抗杀虫双品系小菜蛾抗药性的RDA分析

以抗杀虫双及敏感品系小菜蛾为研究对象，运用代表性差异分析方法对抗杀虫双品系小菜蛾在分子水平上进行抗药性机理分析。对得到的RDA序列进行BLAST分析。结果在抗杀虫双品系的RDA序列中找到了一些与人的K离子通道相关的序列，以及一条与家蚕(Bombyx mori)p50 cDNA clone ws00064高度相关的序列。这些研究结果将为进一步在分子水平上研究小菜蛾的抗性机理提供研究基础。     

小菜蛾抗药性分子遗传机理的探讨与分析

采用核型分析和代表性差异分析方法,探讨了小菜蛾抗药性的分子遗传机理.结果表明,敏感品系和抗性品系小菜蛾的染色体数目均为2n=30条,两者的核型无明显差异;以敏感品系作为驱赶扩增子,抗溴氰菊酯、抗杀虫双、抗杀螟丹近等基因系分别作为检测扩增子进行消减杂交和差异片段的富集.最后随机选取部分差异片段作探针,Southern blot验证,分别在抗杀虫双、抗溴氰菊酯和抗杀螟丹近等基因系中筛选出2、2和3个特异片段.从研究结果可以看出,与敏感品系相比,三种抗性品系小菜蛾的核型没有发生明显的变化,但在DNA水平上存在明显的差异,说明小菜蛾的抗药性与基因组DNA的变化有关.     

小菜蛾对杀虫双的抗性遗传研究

利用室内选育的敏感品系和抗杀虫双品系为亲本,采用剂量对数—死亡机率值回归线(LD-P线)分析法,研究了小菜蛾对杀虫双的抗性遗传方式。结果表明,小菜蛾对杀虫双的抗性为多基因、常染色体遗传,正、反交F_1的显性度(D)值分别为0.39、0.28,即其主效基因为不完全显性。小菜蛾对杀虫双的抗性现实遗传力较低,h~2=0.052,产生抗性的速率较慢,室内选育119代,抗性仅达122.8倍。抗杀虫双品系和遗传杂交后代(F_1、F_2、BC)对拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类、有机磷类的代表杀虫剂溴氰菊酯、灭多威、敌敌畏等的交互抗性测定结果表明,它们对3种杀虫剂无交互抗性;亲本和杂交后代的多功能氧化酶环氧化活性与杀虫双的抗性水平呈正相关性;乙酰胆碱酯酶活性要比敏感品系低;羧酸酯酶活性与敏感品系无明显差异。     

抗杀虫双和抗杀螟丹小菜蛾近等基因系的培育

将小菜蛾抗性品系与敏感品系杂交,Ｆ１代用能杀死全部敏感个体和部分杂合个体的剂量进行选择;存活个体与敏感品系回交,其后代再用上述适量药剂进行选择;存活个体与敏感品系回交。通过１２代回交,建立了抗杀虫双和抗杀螟丹近等基因系,并对其多功能氧化酶环氧化活性和生物学特性进行了比较研究。结果显示：（１）抗杀虫双和抗杀螟丹小菜蛾近等基因系的艾氏剂环氧化活性均高于敏感品系,分别为１．５６倍和１．９７倍;（２）在回交后代中,抗性水平逐代降低。小菜蛾对杀虫双和杀螟丹的抗性并未付出明显的生物学代价。     

小菜蛾对溴氰菊酯的抗性遗传分析

用选育的小菜蛾敏感品系（Ｓ）和抗溴氰菊脂品系（Ｒ）为亲本,采用ＬＤ－Ｐ线法,分析了小菜蛾对溴氰菊酯的抗性遗传方式。结果表明,抗性为常染色体多基因遗传：正、反杂交Ｆ１的显性度Ｄ值分别为－０．５０８４和－０．４５５６,其主效基因为不完全隐性遗传效应。抗性现实遗传力ｈ＾２＝０．１３５,说明抗性产生速率较快,出现高抗生的风险较大。亲本和杂交后代幼虫多功能氧化酶（ＭＦＯ）环氧化活性与溴氰菊酯抗性水平呈正相关性。