鸡镉中毒各组织器官镉的含量及影响

为深入探讨镉在鸡各组织器官的分布,选择1日龄雏鸡120只,随机分成两组,通过在日粮中添加一定剂量的镉饲喂雏鸡,建立慢性镉中毒模型。并于9、18、27、36、45日龄时,每组分别抽取8只鸡进行宰杀,采集肌肉、骨、心、肝、脾、肺和肾组织,用原子吸收分光光度法测定其中镉的含量。结果表明,镉在雏鸡体内各组织器官的分布随饲料中镉含量的增加而增加。     

猪Ghrelin基因的克隆及原核表达

从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA，根据已发表的猪的Ghrelin mRNA序列设计合成引物，通过RT-PCR进行cDNA扩增，获得了282bp的片段。将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析，确认PCR产物为Ghrelin cDNA。从阳性克隆中提取质粒，经NheⅠ和XhoⅠ双酶切，回收282bp的目的片段，定向克隆到pET-28a表达载体中，提取质粒并再次转化到BL21（DE3）中，成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测出猪Ghrelin基因的表达．     

日粮铜对猪生长性能及血清GH、INS、IGF-I、IGFBP3水平的影响

选用60头断乳"军牧1号"白猪,分成6组,每组10头,分别饲以添加0、100、150、200、250、300 mg/kg铜(硫酸铜)的日粮,进行为期80 d的饲养试验,定期称重、采血,观测铜对仔猪生长性能及血液GH、INS、IGF-I、IGFBP3的影响.结果表明基础日粮中添加100～300mg/kg铜均能促进仔猪的生长,降低饲料消耗,其中以250mg/kg铜和第40～60天最为显著(P＜0.01).高剂量铜能显著提高循环血液中GH、INS、IGF-I、IGFBP3的水平,其中以添加250mg/kg铜水平,于试验期第20～40天最为明显(P＜0.01).高铜促生长作用显然是通过促进GH、INS、IGF-I的合成和分泌而实现的.     

神经内分泌因子、代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞胰高血糖素受体mRNA丰度的影响

为阐明神经内分泌因子胰岛素（In）、胰高血糖素（GLN）、瘦素（LEP）和代谢产物非酯化脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHBA）、葡萄糖（GLU）在奶牛肝糖代谢、脂代谢中的调控作用，应用荧光定量PCR（fluorescent quantitative PCR）法观察了神经内分泌因子、代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞胰高血糖素受体（glucagon receptor，GLNR）mRNA丰度的影响。结果显示：随着培养液中In、NEFA、BHBA和GLU的升高，GI。NRmRNA表达逐渐增加（P〈0．01）；随着培养液中GLN浓度的升高，GLNRmRNA表达逐渐降低（P〈0．01）；而随着培养液中瘦素浓度的升高，GLNRmRNA的表达呈先升高后降低的趋势（P〈0．01）。表明：神经内分泌因子In、GLN、LEP和代谢产物NEFA、BHBA、GLU直接调控新生犊牛肝细胞GLNRIT／RNA的表达。     

瘦蛋白对体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA表达的影响

取单层生长良好的脂肪细胞，采用单因素试验，分别添加浓度为5ng／mL外源牛重组瘦蛋白（每12h添加1次）不添加作为对照至4、12、24、36、48和72h后提取总RNA，每个处理3个重复（孔），应用竞争RT-PCR法检测外源瘦蛋白对初生犊牛脂肪细胞Leptin长型受体（Ob—Rb）表达水平的影响，结果与对照组相比在12～24h内随着培养时间的增加，脂肪细胞Ob—Rb表达水平量亦显著增加（P〈0．01），之后其表达量逐渐回降，在48～72h趋于平稳（P〉0．05）。结果表明，在一定时间内瘦蛋白可提高体外培养的新生牛脂肪细胞Ob-Rb mRNA的表达水平。     

应用ELISA法诊断非典型猪瘟的报告

近年来,猪瘟的流行特征发生了重要变化,出现了以非典型、隐性感染为主的流行趋势,致使猪瘟的临床诊断更为困难.酶联免疫吸附试验(ELISA)是快速检测猪瘟的有效方法.本试验通过应用ELISA法检测非典型猪瘟病例,摸索出诊断非典型猪瘟的可靠方法.发现非典型猪瘟——流产型猪瘟病例,其血清中不含抗病毒抗体,因此诊断本病必须通过检测病毒的方法.     

牛抵抗素基因的克隆及原核表达

从健康新生牛大网膜脂肪组织中提取总RNA,根据已发表的牛Resistin mRNA序列设计、合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了343 bp的片段。将该片段克隆于pMD18-T载体后进行序列分析,确认PCR产物为牛Resistin cDNA。从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,回收343 bp的目的片段,定向克隆到pGEX-6P-1表达载体中,提取质粒并再次转化到BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出牛的Resistin基因的表达。     

干奶期不同能量水平对奶牛血中神经肽 Y和生长激素浓度的影响

将健康围产期奶牛30头随机分为3组．预产前28d按奶牛营养需要分别饲喂100％、120％、80％能量日粮，产后各组奶牛均饲喂标准的产奶日粮，至产后56d结束，观测干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血中神经肽Y和生长激素浓度的影响。结果表明，干奶期低能量日粮饲喂，奶牛血中神经肽和生长激素浓度均高于其他2组，从产前14d至产后28d组间差异显著（P〈0.01；P〈0.05），提示低能量饲料饲喂干奶期奶牛，产后能量负平衡得到缓解。     

产前不同营养水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响

将健康的围产期奶牛30头随机分为三组，分别于产前28d开始饲喂NRC标准日粮（营养水平100％组，即Ⅰ组）、NRC标准增加20％日粮（营养水平120％组，即Ⅱ组）和NRC标准减少20％日粮（营养水平80％组，即Ⅲ组），产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮，至产后56d结束，观察干奶期不同营养水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响。试验结果表明，围产期是机体生理状况处于剧烈变化的时期，奶牛产后的蛋白质代谢活动、转氨酶活性较产前明显增强；但健康奶牛均能通过调整糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢，促进能量与营养物质间的相互转化，适应机体的各种生理变化。     

不同能量摄入水平对围产期奶牛肝MTP mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同，年产奶量大于7000kg的围产期荷斯坦奶牛30头随机分为3组，每组10头，低能量组（Ⅰ组）按中国奶牛营养标准2000年版减少20％日粮（能量摄入80％），高能量组（Ⅱ组）则按此标准增加20％日粮（能量摄入120％），对照组（Ⅲ组）按标准日粮（能量摄入100％）饲喂，试验从产前28d到产后56d结束，分娩后各组均按标准配制相同的泌乳日粮。分别于产前28、14d及产后1、14、28、56d采取肝活体组织。应用内对照RT—PCR方法检测肝脏组织MTPmRNA丰度。结果显示，各组奶牛肝MTPmRNA丰度均呈现先升高后降低的趋势。产后均高于产前，且产后1～28d差异显著（P〈0．01或P〈0．05），而后回降，至56d趋于平稳（P〉0．05）；Ⅲ组肝MTP mRNA丰度在产后1d达到峰值，而Ⅰ组和Ⅱ组在产后14d达到最大值（P〈0．01）；Ⅱ组产后1～28d显著高于I组。产后14d显著高于Ⅲ组（P〈0．01）；Ⅲ组产后1d和28d显著高于Ⅰ组（P〈0．01或P〈0．05）。这些结果表明，围产期奶牛能量摄入水平对肝MTP mRNA丰度有显著影响。