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小麦黄色花叶病毒外壳蛋白基因E.coli表达产物特异性抗血清的制备及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
将小麦黄色花叶病毒(wheat yellow nosaic virus,WYMV)外壳蛋白克隆到pET-30a( )上,获得E.coli表达载体pETWCP。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,pETWCP在E.coli中经IPTG诱导后,可特异地表达38.5kD的融合蛋白,光密度扫描分析结果,融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的40%。以诱导表达产物作为抗原,免疫家兔制备了特异性强的抗血清,用微量沉淀法测其效价为1:1024。该抗血清可替代常规病毒粒子抗血清,用于酶联免疫吸附测定,免疫电镜Western blotting检测WYMV。 相似文献
32.
动物生物化学教学改革的探讨 总被引:7,自引:0,他引:7
以本科生必修课“动物生物化学”的教改为背景,从课程体系、课程内容、教学方法等方面进行了探讨,提出了“动物生物化学”教改的几项措施,并在教学中进行了尝试,收到了理想的效果。 相似文献
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72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),于产后0 h试验组每只肌注CpG-DNA 200μg,对照组肌注0.01 mol.L-1PBS(pH 7.2)100μL。两组于产后72 h均经乳头管灌注2×1012CFU.mL-1金黄色葡萄球菌,每侧各100μL到第4对乳腺内(两侧);分别于灌注前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h(n=6)颈静脉放血处死。组织学观察显示,试验组乳腺腺泡内嗜中性粒细胞(PMN)在感染初期较对照组浸润迅速,试验组在72 h时已无PMN浸润,而对照组仍有浸润。与对照组相比,CpG-DNA能显著降低8、16和72 h的乳腺组织细菌数。IL-2水平在灌注后有显著下降,但与对照组相比CpG-DNA极显著提高乳腺组织0 h IL-2水平,显著提高16、24和48 h乳腺组织IL-6水平,显著降低48 h和72 h乳腺组织中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力。上述结果显示,CpG-DNA可促进炎症初期PMN的快速浸润,促进并加速细胞因子的产生及释放,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞的损伤,表明CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有保护作用。 相似文献
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应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增P物质(Substance P,SP)基因片段,将其连接于pGM-T质粒并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,测序鉴定为目的片段。分别利用pGM-T质粒中T7和SP6启动子及T7和SP6RNA聚合酶,以线性化的SP/pGM-T为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。通过原位杂交(in situ hybridization histochemistry,ISHH)技术,用新合成的探针探查SP-mRNA在鸡肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)中的分布情况。结果表明,鸡INR中SP-mRNA阳性神经元数量众多,在空、回肠段和直肠段INR中的阳性细胞分别占总神经元的82.98%和98.01%。阳性细胞呈多突起的椭圆形或梭形,在INR神经节中较有规律地层状分布或成群出现,在神经节边缘分布更为密集,并且在节间束也有少量的阳性细胞分布。本研究从基因水平证明INR中大部分神经元有SP的mRNA转录,这些神经元作为外来的SP神经纤维可以支配到肠道和输卵管。 相似文献
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在观测了中华鳖输卵管形态特征的基础上,应用免疫组织化学反应技术研究雄激素受体(AR)在中华鳖输卵管中的分布特点。结果显示,中华鳖输卵管组织存在一定的季节性变化,生殖季节输卵管上皮增厚,腺体肥大,分泌活动增强;而在非繁殖季节,上皮相对较薄,腺体处于收缩状态。AR免疫阳性细胞在输卵管蛋白分泌部、峡部、子宫部各段均有分布。阳性AR分布于输卵管黏膜上皮细胞游离面(腔面)、固有膜腺体以及储精小管上皮中。生殖季节AR反应强阳性,而在非繁殖季节AR反应较弱。中华鳖精子储存在输卵管的蛋白分泌部后部到子宫部,AR在这些区段的分布及其季节性变化的结果提示,雄激素受体可能参与输卵管精子储存部位特殊微环境的稳定,进而与精子储存有关。 相似文献
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