脊椎动物病毒分类的新近变化

自从国际病毒分类委员会发表第7次分类报告以来,随着学者对病毒研究的不断深入,病毒分类也随之不断变化。从2000年的第7 次分类报告到2004 年的第8 次分类报告,动物病毒分类变化不是太大,原来的3个目没有变,增加了6 个科,而涉及脊椎动物病毒的只有Roniviridae 科。在属的水平上变化较多,包括新增设了27个属,更改了4个属的属名,正式确定命名了4 个属的属名。在种的水平上变化的更多,主要是增加了一些新的种。     

饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量.用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS/M进行检测.色谱条件: ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm i.d.,1.7 μm),流动相乙腈 0.1 %甲酸溶液,梯度洗脱流速0.3 mL/min.采用电喷雾串联四极杆质谱检测.结果表明,孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng/mL时线形良好,在1～100 μg/kg的添加水平条件下平均回收率为68.5 %～91.6 %,该方法的检测限为1.0 μg/kg.     

固始鸡α干扰素基因克隆与序列分析

参照GenBank上登陆的鸡α干扰素基因序列设计一对引物,应用PCR技术直接从固始鸡肝组织基因组DNA中扩增鸡α干扰素基因.将特异性片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化JM109感受态细胞,经质粒PCR鉴定及酶切鉴定筛选阳性菌株送往大连宝生物公司测序.测序结果表明,固始鸡α干扰素基因为582 bp.用DNAStar软件对克隆的固始鸡α干扰素基因与GenBank发表的其它品种鸡α干扰素基因序列进行同源性分析,核苷酸同源性在97.9%以上,氨基酸同源性在96.9%以上.     

HPLC法测定麻杏石甘散中甘草酸的含量

建立HPLC法测定麻杏石甘散中甘草酸含量的方法。色谱柱为Waters XBrigeTMC18（4.6 mm×150 mm,5μm）;以甲醇-0.2 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（45∶55∶1）为流动相;流速：1.0 mL/min;柱温：30℃;检测波长：250 nm。甘草酸铵的线性范围为43.47-217.40μg,R=0.999 6,平均回收率为92.44%（RSD=1.6%）。本方法快速、简便、准确,能有效测定麻杏石甘散中甘草酸的含量。     

高效液相色谱法测定氟苯尼考预混剂中喹诺酮类药物的方法研究

建立了高效液相色谱法检测氟苯尼考预混剂中非法添加氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星的方法。用十八烷基键合硅胶色谱柱,以流动相A（磷酸3．0m1加水至1000ml,用三乙胺调pH值至3．0±0．1,加乙腈50m1）一甲醇（88：12）为流动相,采用二极管阵列检测器,采集波长为200～400nm,分辨率为1．2nm,记录光谱图和283nm波长处的色谱图,流速1．0ml／min,柱温30℃。结果显示,4种喹诺酮类药物的浓度在0．5～200ug／ml范围内呈良好的线性关系,添加回收率在99．2％～100．2％之间,相对标准偏差在0．18％～0．85％之间,检测限0．5mg／g。本方法快速、准确,可用于氟苯尼考预混剂中非法添加喹诺酮类药物的定性和定量检测。     

鸽Ⅰ型副粘病毒病的诊断与防治

2005年10月份，郑州市某肉鸽场发生以肠炎、严重腹泻和神经症状为特征的传染病，经流行病学调查、病理剖检和实验室诊断，确诊为鸽Ⅰ型副粘病毒感染，报告如下。     

河南省猪源沙门氏菌分离鉴定、血清分型及药物敏感性分析?

为了解河南省猪源沙门氏菌的血清分型和耐药性,从郑州、开封、焦作等5市生猪屠宰场抽取猪盲肠内容物样品840份进行沙门氏菌分离。采用PCR、BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定系统和血清凝集反应对分离菌株进行鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。结果显示:从840份样品中共分离沙门氏菌45株,分离率为5.36%(45/840);分离的沙门氏菌共分为6个血清型,其中德尔卑(Derby)沙门氏菌为优势血清型;分离的沙门氏菌对四环素、磺胺异恶唑、大观霉素、氨苄西林耐药较严重,耐药率分别为82.22%、75.56%、73.33%、73.33%。结果表明:河南省存在一定的猪源沙门氏菌污染,尤其是德尔卑沙门氏菌,需要重点加强控制;沙门氏菌耐药情况较为严重,应进一步规范养殖环节抗菌药物的使用。     

饲料中沙门菌检测技术研究进展

饲料中沙门菌是影响畜牧业健康发展和公共安全的重要因素之一。目前饲料中沙门菌的检测方法主要有传统培养法、免疫学检测方法及分子生物学检测法。本文对各种检测方法的原理、应用及优缺点进行概述。     

应用PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因序列，设计、合成1对引物，应用PCR技术对ILTV以色列疫苗株、河南分离株（ILTV-CG和ILTV-XY）进行PCR扩增，均能扩增出预期大小的目的片段，测序分析和酶切分析证实了PCR产物的特异性，而对其它禽病原体的扩增均为阴性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为21 pg。应用PCR检测人工接种后不同〖JP2〗天数采集的鸡的结膜拭子，接种后第2~5 d均能检测到ILTV。该方法可用于鸡传染性喉气管炎病的诊断和临诊样品检测。     

猪白细胞介素18全基因的克隆、真核表达质粒的构建及其在猪肾细胞中的表达

通过RT-PCR方法自猪脾脏淋巴细胞中扩增mpIL-18基因.序列测定表明,pIL-18全基因核苷酸长度为579bp,编码192个氨基酸.将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pcDNA-IL18m,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确.阳性克隆鉴定后,在脂质体作用下转染猪肾细胞(PK15),通过提取RNA检测到了mpIL-18在PK15细胞中的表达.