利用EST同工酶鉴定天麻品种及亲缘关系的研究

目的：鉴定3种天麻品种及其亲缘关系。方法：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对三种天麻菌株酯酶(EST)同工酶进行研究。结果：天麻不同菌株之间酯酶同工酶活性不同，酶谱条带数在4～5条，且具有特征谱带。B、G的酶谱条带数基本相同；R、B、G的酶谱条数依次分别为4条，5条，4条；其中基本酶带有3条；G号菌株与B号菌株的相似度指数为0．89，说明这两个菌株间亲缘关系最近。G号菌株与R菌株的相似度指数为0．75，反映它们之间的亲缘关系相对较远。     

动物饲养场所的审核与监管初探

2008年1月1日,经第十届全国人大常委会第二十九会议审议通过的新修订的<中华人民共和国动物防疫法>正式开始实施,如何领会并运用这部法律,加强动物卫生监督工作,是各级动物卫生监督管理者、执行者需要共同研究和探讨的课题.     

H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的原核表达

血凝素(hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的主要抗原之一,原核表达HA是该抗原特性研究和疫苗制备的关键。利用分子生物学方法构建H5N1亚型的禽流感病毒HA基因原核表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta菌株,用不同IPTG浓度和时间诱导HA表达,检测蛋白表达量,分析不同诱导条件对HA表达效率的影响,以确定最佳诱导条件。重组表达载体pET32a-HA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定,获得预期大小的DNA片段,说明HA基因成功插入质粒pET32a。Western blot检测结果表明,IPTG诱导重组菌株成功表达HA蛋白,当诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h时,HA蛋白表达量最高。研究结果为HA抗原制备及禽流感疫苗的研究奠定基础。     

杨凌4种冷地型草坪草观赏特性评价

本研究选用密度、质地、颜色、盖度、均一性、高度、绿期、草坪组成、成坪速度等9项指标,采用层次分析法(AHP)及模糊数学综合评判方法,对杨凌栽植的4种冷地型草坪草的观赏特性进行了综合评价。将这9项指标作为评价指标进行数量化测定,采用层次分析法(AHP)通过构建权重矩阵,对几种观赏草坪配以指标权重,然后结合模糊数学综合评价方法,给出草坪质量的评价等级。从而在观赏效果方面为杨凌示范区建坪草种的选择提供一些参考。实验结果表明杨凌地区冷地型草坪草观赏效果好坏程度依次是匍匐翦股颖、高羊茅、草地早熟禾、黑麦草。养护管理水平不够是这些草坪普遍存在的问题,影响草坪的观赏效果。     

油茶大树嫁接采穗圃营建技术

油茶采穗圃是为大面积栽培油茶提供优良种源的物质基础。文章以油茶生物学及生态学特性为基础,简述了油茶林嫁接前的抚育管理、大树嫁接操作技术、嫁接后管理以及油茶采穗圃生产管理技术。     

西宁市农村居民生活污水水质特征分析

选取西宁市4个地区不同收入水平的12户典型农户,分析其生活污水构成和水质特征,并对COD、NH3-N、TP、TN等污染物负荷进行了测算。结果表明,西宁市农村居民生活污水为灰水;COD、NH3-N、TP、TN的质量浓度平均值分别为523.34、4.70、4.56、18.68mg/L,呈现出夏季浓度较低,冬季浓度较高的规律;人均日产COD、NH3-N、TP、TN的负荷分别为18.95、0.173、0.166、0.690 g,污染物负荷远低于城市。     

大肠杆菌外膜蛋白F的原核表达、多克隆抗体制备及生物信息学分析

为获得大肠杆菌外膜蛋白OmpF并对其耐药性功能进行研究,通过分子克隆技术构建OmpF蛋白重组表达菌株,利用正交试验法获得OmpF菌株的最佳培养条件和表达条件,采用SDS-PAGE电泳切胶纯化方法获得OmpF蛋白,免疫小鼠获得OmpF蛋白多克隆抗体,Western blotting方法检测多克隆抗体的特异性,使用DNAMAN 8.0与MEGA 5.0软件对OmpF蛋白进行同源性和系统发生分析。结果显示,PCR扩增获得1 089 bp的ompF基因,成功构建pET-32a-ompF载体,其诱导表达产物分子质量为38 ku,与预期大小一致。正交试验获得OmpF菌株的最佳培养条件为葡萄糖浓度为0,转速为230 r/min,装液量为50 mL;最佳表达条件为诱导时菌液OD_(600)为0.5,IPTG终浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为8 h,温度为28℃。SDS-PAGE切胶纯化获得高纯度的OmpF蛋白后,利用Western blotting证实OmpF蛋白抗血清具有较好的特异性。OmpF蛋白序列系统发生分析发现,OmpF蛋白在不同种类的细菌中具有较高的同源性,OmpF蛋白产生的抗体可能为不同种细菌的感染提供交叉免疫保护作用,并且不同种类细菌中OmpF蛋白可能具有相似的分子功能。     

桑叶多糖的提取工艺研究

[目的]优选桑叶多糖的最佳提取工艺。[方法]分别用热水浸提法和水提醇沉法、超声波辅助法3种方法提取桑叶多糖,以多糖的得率为指标,优选出最佳提取工艺。[结果]热水浸提法提取桑叶多糖的较优条件为温度80℃、时间1.5 h、料液比1∶40（g/ml）;在此条件下,桑叶多糖得率约为11.3%。水提醇沉辅助法用浓度80%乙醇回流1.5 h,然后在80℃下水浴提取1.5 h,测定桑叶中多糖的得率为9.5%。超声辅助提取法提取桑叶多糖的较优方案为超声功率50 W,超声时间10 min,再在料液比1：40（g/ml）、提取温度80℃的条件下水浸提取1.5 h,测定桑叶中多糖的得率为11.6%。[结论]3种方法提取桑叶多糖的得率大小顺序依次为超声辅助法〉热水浸提法〉水提醇沉法,综合考虑成本、工作效率等因素,选择超声辅助提取法效果最好。     

柑橘黄龙病蒸汽快速热处理升温特性及田间防治效果

为了深入了解柑橘黄龙病湿热蒸汽快速热处理时韧皮部的升温特性,针对柑橘黄龙病细菌位于韧皮部的特点,构建了室内和田间试验装置,主要包含加热罩、湿热蒸汽发生装置、树体表面和韧皮部温度采集装置。通过比较热处理前后韧皮部温度变化,作物恢复程度差异和黄龙病病菌浓度变化,分析获取湿热蒸汽快速热处理合理参数组合。室内试验选用1 a生柑橘树,研究了树体表面温度为55~65℃,蒸汽输送压力为0.015和0.03 MPa,不保温和保温处理30 s对于韧皮部升温和作物恢复的影响。试验结果:树体表面温度为65℃及以上时,作物都因热损而死亡,采用60℃作为热处理温度阈值,有利于韧皮部温度提高。较高的蒸汽输送压力(如0.03 MPa),虽有利于作物所在环境温度的快速升高,但其作用于韧皮部的传热时间短,韧皮部温度并没有得到有效提高,而加热后的30 s保温处理普遍有利于韧皮部温度提高。田间试验选用9 a生柑橘树,研究了树体表面温度为60℃,蒸汽输送压力为0.03 MPa,保温时间30 s的组合参数对于黄龙病病菌浓度和作物恢复的影响。试验结果:4棵染病柑橘树经过热处理,其中2棵恢复到未染病状态,2棵病菌浓度降低。2棵未经过热处理的染病柑橘树,其病菌浓度没有变化。室内和田间试验结果表明:湿热蒸汽快速热处理能有效促进染病柑橘树的生命力恢复,明显降低病菌浓度;对于柑橘黄龙病田间湿热蒸汽快速热处理,不能只关注树体表面温度的快速提高,而应关注韧皮部温度的有效提高;热处理应考虑直接蒸汽加热和关闭蒸汽后保温的综合影响,为了增加韧皮部传热,应尽量选取较高升温上限和较低输送压力。研究结果为柑橘黄龙病田间热处理防治提供参考。     

天山北坡退化山地草甸土壤的主要理化性质分析

草地过度利用造成植被退化,土壤理化性质恶化。本研究以天山北坡退化山地草甸为研究对象,分析草地退化对土壤性质的影响,为评价草地土壤退化提供理论参考。以封育草地为对照,对比放牧草地(退化草甸土壤)机械组成、含水量及有机碳含量的差异。结果表明,草甸土壤机械组成中粉粒含量较高,达到70%以上,而且草地退化对土壤机械组成影响不大,仅在15~35 cm土层粉粒含量有显著降低(P0.05)。退化草甸土壤表层(0~25 cm)有机碳、土壤含水量显著降低(P0.05)。草甸土壤粉粒、砂粒含量与土壤有机碳、含水量极显著相关(P0.01)。因子分析表明在土壤含水量较高的山地草甸,影响土壤性质稳定性的主要因素为土壤机械组成。