州等地的样品进行检测,结果 2种技术的检出率均为76.7%,符合率达到100%。     

西藏麦类主要病害的综合防治策略

西藏多数农区的气候凉爽、干燥,土壤温湿度也较低,导致了麦类病害以种传病害和喜低温的条锈病等为主。西藏各主要农区年月均温和降雨量均较低,尤其是作物生长初期的降雨量少,例如:拉萨以西地区降雨量多集中在7、8、9月,此时正是青稞、小麦生长后     

MoHRD3基因参与调控稻瘟病菌的生长发育和致病力

 稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)作为主要的农业病原微生物,其引起的稻瘟病严重威胁着水稻等谷类作物的生产安全。内质网相关蛋白质降解途径(Endoplasmic reticulum-associated protein degradation, ERAD)是生物体应答内质网压力的主要方式之一,其在机体生长发育过程中具有重要作用。而HRD(HMG-CoA reductase degradation)复合物作为ERAD的关键组分,主要由Hrd1、Hrd3、以及凝集素Yos9等蛋白组成,负责内质网中错误折叠蛋白的识别、转运以及泛素化过程,最终由蛋白酶体降解,从而有效缓解内质网压力,保证细胞的正常生理活动。有研究表明,Hrd3属于单次跨膜蛋白,在内质网腔中与Hrd1、Yos9相结合,负责底物的识别并起着稳定Hrd1的作用。目前Hrd3在稻瘟病菌中的生物学功能尚不清楚。本研究通过基因敲除及互补试验获得了稻瘟病菌的ΔMohrd3突变体和ΔMohrd3-C回补菌株,并以野生型为对照,对突变体的生物学表型进行了分析。结果显示,ΔMohrd3突变体的生长速率、产孢量明显下降;对大麦和水稻的致病力显著减弱。进一步胁迫试验表明,MoHRD3的缺失导致稻瘟病菌对外界盐胁迫、渗透压胁迫的耐受性增强,对内质网胁迫耐受性减弱,而对细胞壁胁迫无明显变化。同时,MoHRD3基因的缺失激活了未折叠蛋白响应途径(Unfolded protein response, UPR)。上述结果表明,MoHRD3参与调控稻瘟病菌的营养生长、无性繁殖、致病及对不同环境胁迫的响应过程。     

大学英语课程融入文化教学刍议

语言是文化的载体,是文化重要的组成部分,语言与文化密不可分;文化教学是语言教学的主要组成部分,大学英语课程融入文化教学对提高学生跨文化交际能力非常重要。文章在国内学者调查研究的基础上,分析目前大学英语教学过程中文化教学的现状与问题,提出了推动和改进文化教学的建议。     

草酸对拟南芥的毒性及其在筛选拟南芥突变体中的应用

菌核病菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib．)de Bary]引致75科408种和42个亚种的植物发生菌核病。该病是世界粮油作物、蔬菜等农作物生产上的分布最广、为害最严重的病害之一。我国油菜、大豆和保护地蔬菜的菌核病问题十分突出,严重时会导致毁灭性的损失。该病寄主范围极广,不具典型的基因对基因关系,给研究其致病和抗病分子机制带来了极大的困难,由此带来的抗原缺乏是防治该病的最大困难。有关油菜抗菌核病的筛选研究表明,尽管不同品种间抗病性有差异,但未发现高抗和免疫的材料;组织培养、诱变能创造一些新的类型,而且还可以不同程度地提高抗性,但多为中抗材料。所以更广泛、更全面地发现和创造抗原材料是今后的一个研究方向。     

福建柘荣太子参发生一种严重的新病害

 太子参又名孩儿参Pseudostellaria heterophylla(Mig.) Paxex Paxet Hoffm,为石竹科宿根性草本药用植物。     

POR6与MGR586同源性及其所揭示的稻瘟病菌DNA指纹特征之比较

Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析明确了稻瘟力重复序列ＰＯＲ６与ＭＧＲ５８６没有同源性。以ＰＯＲ６与ＭＧＲ５８６为探针，比较分析了稻瘟病菌基因组ＤＮＡ指纹，表明两所揭示的ＤＮＡ指纹特征不同，但依据其指生所进行的谱系分析结果却有相同的趋势，而且ＰＯＲ６－ＥｃｏＲＩ组合在５．１－１４．９ｋｂ之间比ＭＧＲ５８６－ＥｃｏＲＩ揭示的ＤＮＡ指纹更为丰富，说明除了ＭＧＲ５８６外，ＰＯＲ６也是稻瘟病菌群体遗传结构研     

rep-PCR法对稻瘟病菌有性后代随机群体的评价

构建稻瘟病菌有性后代随机群体是研究目的基因遗传特点,乃至克隆目的基因的重要基础,但是在建立有性后代随机群体时,可能会有无性后代污染。采用先分离单个子囊,待其长成菌落并产生分生孢子后,再分离单个萌发的分生孢子的方法构建稻瘟病菌有性后代随机群体。利用基于重复DNA序列Pot2的rep-PCR方法对分离得到的有性后代进行DNA指纹分析,并评价构建的稻瘟病菌有性后代群体的质量。结果表明,构建的有性后代随机群体共包含176个后代。每个后代个体的DNA指纹图谱均与两亲本的DNA指纹图谱不一致;有性后代之间的DNA指纹图谱也彼此不一样,说明得到的有性后代个体都是由子囊孢子萌发形成的,且分离自不同的子囊。GUY11的rep-PCR扩增片段中的5个特异性片段的分离比例也都符合1:1的期望值,是按单个位点标记分离的,与已知的结果相吻合,说明有性后代随机群体的质量较高,不存在偏离现象,是一个较为理想的群体。同时,研究结果还得出基于Pot2的rep-PCR方法可以用来快速评价稻瘟病菌有性后代群体的质量。     

福建菌物资源研究与利用现状,问题及对策

阐述了菌物的含义及其经济重要性，总结分析了福建省菌物资源研究与利用现状和存在的问题，并提出了相应的对策。     

全基因组预测稻瘟菌的分泌蛋白

【目的】分泌蛋白多为病原微生物与植物受体蛋白起作用的激发子和其它致病因子，深入研究分泌蛋白将有助于明确植物与病原微生物互作的分子机制。利用稻瘟菌基因组学研究成果，结合计算机技术和生物信息学的方法，分析其分泌蛋白组学，将有助于全面掌握其致病因子的结构与功能。【方法】利用SignalP对稻瘟菌基因库中所有ORF的N-端信号肽存在与否进行预测，再依次通过Protcomp、TMHMM、big-PI Predictor和TargetP预测程序进行验证，寻找出所有可编码信号肽的基因。【结果】对11 108个稻瘟菌的ORF进行分析，最终预测出共有1 235个ORF可编码分泌蛋白。【结论】经验证此预测方法之可靠性较高，这为深入研究分泌蛋白组学奠定了基础。