转酿酒酵母海藻糖合成酶基因(TPS1)玉米植株的获得

PCR克隆测序发现,酿酒酵母AS.1416菌株的海藻糖合成酶基因TPS1与原报道序列发生了11处单碱基突变,其中10个突变发生在编码区域,但9个是同义突变,不影响编码蛋白的氨基酸序列。只有1135位的G变为A,使编码蛋白的第355个甘氨酸变成了天冬酰胺。用单子叶植物逆境诱导启动子mwcs120启动TPS1基因构建表达载体,基因枪法转化玉米胚性愈伤组织,PCR检测获得阳性植株,平均达到0.56%的转化率。     

家蚕滞育性卵胚胎发育过程中蜕皮激素和保幼激素含量的变化

测定发现，家蚕滞育卵胚胎发育全过程中，蜕皮激素和保幼激素含量的变化辐度较大，保幼激素含量与胚胎发育进程的关系密切，保幼激素含量又与蜕皮激素含量有关。因此认为，虽然蜕皮激素和保幼激素对胚胎滞育性没有决定作用，但蜕皮激素和保幼激素相互拮抗又相互协调，对滞育激素控制的胚胎发育进程起某种调节作用。     

玉米HVA22基因启动子的克隆与功能验证

利用转基因技术转化利用外源抗性基因,可提高玉米对非生物逆境的抵抗能力,改良其在不良环境下的稳产性。但是,在过去的研究中,大多采用组成型启动子启动外源抗逆基因过量表达,虽然可以改良转基因株系的抗逆性,但其生长发育受到不同程度抑制,适应性代价较大。用非生物逆境诱导启动子,可培育出只在逆境胁迫下表达的转基因抗逆品种,避免正常条件下抗逆基因过量表达的不良影响。本研究以水稻HVA22蛋白质的氨基酸序列为探针,搜索玉米基因组同源mRNA序列HVA22,用PlantCARE软件分析并同源克隆其上游启动子序列,实时荧光定量PCR验证HVA22基因在非生物逆境胁迫下的差异表达,构建HVA22基因启动子HVA22s启动GUS基因的表达载体,基因枪法转化玉米愈伤组织,GUS染色检测启动活性。结果表明,玉米HVA22s启动子长度1478 bp,含有多种与非生物逆境应答相关的调控元件。HVA22基因在高温胁迫,以及脱落酸和乙烯诱导下上调表达。用HVA22s启动GUS基因转化的玉米愈伤组织,在脱落酸诱导、甘露醇模拟高渗处理、低温和高盐胁迫条件下,GUS染色均可显现靛蓝色斑点,说明HVA22s启动子确有非生物逆境启动功能,进一步验证其启动活性后可运用于玉米抗逆转基因研究。     

两种人工接种方法鉴定RNA干涉介导的转基因玉米对矮花叶病的抗性

本研究采用两种人工接种方法,以玉米成株期病情指数为指标,鉴定了63个转基因玉米株系的田间抗病性。结果表明,T4代转化株系‘47’和‘13h2-3’的抗病性达R抗级,超过抗病对照‘H9-21’。有82.5%(52/63)的转基因株系抗病性比未转化对照显著提高,表明用反向重复的RNA干涉表达载体转化玉米,可获得转基因抗病毒材料,且干涉片段适度延长可增加获得抗病材料的几率。另外,本文通过两种病毒接种方法的比较,发现采用玻璃纤维刷苗床穿刺接种比常规石英砂摩擦接种具有更小的误差。     

大豆总DNA直接导入法培育优势高蛋白玉米材料研究

利用外源总DNA转导的花粉管通道法和经我们发展的减压渗透法将大豆总DNA导入玉米自交系统48-2和S37，在743份后代材料中筛选出8份高蛋白含量变异材料，它们的蛋白质与受体相比提高20%以上。用种子蛋白SDS-PAGE、谷氨酸-草酰乙酸同工酶及RAPD等分析方法对变异材料及其受体进行了鉴定分析。同时也对此8份变异材料的自交后代进行了筛选和S37在遗传上存在明显的差异。在其自交后代中仍有部分株系保持了主蛋白含量特性。此外，48-2的变异材料的植株形态、花药颜色上有明显变化。上述结果初步证明高蛋白特性是可遗传的，这为选育高蛋白玉米新自交系提供了新材料，也为利用外源DNA直接导入技术创造玉米新种质开辟了一条行这有效的新途径。     

钙在玉米愈伤组织继代及盐诱导脯氨酸积累中的作用

通过筛选试验，将N6培养基Ca^2 含量从原来的1.13mmol/L提高到5mmol/L，对玉米幼胚胚性愈伤组织的继代具有明显促进作用，在一次继代过程中，Ca^2 含量5mmol/L的培养基培养的胚性愈伤组织相对生长量比Ca^2 含量1.13mmol/L的原培养基增加0.8倍。将愈伤组织接种于含NaCl的N6继代培养基上，其生长极显著受抑制，脯氨酸积累增加。培养基中同时添加5mmol/LCa^2 ，不仅在一定程度上缓解盐分对生长的抑制作用，而且能明显促进游离脯氨酸的积累。     

玉米叶片总蛋白提取和双向电泳技术的改进

针对植物组织蛋白质含量较低,有些组分在两性电解质中的溶解性低以及绿色组织中的色素、酚类、醌类等次生代谢产物干扰蛋白质双向电泳分离效果的问题,以玉米苗期叶片为材料,对蛋白质裂解液、蛋白质浓度测定体系、等电聚集电泳电压和时间、聚丙烯酰胺凝胶浓度等技术参数做了改进。用改进的裂解液提取的蛋白质样品浓度达3.8μg/μL,比改进前提高90%。通过在浓度测定体系中加入HCl并用裂解液代替超纯水配制标准蛋白,可得到线性更好的蛋白浓度测定标准曲线。用改进后的等电点聚焦电泳的电压、时间和聚丙烯酰胺凝胶浓度,可从玉米叶片总蛋白质样品中分离出963个清晰的蛋白点,在其他条件相同的情况下,比改进前的技术体系多分离出429个蛋白点。     

强氯安对家蚕微粒子消毒效果的测定

<正> 强氯安(原名881)是我所蚕病研究室“七五”后期研制的一种高效、广谱、低成本的新型蚕室蚕具消毒剂。在农村试验示范中,防病效果十分显著,深受广大蚕农和技术部门的欢迎。为了进一步扩大示范试验,满足蚕种场的防微需要,今年我们将强氯安与消毒效果较好的漂白粉和浙江农业大学最新研制的消特灵三种药剂对家蚕微粒子的消毒能力进行了比较试     

谈谈有效氯

<正> 在养蚕过程中,常常使用漂白粉、881等含氯的消毒药剂,而在配置适宜浓度的含氯消毒剂时,又会接触到“含氯量”,“有效氯”等含量概念,这两个概念是不是一回事?区别在哪里?有些同志并不完全清楚,现作以下简单介绍: 有效氯是指氯制剂加酸后放出的氯气量。有效氯的测定是在一定条件下,通过碘量法而测得。漂白粉加酸后释放出的氯气量、碘量法测得为25%,则有效氯就是25%。“881”主剂加酸后放出的氯气量通过碘量法测得为94%,则有效氯就是94%。     

模糊隶属法对玉米苗期耐旱性的拟合分析

在略高于玉米萎蔫系数的干旱条件下，以出苗率和生物学产量酎旱系数之乘积为指标．测定了17个玉米自交系和10个杂交种的苗期抗旱性。并用模糊隶属法．以干旱胁迫下的胚芽鞘长度,出苗率，根重．生物学产量．脯氨酸含量，电导率和离体叶片保水力等指标对各品种酎旱性进行了拟合分析。结果表明．在略高于萎蔫系数的干旱条件下．以出苗率和生物学产量的酎旱系数之乘积为指标．可以准确鉴定玉米苗期的酎旱性．与耐旱性的综合评价拟合良好(相关系数r=0．914)。