山羊肝片吸虫病所致肝淋巴结病变病理形态学研究

为揭示肝片吸虫的致病作用,对１１２例自然感染肝片吸虫病山羊的肝淋巴结进行了眼观及组织病理学研究。结果表明,肝片吸虫病所致山羊肝淋巴结的病变分为３种类型,即浆液性淋巴结炎,慢性增生性淋巴结炎和纤维性淋巴结炎,少数病例表现为混合型,３种类型病变的检出率分别为４４％,２１％和８％。     

几种药品对鸡隐孢子虫卵囊体外杀灭试验

隐孢子虫寄生于鸡的呼吸道、盲肠、法氏囊和泄殖腔。我国及全世界普遍分布。据报道 ,美国鸡隐孢子虫的感染率为 6 .4 % ,我国鸡隐孢子虫的感染率为8%～ 6 7.2 7%。隐孢子虫病对鸡的危害很大 ,人工感染试验表明 ,严重发病者在发病后 2～ 3日死亡 ,死亡率达 5 0 .8% [1～ 3 ]。隐孢子虫主要的感染方式为粪便中的卵囊污染饲料、饮水等经消化道感染。因此寻找有效的杀灭卵囊的药物 ,是防治该病的重要途径。隐孢子虫病的抵抗力很强 ,很多消毒剂不能将其杀灭 ,如碘酊、氢氧化钠、煤酚皂、次氯酸钠等。本试验选用了国内新近研制使用的一些消毒剂分别处理卵囊 ,以观察对鸡隐孢子虫卵囊的体外杀灭效果。报告如下。1　材料与方法1.1　化学试剂　菌毒敌 (农乐 ) ,湖南资江氮肥厂消毒剂分厂生产 ;强力清洁液 ,湖南省卫生防疫站健卫日用化工厂生产 ;速尔 2号、速尔 3号 ,湖南化工研究院研制并提供 ;漂白粉 ,市售 (含氯 ) ,优氯净 ,湖南化工研究院研制并提供 ;洗衣粉 ,湖南日用化工厂总厂生产 ;氨水 ,长沙二十二中化学试剂厂生产 ;甲醛 ,湖北大学化工厂生产。1.2　雏鸡　长沙鸡场购入的 5 5羽 1日龄长...     

1株多杀性巴氏杆菌的全基因组序列及致病相关基因分析

通过对多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)CS株全基因组的毒力基因分析,以期从基因组角度了解P. multocida CS的致病性机理。常规方法分离细菌,并进行毒力鉴定。基于二代测序平台对P. multocida CS进行测序,应用比较基因组学方法将其与GenBank中具全基因组来源于不同地域和宿主的P. multocida基因组进行比较分析。结果显示：猪肺疫病料中分离细菌滴鼻感染小鼠,测得其LD₅₀为5×10² CFU·mL^-1,显示较强毒性。将测序后的P.multocida CS株全基因组信息提交至NCBI,获得登录号SUB11119617。通过对P.multocida CS全基因组序列的分析表明,P.multocida CS株全基因组大小为2 599 048 bp,G+C含量为39.932%,编码CDs为2 580个,占整个基因组长度的69.6%,编码CDs的平均长度为952 bp。此外还有53个tRNA基因和3个rRNA基因。有87.95% 的编码CDs可进行COGs功能分类,29个为功能未知基因。利用RaAXML的最大释然法(maximum likelihood,ML)进行系统进化分析发现,P. multocida CS株与1个猪源性、2个牛源血清A型毒株,和1个猪源性D型毒株有较近的亲缘关系。P. multocida CS株含254个毒力相关基因,分为4大类11小类。其中铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统相关的多个基因在不同的毒株(包括血清型)的分布存在多态性。通过对基因出现频率的分析发现,铁摄取系统相关的tbpA和铁复合物外膜受体蛋白基因(iron complex outer membrane receptor protein gene,irp)以及黏附的相关的ppdD和ompA基因在血清A型出现的频率较高,这是否与不同菌株的毒力差异相关有待进一步证实。P. multocida CS的分泌系统由Ⅰ型(hly基因)、Tat型、Sec-SRP型3种类型组成。其中,hlyD基因在不同的血清型的分布频率存在多态性。P. multocida CS株的双组分信号转导系统(TCSs)由16个调节相关基因,12个感应相关基因和2个有hybrid相关基因。这些基因在不同血清型分布的多态性与不同菌株毒力的关系有待进一步研究。综上所述,组成铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统的基因在不同的血清以及同一血清型内出现频率存在多态性,它们与P. multocida菌株毒力强弱的关系有待进一步研究。     

日本血吸虫SjIR3基因的克隆、表达和免疫保护力

为鉴定日本血吸虫重组蛋白SjIR(3rSjIR3)诱导小鼠抗攻击感染的免疫保护力,根据已报道的SjIR(3AY251481)的cDNA序列设计1对特异性引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjIR3基因,克隆到pMD-18-simple-T载体上,测序后进行生物信息学分析。然后将SjIR3基因克隆到pET-32a( )原核表达载体中构建重组质粒pET-32a( )SjIR3,转化Escherichia coli BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。结果表明SjIR3具有PS50204和SSF69572两个结构域(domain),属泛素样蛋白激酶家族,重组蛋白rSjIR3具有良好的免疫原性。动物保护试验采用昆明小鼠,结果表明rSjIR3及rSjIR3 FCA可诱导小鼠产生高水平的抗体应答及26.63%和36.38%的减虫率,以及34.79%和44.09%的减卵率。表明日本血吸虫rSjIR3可诱导小鼠产生一定的免疫保护作用。     

SjFer与GM-CSF共表达真核表达载体诱导小鼠免疫保护效果

根据GenBank中SjFer序列设计1对特异引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjFer基因,常规方法构建质粒pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF及pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF。85只昆明小鼠分A、B、C、D和E组,分别于0、2和4周通过左后肢股四头肌注射生理盐水50μL/只,质粒50μg/只。感染前和每次免疫前采血收集血清,ELISA检测特异性IgG水平。末次免疫后2周每组随机宰杀小鼠5只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况,取免疫部位的肌肉组织通过免疫组化检查重组质粒在小鼠肌细胞内表达情况。末次免疫后2周每只小鼠贴壁感染40±1条尾蚴,45d后宰杀观察减虫率和减卵率。结果表明,重组质粒能在小鼠肌细胞内表达;A、B和C组IgG水平变化不明显,D组和E组可诱导小鼠IgG水平升高,且E组高于D组。淋巴细胞转化试验结果A、B和C组OD570变化不明显,彼此无显著差异,D组和E组脾淋巴细胞转化率明显增加,与对照组差异显著,且E组OD570明显高于D组。D组和E组可诱导小鼠产生36.27%和39.22%的减虫率、36.10%和49.04%的减卵率。GM-CSF可增强体液和细胞免疫应答并显著增强pcDNA3.0/SjFer的免疫保护力。     

猪的无公害养殖

无公害食品具有安全性、优质性、高附加值3个明显特征。无公害农产品产自良好生态环境，按照无公害农产品生产标准和操作规程生产或加工，农药、重金属、硝酸盐及激素等有害有毒物质含量（或残留量）控制在安全允许的范围内，符合国家、行业和地方有关强制性标准。生猪无公害养殖应注意如下几个问题。     

日本血吸虫SjEA基因的克隆和分析

为获得新的可表达保护性抗原分子的编码基因,以日本血吸虫虫卵抗原免疫血清筛选日本血吸虫虫卵cDNA文库,对获得的阳性克隆进行PCR鉴定并测序后,通过互联网将测序结果进行同源性分析和功能预测．结果发现,筛选到3个与GenBank中SjEA基因(登录号为AB017096)具有100％同源性的阳性克隆．序列分析表明,该基因全长774bp,编码257个氨基酸,编码蛋白的等电点为8．76,相对分子质量为28900;为一非跨膜蛋白,二级结构预测具有2个α-螺旋区,3个β-折叠区,4个无规卷曲区,具有一个称为TonB的PS00430保守区．     

猪胸膜肺炎放线杆菌ftsW基因的克隆和分析

目的:了解猪胸膜肺炎放线杆菌ftsw基因及其表达蛋白的结构、功能和进化趋势,为研究猪胸膜肺炎有效防治药物提供科学依据。方法:根据GenBank报道的有关序列,设计引物一对,用常规方法提取细菌基因组DNA,PCR扩增App ftsw基因并测序,所得序列在线进行生物信息学分析。结果:App的ftsw基因全长606bp,含一个开放阅读框(ORF),起始密码子为ATG,终止密子为TTT,编码201个氨基酸,为一跨膜蛋白,具肽聚糖糖基转移酶的功能。APP不同血清的Ftsw同源性达100%。结论:FtsW蛋白在APP各血清型的同源性甚高,FtsW可能成为广铺药物的靶点和新的疫苗候选分子。     

读者服务台

四、疾病防治 1以防为主．防重于治 我国现阶段养鸡场以中小型为主，主要形式是以农户为单位的家庭养殖，但分布呈现区域性布局．不少地方各农户的禽舍紧密相邻．连成一片．呈一种典型的小规模大群体局面。同时禽舍防疫设施又极为简陋，对禽场净化重视不够，致使几乎所有商品鸡群有隐性感染的免疫抑制性疾病，如禽白血病、网状内皮组织增生病等．     

无公害养鸡技术

无公害养殖有利于保障食品安全,适应国内外市场的需要。产地必须具备良好的生态环境,合理地使用兽药,因而可将终端产品中有害物质的残留降低到最低的限度,生产过程中必须科学合理地使用限定的兽药、饲料添加剂,禁止使用对人体和环境造成危害的化学物质。无公害养鸡必须注意以下几点。1.选择好种鸡选择生长性能好、耐粗饲、抗病力强、产蛋率高、蛋的品质好、肉质细嫩、味道鲜美可口的优良品种,包括本地品种和杂交品种,如三黄鸡等。商品代雏鸡应来自通过有关部门验收核发的父母代种鸡场或专业孵化厂,不携带鸡白痢、禽白血病和霉形体等传染性疾…