雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cDNA全序列克隆及表达分析

为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列.结果显示,4种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白,而且编码的蛋白都含有与其他CDK激酶相当保守的序列PSTAVRE;同源性分析发现,4种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6％,说明Cdc2蛋白在这4种不同倍性鱼中具有高度保守性.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)对cdc2基因在G3、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫及四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析,结果发现,G3cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高,比四倍体鲫鲤的表达水平低.该研究从分子水平证明了G3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞.同时,研究表明,cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着G3多次进入S期却不经历M期导致二倍体配子的产生.     

光、温对鼠尾藻卵子排放和幼孢子体生长的影响

以成熟的鼠尾藻生殖托为材料,研究了不同温度(13～23℃)、光照度(3000～12000lx)和光照周期(15L∶9D,12L∶12D,9L∶16D)对鼠尾藻排卵及幼孢子体生长的影响。结果显示,温度在20～23℃范围,有利于鼠尾藻卵子的排放;在3000～12000lx范围内,光照度越高,越有利于鼠尾藻卵子的排放;光周期不是影响卵子排放的主要因素,光照度是鼠尾藻幼孢子体生长的重要因子;温度是制约鼠尾藻幼孢子体生长的关键因子,水温低于16℃时不利于幼孢子体的快速生长。     

大菱鲆成熟精子、卵子及精子入卵早期过程的电镜观察

通过人工授精和电镜技术,观察和描述了大菱鲆Scophthalmus maximus成熟精卵的形态、精子入卵的早期过程及精子入卵过程发生的一系列形态结构变化。大菱鲆卵子表面均匀地布满纵横交错的网纹,并整齐地分布许多微小孔,在动物极有一个受精孔。大菱鲆精子为无顶体类精子,由头部、中片和尾部三部分组成,中片有9～14个圆形线粒体。大菱鲆精子入卵速度非常快,授精后0～5s已经有精子通过受精孔(Micropyle)进入卵子。精子入卵过程还伴随着其他一些结构的变化,如精孔管管壁边缘由锯齿状变为平滑的环状等。     

大鳞副泥鳅卵子壳膜结构与授精过程的扫描电镜观察

国内外学者对鱼类成熟卵子壳膜表面结构及受精形态学的研究表明,鱼类卵子有三大类型：非受精孔型,如软骨鱼类［曲漱惠等1980］;单一受精孔型,如大多数硬骨鱼类［王瑞霞等1982,张天荫等1993,沈其璋等1990,Brummett和Dumont1979,Kuchnow和Scott1977,Iwamtsu和Ohta1981］;多个受精孔型,如鲟鱼［许雁和熊全沫1988］。然而对硬骨鱼类中某些鱼类卵子的类型持有不同的看法,如鳅类,俄国学者卡藏斯基在泥鳅卵膜上发现有三个受精孔［高洁和王瑞霞1961］;另外,近年的文献中［郑文彪等1991］也有鳅类具多个受精孔的论述。而沈其璋等［…     

莱氏拟乌贼卵子发生的组织学观察

2020年8月在福建海域用底拖网捕获雌莱氏拟乌贼Sepioteuthis lessoniana 7尾，未性成熟个体2尾，平均体质量（210±43）g，已性成熟个体5尾，平均体质量为（430±76）g，用组织切片技术观察其卵巢的显微组织学结构，根据卵子的发生特征和变化规律划分卵子发生时期。结果显示：莱氏拟乌贼卵巢内的卵原细胞个体逐渐增大，细胞核由中央偏向一端直至消失；扁平状滤泡细胞和椭圆形滤泡细胞先后包裹卵母细胞，双层滤泡细胞在卵母细胞内增多并形成指状突起；卵黄物质在滤泡细胞解体时形成，最终充满卵母细胞。根据以上特征，将莱氏拟乌贼的卵子发生划分为4个阶段9个时期，即第一阶段卵原细胞期，第二阶段无滤泡细胞期、单层滤泡细胞期和双层滤泡细胞期，第三阶段滤泡细胞增生初期、滤泡细胞增生中期和滤泡细胞增生末期，第四阶段卵黄堆积期及成熟期。本研究认为莱氏拟乌贼卵子内的滤泡细胞起到合成并分泌营养物质的功能。     

中华鳖dazl基因克隆及在生殖细胞中的表达

为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1 007 bp,其中包括5′端非编码区197 bp,3′端非编码区33 bp,开放阅读框777 bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,达96%;与小鼠Dazl同源性达75%。荧光定量PCR分析结果显示,中华鳖dazl mRNA主要在精巢和卵巢中表达,在体细胞组织中仅检测到微量表达。冰冻切片原位杂交结果显示,中华鳖dazl mRNA在生殖细胞中特异表达,且在不同时期的生殖细胞中呈动态表达模式。在精巢中,中华鳖dazl mRNA在初级和次级精母细胞中表达最强,在精原干细胞中表达水平次之,在精子细胞中未检测到信号;在卵巢中,中华鳖dazl mRNA信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布且在最早期的初级卵母细胞中信号最强,随着卵母细胞的增大,信号逐渐聚集并逐渐减弱。研究表明,dazl基因可能对中华鳖两性生殖细胞的发生具有重要的调控作用。     

鱼类母源免疫研究现状和展望

母源免疫是提高养殖动物幼体抗病能力的有效途径之一,在病害防控方面,具有防御在先、操作便利、安全环保等优点,对养殖产业持续健康发展具有重要意义。本文就鱼类母源免疫的研究现状进行了概括及评析,阐述了母源抗体动态传递、代谢变化规律、保护效力、抗体分子特征和空间分布,以及补体、凝集素、溶菌酶等多种母源免疫因子的研究进展,同时对今后鱼类母源免疫研究中需解决的关键问题进行了展望,旨在为进一步深化鱼类母源免疫机理和应用研究提供参考依据。     

鱼类卵子发育与卵泡闭锁的研究进展

鱼类种群繁衍离不开优质卵子的产出。卵子质量问题限制了许多海洋和淡水鱼类养殖业的发展。卵子质量主要受卵黄形成与卵母细胞发育的影响。亲本营养、管理以及其他内源或外源因素可能会影响卵黄组成与卵泡发育。与哺乳动物相比, 鱼类卵母细胞发育与调控机制的研究尚不清晰。本文分析了鱼类卵子发育特点, 探讨了亲本来源、育龄、环境因子以及营养等因素对鱼类卵子发生、发育与受精后仔鱼成活率的影响及其生理适应策略; 又从基因、miRNA 与蛋白表达等分子层面阐述了影响卵母细胞发育的分子调控机制; 解析了闭锁与过熟是卵泡发育的重要现象。本文在总结已有卵母细胞发育研究进展的基础上, 提出了闭锁卵泡的形成与调控可能的影响因素, 以期为深入理解卵泡闭锁在鱼类繁育生物学中的作用与其调控机制的研究提供理论参考。     

中国对虾孵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾孵子激活反应的形态学研究。中国对虾孵了皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊，内有棒状结构称棒状周边体，其内物质为凝胶前体。对虾孵子的激活并不需要精子的发动，而是在卵子与海水接触后即开始进行。在孵了激活过程中，棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层，然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展，最后完全消失 ，同时卵子进行成熟分裂放出第一，第二极体，并举起受精膜，完成激活反应。还对中国对     

大鳞副泥鳅卵子壳膜结构与授精过程的扫描电镜观察

国内外学者对鱼类成熟卵子壳膜表面结构及受精形态学的研究表明，鱼类卵子有三大类型：非受精孔型，如软骨鱼类［曲漱惠等1980］；单一受精孔型，如大多数硬骨鱼类［王瑞霞等1982，张天荫等1993，沈其璋等1990，Brummett和Dumont1979，Kuchnow和Scott1977，Iwamtsu和Ohta1981］；多个受精孔型，如鲟鱼［许雁和熊全沫1988］。然而对硬骨鱼类中某些鱼类卵子的类型持有不同的看法，如鳅类，俄国学者卡藏斯基在泥鳅卵膜上发现有三个受精孔［高洁和王瑞霞1961］；另外，近年的文献中［郑文彪等1991］也有鳅类具多个受精孔的论述。而沈其璋等［…